猪流感病毒表位抗原设计与串联表达策略

兽用疫苗的研发,一方面已经从传统减毒的或灭活的病原微生物发展到基因重组疫苗、亚单位疫苗、表位疫苗,从传统的病原学发展到细胞、分子乃核酸水平;另一方面,疫苗的功能已从单一的预防作用发展为预防性疫苗及治疗性疫苗。对疫苗进行设计与优化,已发展成为一门独立的新兴学科。新型疫苗的设计与研制,需要的是庞大的生物信息,如基因组学、蛋白组学、核酸与蛋白相互作用等信息。随着生物信息学的迅猛发展,计算机分析与生物学技术结合得越来越紧密,为生物疫苗设计提供了技术平台。2000年,Hagmann在《Science》上率先提出了“计算机辅助疫苗设…     

牛肠毒素性产气荚膜梭菌的分离及鉴定

对黑龙江省3个地区牛场疫牛进行临床诊断，剖检结果为小肠出血性肠炎和心内外膜严重出血等症状，进行了细菌的分离培养、涂片镜检、生化试验和动物感染试验。结果表明：分离菌株均为革兰氏阳性粗短杆菌，严格厌氧，在血平板上具有双溶血环，能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和暴酵牛乳，肠毒素检测试验阳性，厌气肉肝汤培养物0．2mL小白鼠尾静脉注射，2～10h可使其致死。试验结果表明3个分离株均为产气荚膜梭菌。     

新时期下如何做好护林防火工作

森林是地球之肺,是人们赖以生存的重要资源。任何时期保护林业资源都是非常重要和必要的。然而面对森林防火年年防年年有的现状,需要在之前的实践中总结问题,积累经验,加强防火建设力度。尤其在新时期下,林业工作的重要内容及保障森林资源,做好防火工作。林业资源得以有效保护,人类才能长期持续发展。所以对于山区和林业资源丰富的地区,更应该切实做好防火工作。本文就新时期如何做好护林防火工作展开探讨,总结问题并给出了一些解决策略可供参考。     

四膜虫基因打靶载体的构建及其在虫体内的转化

 【目的】构建一个适于嗜热四膜虫（Tetrahymena thermophila）的基因打靶载体，并分析转化四膜虫的特性。【方法】以嗜热四膜虫组蛋白H4-I基因作为启动子，利用H4-I基因的5′和3′侧翼区作为同源臂，并且保留H4-I基因编码区的起始密码子ATG和终止密码子TGA，中间嵌入巴龙霉素抗性标记基因neo，从而构建一个基因打靶载体。将该载体电击转化到嗜热四膜虫接合株体内，使其同源重组到四膜虫H4-I基因上。通过巴龙霉素抗性筛选、PCR扩增目的基因对抗性虫株进行鉴定。光学和电子显微镜观察抗性虫株形态变化。【结果】成功构建了一个适于嗜热四膜虫的基因打靶载体，将其电击转化到四膜虫体内，抗性虫株的生长速度明显高于普通四膜虫，显微镜观察抗性虫株形态变小，大约是正常形态的1/20～1/30，抗性虫株表面光滑，未见纤毛。【结论】利用基因打靶载体将neo基因定向整合到四膜虫H4-Ⅰ基因内部，为今后在嗜热四膜虫体内表达外源蛋白奠定了基础。     

多重RT-PCR检测猪流感病毒及血清亚型

根据GenBank登录的猪流感病毒各血清亚型NP基因,H1、H3亚型HA基因,N1、N2亚型NA基因核苷酸序列,经DNAstar软件类比选择保守区设计引物,sPCR筛选出引物对,用于扩增猪流感病毒NP基因、血凝素H1/H3亚型、神经氨酸酶N1/N2亚型基因片段。根据NP、H1N1、H3N2亚型引物扩增片段大小和反应条件的差异,将各引物配比组合,形成引物组合,建立多重RT-PCR体系。经对不同亚型模板的扩增、检验,建立的2个多重RT-PCR体系可用于猪流感病毒及H1/H3血凝素亚型、N1/N2神经氨酸酶亚型的快速鉴别、诊断。特异性试验检测多重RT-PCR不能扩增其他猪病毒核酸,核酸的最低检测量达0.2ng。采集临床具有呼吸道症状的猪肺、鼻腔棉试子等85份,与鸡胚分离及血凝/血凝抑制试验比较,阴性样品检测符合率达100%。     

黄土高原退耕还林方针可行性研究

本文通过分析黄土高原的生态结构,对黄土高原退耕还林现状进行探讨,提出黄土高原退耕还林的可行性方针。对黄土高原的植被类型和土地资源等进行了分析和划分,为退耕还林的可行性提出了新的思路。