市人大代表、秀山县副县长林成芳:秀山边贸致胜法则——“秀外慧中”

“秀山的经济在增长:连续7个季度经济增速保持9%,第四次经济普查,经济总量增加100个亿;秀山的人口在增长:每年1万多外来学生来秀就读,城区人口逐年增加;秀山的辐射能力在增强:电商“村头”覆盖全国27个省市306个区县,工业园区集聚渝、湘、黔、鄂周边区县6000多人……”两会期间,重庆市人大代表、秀山县副县长林成芳接受本刊采访时,细数秀山变化。她表示,秀山将认真落实陈敏尔书记在奉节代表团的讲话精神,努力加强边贸建设,成为武陵地区的商贸物流中心、工业中心、综合服务中心。     

Marc145细胞源EDC3基因的克隆及其生物信息学分析

为获得Marc145细胞源EDC3基因序列,分析其序列特征及编码蛋白的结构和功能,本试验采用RT-PCR方法从Marc145细胞中扩增EDC3基因,并进行克隆和序列测定;应用DNAStar软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列,与参考序列经BLAST比对后分析同源性,并构建系统进化树;利用生物信息学方法对其编码区蛋白进行二级结构、三级结构、B细胞表位、跨膜结构域和信号肽预测。结果显示,Marc145细胞源EDC3基因长度为1 527bp,共编码507个氨基酸;EDC3基因编码区核苷酸序列与绿猴、猕猴、狒狒、人、倭黑猩猩、马、野猪、虎鲸、绵羊、非洲象和大熊猫的同源性在91.5%~99.2%之间,与非哺乳动物原鸡同源性最低,仅为81.2%;EDC3氨基酸序列与上述物种的同源性在95.3%~99.6%之间,与原鸡的同源性仅为88.8%。系统进化树结果显示,Marc145细胞源EDC3基因与绿猴的亲缘关系最近,其次是灵长类。蛋白结构预测结果表明,EDC3蛋白主要由α-螺旋和无规则卷曲组成,分别为23.38%和47.35%,二级结构与三级结构预测结果相符。该蛋白存在多个B细胞优势抗原表位,无跨膜结构域及信号肽区域。本试验结果可为Marc145细胞源EDC3基因功能的进一步研究提供参考。     

禽白血病A亚群病毒引起的淋巴细胞性白血病诊断

采用病理组织学方法和分子生物学技术对某肉种鸡场的感染鸡进行实验室诊断,在肿胀的肝、肾和法氏囊组织切片中观察到成淋巴细胞增生病变。针对禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原P27基因进行RT-PCR扩增,肾、肺、肝、脾病料样本中ALV病原核酸的检出率分别为100%、100%、90%和50%。将扩增的目的基因序列与GenBank公布的ALV参考毒株相应序列进行比较,核苷酸序列的同源性达到93.6%~97.7%。取ALV囊膜糖蛋白gp85基因的扩增产物进行酶切分析,扩增的目的片断中存在BglⅡ和SspⅠ酶切位点,BamHⅠ不能切割PCR产物。试验结果证实本次疫病是由ALV-A亚群病毒引起的淋巴细胞性白血病。     

猪瘟及口蹄疫不同接种方案的免疫效果比较

近年来,随着养猪规模的扩大、饲养密度的提高和猪及其产品的流通过程等因素的影响,猪传染性疾病的发生与流行日益频繁,危害程度加大.其中,猪瘟和口蹄疫是目前危害养猪业较为严重的两种传染病.目前,我国对猪瘟和口蹄疫的防制主要采取疫苗接种预防为主[1-2],但在临床上针对这两种传染病的免疫接种方案尚未形成统一的认识,有的采用先注射猪瘟疫苗后免疫口蹄疫疫苗,有的采用先注射口蹄疫疫苗后免疫猪瘟疫苗,而有的则采取同时接种的方法.     

新城疫疫苗株与分离毒株的蚀斑克隆与毒力鉴定

2株NDV贵州分离株(GN、ND99)与2株疫苗毒株(Ⅰ系和Ⅱ系)经检测为生物异质性毒株.利用蚀斑克隆技术对以上4株毒株进行蚀斑纯化,结果得到11株克隆毒株.其中,10株克隆毒株在鸡胚成纤维细胞上形成圆形、透明无色蚀斑,1株形成圆形、透明、红色蚀斑.经RT-PCR检测,11株克隆毒株中6株为弱毒,形成蚀斑的大小在0.4～8mm之间;5株为强毒,形成蚀斑的大小在1.0～2.0mm之间.结果表明:所形成蚀斑的大小与病毒毒力具有一定的相关性.     

鸭肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

根据鸭肝炎病毒(Duck Hepatitis Virus,DHV)3D基因序列,设计合成1对引物,通过优化RT-PCR反应条件,建立了DHV的RT-PCR检测方法。特异性试验结果显示,该引物仅特异性扩增出DHV 460 bp的特异性片段,而扩增鸭瘟病毒(DPV)、鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)和鹅副粘病毒(GPMV)的核酸扩增结果均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法能检测到100 pg的DHV核酸;对6份临床病料进行RT-PCR扩增,DHV的检出率为83.33%(5/6)。结果表明:该方法具有良好的特异性和敏感性,可对临床病料中的DHV进行快速检测。     

滴滤法处理村镇生活污水研究

[目的]为高效、低耗地处理村镇生活污水提供参考。[方法]研发了新型滴滤池工艺,考察滴滤池的最佳运行参数以及改善系统脱氮效果的措施。[结果]采用新型滴滤池工艺对COD、NH3-N、TN的去除率分别可达80.63%、81.7%、84.7%。滴滤池的水力负荷宜控制在2.0～4.0m3/（m^2·d）。用滴滤法处理村镇生活污水,能显著降低废水COD、NH3-N浓度,加设厌氧段能增强滴滤池的抗冲击能力,增强滴滤塔生物膜的稳定性。[结论]研发的新型滴滤池工艺能显著提高村镇污水的处理效果。     

禽淋巴细胞性白血病的病理学观察与RT-PCR鉴定

采用组织病理学观察和RT-PCR检测对贵州省某鸡场一批230日龄疑似禽淋巴细胞性白血病的蛋种鸡群进行诊断。结果表明，该批发病蛋鸡群的眼观病变明显，肝脏、脾脏、肾脏、法氏囊和盲肠扁桃体肿大2～3倍；组织学检查显示肝、肾、法氏囊等组织中有大量大小一致的成淋巴细胞散在或呈团块状增生，挤压并破坏正常组织；选取针对禽白血病病毒群特异性抗原p27基因设计引物，经RT—PCR检测，可从发病蛋鸡肝和脾组织病料中扩增出与预期大小相一致（分子长404bp）的DNA片段，其中肝的特异性病原核酸的检出率达到90％，脾的特异性病原核酸的检出率达到50％。以上结果证实，该蛋鸡场存在禽淋巴细胞性白血病的感染，且通过PCR检测可得知肝脏的病原核酸检出率明显高于脾脏。