鸡减蛋综合症免疫斑点诊断法的研究

本研究以鸡减蛋综合症（EDS－76）为模型，对常规的免疫斑点（IB）试验做了改进，在对各主要参数进行系统测定的基础上，建立了可用于检测EDS－76的IB诊断法。在该方法中，病鸡血清呈“＋”形染色，健康鸡血清呈“－”形染色，从而使检测结果与判定符号实现了统一。对16种鸡病的标准阳笥血清、EDS－79病毒人工感染鸡血清、临床健康鸡血清和SPF鸡血清的检测结果及与现行的EDS－76血凝抑制（HI）试验和琼旨扩散（AD）试验比较表明，IB试验不仅特异、敏感，而且简便、快速。本研究在禽病系列诊断试剂盒的研制方面是一个有益的尝试。     

鸡减蛋综合症免疫斑点诊断法的研究

本研究以鸡减蛋综合症(EDS-76)为模型,对常规的免疫斑点(IB)试验做了改进,在对各主要参数进行系统测定的基础上。建立了可用于检测EDS-76的IB诊断法。在该方法中,病鸡血清呈“ ”形染色,健康鸡血清呈“-”形染色,从而使检测结果与判定符号实现了统一。对16种鸡病的标准阳性血清、EDS-79病毒人工感染鸡血清、临床健康鸡血清和SPF鸡血清的检测结果及与现行的EDS-76血凝抑制(HI)试验和琼脂扩散(AD)试验比较表明,IB试验不仅特异、敏感,而且简便、快速。本研究在禽病系列诊断试剂盒的研制方面是一个有益的偿试。     

用 MTT 比色分析法检测牛白细胞介素-2的研究

以伴刀豆蛋白 A(Con A)活化的牛外周血单个核细胞(PBM)作应答细胞,对四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测牛白细胞介素-2(IL-2)的各项参数作了系统探讨,首次建立了检测牛 IL-2的 MTT 比色分析法。结果表明,活化应答细胞时的细胞密度以2.5～5×10~6个/ml、Con A 浓度以12.5μg/ml、活化时间以48～72小时为宜;MTT 比色分析的最适条件为:应答细胞密度1～2×10~5个/孔,α-甲基-D-甘露糖苷(α-mM)终浓度为12.5mg/ml,样品与应答细胞作用时间为36～48小时,MTT 用量为50μg/孔,MTT 作用时间为2.5小时,结果证明,本方法可检出少至390个活应答细胞、0.03个单位(U)的重组人 IL-2(rhIL-2)和2~(-5)稀释的含牛 IL-2培养上清.本方法避免了传统~3H-胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入法的诸多不便,是一种方便、敏感、可靠和安全的牛IL-2检测法.     

白细胞介素-2免疫增强作用的研究

用白细胞介素-2(IL-2)体外诱导培养小鼠脾细胞制得的淋巴因子活化的杀伤(LAK)细胞对SP2/0、NS-1骨髓瘤细胞、P815肥大细胞瘤细胞及BW5147胸腺瘤细胞都具有杀伤作用,其杀伤率分别为35％、40％、45％和32％。证明IL-2可通过诱导LAK细胞而发挥抗肿瘤作用。IL-2和M5-y_(90)布鲁氏菌疫苗联合免疫鼠与疫苗单独免疫鼠相比,前者的抗布鲁氏菌抗体效价比后者高58～128％;前者的白细胞总数显著高于后者(31～83％);前者的细胞在淋巴细胞中的比例也比后者高10％。证明IL-2是一种潜在的免疫佐剂。     

马传贫病毒单克隆抗体的研究

Khler 和 Milstein[1]首先发现,骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合,可形成杂交瘤细胞系,能分泌单克隆抗体(McAb)。它所产生的抗体特异性强,滴度高[2]。这项技术建立仅几年的时间,但已广泛用于生物学医学和农牧业等许多领域的研究,并取得了很大进展[3-8]。McAb 在畜禽疫病的快速诊断、抗原分析和提纯、病原体的株间鉴別、疫苗检验和制造、流行病学研究及其它基础理论研究等、都甚急需。Ron Cox[9]预计至     

淋巴细胞杂交瘤技术

淋巴细胞杂交瘤技术于1975年由英国剑桥大学Kohler和Milstein首先研究成功,并于1984年获得了医学生理学诺贝尔奖金。淋巴细胞杂交瘤技术问世以来,其发展迅速可与微电子技术等相媲美,被誉为生物     

布鲁氏菌单克隆抗体的研究 Ⅲ.单克隆抗体的理化性质及生物学特性

本文就前报建立的M_(28)lD_2C_1杂交瘤细胞株分泌的McAb进行了理化性质及生物学特性的探讨,现报告于后。材料及方法一、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):McAb加等量含5％2-巯基乙醇(2-ME)、2％SDS的pH6.8Tris     

羊型布鲁氏菌单克隆抗体的研究 Ⅰ.M28 1D_2C-1杂交瘤株的建立

将NS-1小鼠骨髓瘤细胞与经羊型布鲁氏菌M23菌种免疫的Bal B/C鼠脾细胞融合,获得一株分泌高滴度单克隆抗体的M2B 1D_2C-1杂交瘤细胞。染色体数为87～104,平均为97±3.4。分泌物以ELISA法检测,滴度在1:30,000以上。抗体经ProteJnA Sepharose-CL4B亲和层析法提纯,在十二烷基磺酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)泳出一条区带。抗体用2-ME还原后出现两条区带,显示了抗M28的McAb均来自免疫鼠脾细胞的重链和轻链,是均一性的单克隆抗体(McAb)。本抗体与抗鼠IgG_3标准血清免疫扩散试验呈阳性反应。杂交瘤细胞连续传代所产生的抗体,滴度稳定,将为研究其理化性质和生物学特性等问题提供了方便试剂。