不同光照条件对脱镁叶绿酸钠光敏抑菌活性的影响

脱镁叶绿酸钠是叶绿素代谢中间产物脱镁叶绿酸a的水溶性钠盐，具有良好的光敏抑菌活性。为探索光照条件对其抑菌活性的影响，采用菌丝生长速率法，研究在不同光照度、光波长及光照时间条件下，脱镁叶绿酸钠对忽视拟盘多毛孢Pestalotiopsis neglecta的抑制作用。结果表明:20 mg/mL的脱镁叶绿酸钠在照度为2 000 lx的白光照射下对菌丝生长的抑制率为83.7%，在黑暗条件下抑制率为77.0%，表明光照对脱镁叶绿酸钠抑菌活性有显著影响 (P < 0.05)；此外，白光的效果好于单色光；光照度及光照时间对抑菌活性也有显著影响，其中当照度为16 000 lx且光照时间为24 h时抑菌作用最强。     

中华散尾鬼笔提取工艺响应面优化及其粗提物毒力测定

采用超声提取法,以超声时间、乙醇浓度、提取温度、料液比、超声功率5因素进行单因素提取试验,而后选择对中华散尾鬼笔粗提物提取率有显著影响的3因素进行响应面分析,优化出中华散尾鬼笔粗提物的最佳提取工艺。试验结果表明:在料液比1∶80、乙醇体积分数60%、超声时间80 min时,提取率最高,为31.21%;以舞毒蛾3龄幼虫为供试昆虫,用中华散尾鬼笔粗提物进行毒力测定,试验结果表明,中华散尾鬼笔粗提物对舞毒蛾3龄幼虫的校正死亡率为59.77%。     

两种樟子松球果象甲防治技术的对比分析

在红花尔基采用天敌曲姬蜂和烟碱·苦参碱烟剂进行樟子松球果象甲Pissodes validirostris Gyll防治试验,对两种樟子松球果象甲防治技术的经济投入、人力投入、物资投入以及防治效果进行对比分析。2014—2015年连续2 a人工助迁曲姬蜂防治樟子松球果象甲,2015年采用烟碱·苦参碱烟剂防治樟子松球果象甲,2种防治方法均取得良好的防治效果。烟剂防治人力与资金投入明显大于曲姬蜂防治,但烟剂防治的速效性明显优于曲姬蜂防治。     

3种植物次生代谢物质对舞毒蛾的杀虫活性分析

为探究苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚对舞毒蛾3龄幼虫的杀虫活性以及杀虫机理,本研究通过生物测定、离体和体内酶活性实验,分析了上述3种植物次生代谢物质对舞毒蛾的杀虫效果及对其谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarE)活性的影响。实验结果表明:苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚均对舞毒蛾3龄幼虫有良好的杀虫效果,其中苦参碱杀虫效果最强,致死中质量浓度(LC₅₀)为0.420 mg/mL;离体酶活性实验发现,3种植物次生代谢物质对舞毒蛾离体GST、AChE和CarE活性均有抑制效果,其中氧化苦参碱对GST和AChE抑制作用最强,抑制中质量浓度(IC₅₀)分别为0.928和0.717 mg/mL,而苦参碱对CarE抑制作用最强,IC₅₀为0.436 mg/mL;而体内酶活性实验结果显示,苦参碱对GST抑制作用最强,在处理后48 h,GST活性达到最低,仅为同时期对照组的39%;而氧化苦参碱对AChE和CarE抑制作用最强,在处理后72 h,AChE和CarE活性最低,分别为对照组的44%和40%。以上结果表明苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚对舞毒蛾幼虫GST、AChE和CarE活性的抑制作用是其具有杀虫活性的原因之一。      

蛹虫草与黄伞复合多糖抗氧化活性研究

[目的]研究蛹虫草与黄伞复合多糖的抗氧化活性。[方法]采用超声提取法分别提取蛹虫草多糖和黄伞多糖,并将二者按不同比例复合后,在不同浓度下进行羟基自由基的清除试验。[结果]在一定的剂量配比下,蛹虫草多糖与黄伞多糖表现出很好的复合效果,清除羟基自由基的能力较单独多糖有明显的提升。其中复合比例为2∶1,浓度为16 mg/ml时清除率较蛹虫草多糖提高了79.82%,是黄伞多糖的3.6倍;通过方差分析得出,复合多糖与单独多糖之间存在显著差异(P0.05),既表现出了较好的协同作用又呈现出很好的量效关系。[结论]复合后的多糖的活性提高,表现出了较好的清除羟基自由基清除效果。     

叶绿素降解产物二氢卟吩e6的合成及对尖孢镰刀菌的光敏抑制作用

将光动力抗菌化学疗法(Photodynamic antibiotic therapy,PACT)引入植物病害防治,研究了叶绿素降解产物二氢卟吩e6(Ce6)对尖孢镰刀菌的光敏抑制作用。通过化学方法以蚕砂叶绿素为原料,在浓碱溶液中加热水解后酸化,合成叶绿素降解产物二氢卟吩e6,通过红外光谱(IR)、高效液相色谱(HPLC)等对合成产物进行结构表征。选用植物枯萎病的主要病原菌——尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)进行离体抑菌活性试验,采用菌丝生长速率法和凹玻片悬滴法分别测定Ce6在光照和黑暗条件下对尖孢镰刀菌菌丝径向生长和分生孢子萌发的抑制作用,并进行比较与分析。试验结果:二氢卟吩e6可通过蚕砂叶绿素碱水解后再酸化来合成,合成产物纯度可达62.6%。Ce6供试药液对尖孢镰刀菌菌丝生长的抑制作用随药液浓度的增大而增大,且有无光照对其抑菌效果有一定影响;20 mg/m L供试药液对菌丝生长的抑制率为41.60%,在黑暗中的抑制率为25.86%;10 mg/m L供试药液在光照下对菌丝生长的抑制作用为38.78%,在黑暗条件抑制率为14.28%,高浓度(≥10 m L)与低浓度(≤5 m L)之间差异显著(P0.05),光照条件下其EC50为35.302 mg/m L。试验结果还表明:光照条件下,Ce6能有效抑制尖孢镰刀菌分生孢子的萌发,抑制率随药液浓度的增大而增大,且其在高浓度时对光照不敏感(P0.05),而在低浓度时较为敏感(P0.05);40 mg/m L供试药液在光照下对分生孢子的抑制作用可达94.92%,在黑暗中其抑制率也可达到85.28%,均表现出了良好的抑制作用;低浓度药液在光照和黑暗条件下对分生孢子的抑制作用表现出了较大的差异(P0.05),光照条件下Ce6供试药液EC50为2.713 mg/m L,黑暗条件下其EC50为14.035 mg/m L,前者远小于后者,说明药液的抑制作用光照下使用明显优于避光使用。     

中华散尾鬼笔的液体培养条件优化及生物安全性测定

以中华散尾鬼笔为对象，以菌丝生物量为指标，通过单因素试验筛选了接种量、pH、温度、装液量等4种非营养因子对中华散尾鬼笔液体发酵的影响，优化了培养条件，并测定了中华散尾鬼笔正丁醇提取物水溶液对绿豆的他感作用及对斑马鱼的急性毒性。结果表明，中华散尾鬼笔液体发酵的优化培养条件为:培养温度25℃、pH中性、接种菌饼3片、装液量220 mL·瓶^-1，在此培养条件下，中华散尾鬼笔菌丝干重为0.66 g，较未优化之前增加了1倍。同时，中华散尾鬼笔正丁醇提取物水溶液对绿豆种子的发芽和胚轴芽的伸长均产生抑制效果，且随着提取物浓度的升高，绿豆发芽率和胚轴芽长均趋于下降，抑芽率显著升高（P<0.05）；对斑马鱼的急性毒性试验结果表明，中华散尾鬼笔正丁醇提取物水溶液对斑马鱼96 h的致死中浓度LC₅₀为426.54 mg·L^-1，属于低毒。研究为中华散尾鬼笔的进一步研究和利用提供了参考和依据，为其作为微生物源农药提供了可能。     

生物磁效应对蛹虫草液体发酵培养的影响

[目的]研究生物磁效应对蛹虫草（Cordyceps militaris）液体发酵培养的影响.[方法]利用场强为0.10T、0.25 T、0.40T恒定磁场,以流速为1 m/s,分别对普通水进行9次处理,串联（SC）磁场处理3次的磁处理水,用于液体培养蛹虫草,研究了生物磁效应对蛹虫草胞外蛋白酶、淀粉酶、多酚氧化酶、虫草素、虫草酸、多糖含量及菌丝干重的影响,并且对胞外酶活性与以上指标相关性进行了分析.[结果]0.40 T处理能显著促进蛹虫草胞外蛋白酶和多酚氧化酶活性,提高菌丝干重及虫草酸含量,相比对照组,其酶活高峰分别提高了38.98％和16.75％,菌丝干重和虫草酸分别提高了27.12％和22.93％;0.10 T处理可显著提高胞外淀粉酶活性和多糖含量,相比对照组,酶活高峰提高了34.94％,多糖含量提高了18.32％;0.25 T处理有利于虫草素的积累,比对照组提高了16.49％.相关性分析结果表明,胞外蛋白酶活性与菌丝干重、虫草酸含量在0.05水平呈显著正相关,为关键酶.[结论]不同场强处理的磁化水均能显著提高蛹虫草液体培养胞外酶活性、菌丝干重及主要药用成分含量,但影响规律存在一定的差异性,可为发酵生产蛹虫草药用成分提供理论依据和参考.     

中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌的作用机制

为探究中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌的抑制作用及抑菌机理,通过抑菌试验、酶活试验、电导率试验及菌丝微观结构观测,确定中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌的抑制作用,分析提取物对相关酶活性、培养液电导率和菌丝结构变化的影响。结果表明:中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌菌丝生长的EC50为4. 428 mg/m L;提取物对灰葡萄孢霉菌的过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、果胶酶(Pectinase)、纤维素酶(CL)活性均表现出抑制效果,其中第2天的SOD和PPO活性抑制率分别可达到65. 48%和53. 86%,POD的抑制效果在第4天达到峰值,抑制率为68. 65%;提取物对灰葡萄孢霉菌菌丝形态产生显著影响,导致菌丝生长异常、形态干瘪、菌丝分隔处出现内凹,并伴有菌丝破裂的现象产生。提取物处理的菌体细胞膜透性增强,致各时间点培养液电导率显著高于对照,其中提取物处理的第2天电导率为1 230. 579μS/cm,为对照电导率的1. 3倍。这表明中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌有抑制作用,且提取物能抑制与菌丝生长及致病相关的几种酶的活性,影响细胞膜渗透性及菌丝体形态。