玉米pTAC2影响苗期叶片叶绿素合成的转录组分析

【目的】叶绿素是参与光合途径最为重要的光合色素。叶绿体的发育及叶绿素的合成在很大程度上依赖于质体基因组与核基因组之间的双向信号传导来精确协调基因表达。通过对白化表型的CRISPR/Cas9-ZmpTAC2转基因阳性纯合突变材料进行RNA-seq研究,筛选和鉴定参与叶绿素合成的相关基因,为明确叶绿素的合成途径奠定基础。【方法】以CRISPR/Cas9-ZmpTAC2玉米转基因编辑纯合突变株系为研究材料,使用透射电镜观察叶绿体超微结构和分光光度法测定叶片叶绿素含量,确定叶绿体发育状态及叶绿素合成情况。对转基因阴性材料（CK）和CRISPR/Cas9-ZmpTAC2转基因纯合编辑材料（zmptac2）苗期叶片取样进行转录组测序。通过生物信息学分析,寻找CK与zmptac2间差异表达的基因;qRT-PCR对差异表达基因进行验证。通过酵母双杂交筛选与玉米pTAC2互作的蛋白质。【结果】共获得15株T₀转基因植株,包括绿色植株（7株）和白色植株（8株）。绿色幼苗中3株为转基因阴性材料,4株为转基因阳性（2株为未编辑,2株为杂合编辑突变）,白色植株(8株)均为转基因阳性纯合编辑。与CK相比,突变体（zmptac2）叶绿体发异常,叶绿素含量显著降低。RNA-seq的结果显示,CK与zmptac2之间共检测到1 367个基因差异表达,其中618个基因上调表达（zmptac2/CK）,749个基因下调表达（zmptac2/CK）。GO富集分析显示,下调基因显著富集到叶绿体和质体中。KEGG分析表明下调表达基因显著富集在苯丙氨酸代谢、酪氨酸代谢和异喹啉生物碱生物合成等途径。选取的15个差异基因表达模式均与测序数据相一致,表明测序结果是可靠的。与CK相比,zmptac2中依赖PEP（plastid-encoded RNA polymerase）转录的基因表达量显著降低,而依赖NEP（nuclear gene-encoded RNA polymerase）转录的基因表达量则显著上升。通过对玉米cDNA文库筛选和互作验证,鉴定出ZmpTAC3与ZmpTAC2存在互作。【结论】ZmpTAC2突变会导致叶绿体早期生物合成受阻,该基因参与叶绿体发育及叶绿素合成,且该种作用是由ZmpTAC2调控PEP相关基因表达而实现的。     

日本米虾胚胎发育及离体孵化

本研究采用自制离体孵化装置，对日本米虾(Caridina japonica)不同发育期胚胎进行离体孵化研究，结果显示，水温为25.5℃时，日本米虾受精卵孵化大约需要25 d，发育积温为637.5℃。胚胎发育历经受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、前无节幼体期、后无幼体期、前溞状幼体期和膜内溞状幼体期8个时期。各期离体胚胎均能孵化出幼体，膜内溞状幼体期离体胚胎孵化率最高，为(80.7±2.4)%，非离体孵化的对照组为(79.1±4.9)%，二者差异不显著；卵裂期离体胚胎孵化率最低，为(28.2±2.6)%，与对照组差异显著。各组离体胚胎所孵化出的Ⅰ期(ZⅠ)和Ⅱ期溞状幼体(ZⅡ)的变态率无显著差异。温度对日本米虾前溞状幼体期胚胎离体孵化影响显著，在15.0℃~32.5℃范围内，随水温升高孵化时间逐渐缩短，15.0℃时，前溞状幼体离体孵化时间为(436.8±124.8) h，32.5℃时缩短至(228.0±88.8) h，但温度高于29.0℃时，孵化出的幼体变态率开始下降。本研究可为日本米虾繁殖生物学及甲壳动物胚胎离体孵化技术研究提供参考。     

无籽刺梨染色体数目观察

以无籽刺梨组培苗根尖为材料，探讨其染色体制片技术。结果表明，无籽刺梨根尖在常温下用0.003mol/L8-羟基喹啉溶液预处理6-8h或0.004mol/L8-羟基喹啉溶液预处理4-6h后，在预冷的卡诺固定液（冰醋酸：无水乙醇=3:1中）0℃下处理15min，经95%乙醇:15% Hcl=1:1的解离液处理5min或无水乙醇:36-38% Hcl=1:1处理6min，然后用卡宝品红染色15或20min，其镜检效果较佳；无籽刺梨的染色体数目为2n=2x=14。无籽刺梨染色体制片技术研究及其染色体数目的确定对其遗传改良工作有着重要的意义。     

小黄鱼亲鱼驯养及苗种繁育

文章从小黄鱼亲鱼生活习性等特点,对小黄鱼亲鱼驯养、苗种繁育等进行深入探讨,为我国小黄鱼养殖持续发展提供帮助和支持.     

鸭坦布苏病毒致病特性及其流行病学

鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)是一种可引起鸭产蛋量下降、采食量下降的新发病毒.自2010年4月以来,该病导致中国东南沿海地区的养鸭业遭受了巨大的经济损失,并迅速蔓延至我国各主要养鸭省市.本文综述了该病的病原学、流行病学、临床症状和病理学变化及检测方法,为进一步研究鸭坦布苏病毒提供参考.     

果类蔬菜商品化分级标准制定和应用

根据终端市场客户的需求和生产中各种规格蔬菜占总产量的比例,制定了番茄、甜椒、黄瓜、茄子的分级标准.该分级标准兼顾了蔬菜产品特性、市场需求以及生产实际情况,有利于在生产及配送企业中实施推广,目前已经在北京市顺义、平谷、密云等区县的6个合作社进行了试验推广.     

奶牛隐性乳房炎致病菌的微生物学鉴定

引起奶牛乳房炎的病原微生物很多,包括细菌、病毒、真菌、霉菌体四大类。葡萄球菌、链球菌占了病原菌的90%～95%。本文就金黄色葡萄球菌(SA)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、无乳链球菌(SAG)、犬链球菌(SC)、其它链球菌(OS)、大肠杆菌(CO)、牛棒状杆菌(CB)、其它菌(OTH)的微生物学快速检测方法做了介绍。该方法能够把葡萄球菌、链球菌和其它细菌鉴别开来,并能通过试验判定其具体类型。该方法简便易行,费用较低,实用性强,适合奶牛场推广应用。     

辽东湾海蜇亲体—补充量关系的研究

以渔获量为相对资源量用Ricker模型描绘了辽东湾海蜇(Rhopilema esculenta)亲体—补充量关系,统计分析确定两者存在可置信的关系,其控制程度达58%。没有发现辽东湾海蜇资源因亲体短缺有衰败现象。     

基于PSD-LDA模型的新农合欺诈风险测度实证研究

针对新农合欺诈风险具有“低频高损”和“高频低损”的特征,运用两阶段损失分布法（PSD-LDA）测度新农合欺诈风险损失TailVaR值,以2004~2012年媒体公开报道的新农合欺诈损失数据为样本进行实证研究,计算了欺诈风险损失纯保费,并探讨了在新农合欺诈风险定价、风险准备金计提、风险补偿机制的建立以及欺诈风险预警等方面的应用。     

2019年湖南省规模牛场4种疫病血清学调查

为了解湖南省规模牛场牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛结核病、牛副结核病4种疫病的流行状况,采用ELISA方法,对全省未免疫以上4种疫病的规模牛场开展了血清学调查。结果显示：湖南省规模牛场的牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎、牛结核病、牛副结核病的场阳性率分别为51.35%、74.32%、13.64%、22.73%,个体阳性率分别为23.54%、45.45%、3.11%、4.67%。全省14个市州规模牛场均检出牛病毒性腹泻与牛传染性鼻气管炎病原抗体阳性,4个市州检出牛分枝杆菌抗体阳性,7个市州检出副结核分枝杆菌抗体阳性;不同规模牛场4种疫病的抗体阳性率存在一定差异,大规模场偏高;多重感染占比为45.45%。结果表明：牛病毒性腹泻和牛传染性鼻气管炎在湖南省规模牛场流行较为普遍、严重,部分地区还存在牛结核病、牛副结核病流行,而在大规模牛场4种疫病流行更为严重,各规模牛场4种疫病病原的多重感染情况也较为普遍。因此,湖南省规模牛场4种疫病防控形势严峻,需加强防控。本调查为湖南省此类疫病防控提供了数据参考。