鸡抗菌肽LEAP-2基因克隆及序列特征分析

Ⅱ型肝表达抗菌肽(LEAP-2)是近年来在脊椎动物中发现的一种新型抗菌肽,并具有较强的抗微生物活性.本研究旨在以艾维茵肉鸡为实验材料,提取鸡全血DNA,通过PCR方法扩增抗菌肽LEAP-2基因,将PCR产物回收后,转化至克隆载体进行DNA测序,并将测序结果与GenBank公布序列进行对比,用ScanProsite对其蛋白质序列进行生物学信息分析.结果表明:扩增产物为150 bp大小的片段,基因序列与GenBank公布序列同源性高达100％,编码48个氨基酸残基,具有3个结构功能区7个功能位点.本研究为进一步探讨LEAP-2的功能奠定了基础.     

Boer山羊精子体外获能前后超微结构的研究

用S培养体系对Boer山羊精子进行体外获能试验，借助电子显微技术观察其获能前后超微结构的变化，结果表明，Boer山羊精子的超微结构与其它哺乳动物的类似，分头、颈、尾3部分。头部主要由细胞核构成，含有遗传信息；颈部脆弱，尾部易从此脱落；尾部是精子运动的器官，由中段、主段和末段3部分组成，精子获能后，顶体质膜膨胀、断裂和丢失；顶体外膜囊泡化，进而顶体内膜裸露。     

新型复合氨基酸络合铁对肉鸡生产性能、血液指标和组织铁含量的影响

为探究肉鸡日粮中添加以两种氨基酸螯合成的新型复合氨基酸络合铁添加剂对肉鸡生长性能、器官指数、血液指标、组织抗氧化性能和铁含量的影响,选用960只1日龄爱拔益加(AA)肉鸡公雏,随机分为6个处理,每个处理8个重复,每个重复20只雏鸡。试验处理组分别在玉米-豆粕基础日粮中添加0、20、40、80及120mg/kg的新型复合氨基酸络合铁(ZprFe)和80mg/kg硫酸亚铁(FeSO_4)。结果表明:1)肉鸡日粮中添加ZprFe对肉鸡平均日采食量、平均日增重、料重比均无显著差异(P0.05)。2)日粮中添加ZprFe显著提高了肉鸡42日龄肝脏和脾脏指数(P0.05),且随着日粮中铁水平的添加呈线性和二次增加(P0.05)。3)添加ZprFe显著提高21日龄和42日龄血清铁含量(P0.05);显著降低21日龄血清总铁结合力(P0.05),但对42日龄血清总铁结合力无显著影响(P0.05)。添加ZprFe显著提高21日龄血清含锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性和42日龄血清含铜与锌超氧化物歧化酶CuZn-SOD活性(P0.05)。4)添加ZprFe对肝脏总超氧化物歧化酶(T-SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)无显著影响(P0.05),但可显著提高胸肌T-SOD活性和T-AOC能力(P0.05)。添加ZprFe对肝脏铁含量影响显著,随着日粮中铁水平含量的增高,肝脏铁含量呈显著线性增加(P0.05)。综上,日粮中添加新型复合氨基酸络合铁ZprFe有利于肉鸡器官生长发育,提高肉鸡抗氧化性能和组织铁沉积,推荐在本研究条件下AA肉鸡日粮中添加ZprFe的适宜添加范围为40～80mg/kg,为实际生产提供理论依据。     

益生菌互作对肉鸡生长性能、肠道消化吸收及糖转运蛋白GLUT2影响的研究

旨在研究益生菌互作对肉鸡生长性能、肠道养分消化吸收及相关糖转运蛋白的影响。本研究中,200只1日龄雄性爱拔益加肉雏鸡被随机分为4组,每组5个重复,每个重复10只。将干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌分别按比例混合后于牛乳中发酵。对照组正常饮水（control组）,益生菌Ⅰ组（混合比例为2：1：1）、Ⅱ组（混合比例为1：2：1）、Ⅲ组（混合比例为1：1：2）补充1%复合菌乳制品于饮用水中,各组皆饲喂基础日粮。整个试验饲养周期为42 d,每21 d为一个阶段。结果表明：1）与对照组相比,益生菌互作组均可显著提高肉鸡平均日增重（P<0.05）,改善饲料利用率（P>0.05）,在所有益生菌互作组中,益生菌Ⅰ组的肉鸡生长性能最好;2）益生菌互作显著刺激了空肠淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶的特异性活性（P<0.05）;3）益生菌互作组均显著提高了小肠绒毛高度（P<0.05）,降低了隐窝深度（P<0.05）,上调了GLUT2 mRNA的表达（P<0.05）,其中,以益生菌Ⅰ、Ⅲ组作用最佳。综上所述,益生菌互作能够增强消化酶活性、改善消化道结构、上调营养转运蛋白表达,提高养分的消化率及能量吸收有效性,从而提高肉鸡的生产性能;且当干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌和双歧杆菌的混合配比为2：1：1时,复合益生菌制剂对肉鸡的作用效果较佳。     

淫羊藿中药添加剂对贵妃鸡产蛋性能和蛋品质的影响

为了研究日粮中添加含有淫羊藿等味中药的降脂增蛋散复方添加剂对贵妃鸡产蛋性能、蛋品质及蛋黄胆固醇的影响,选用28周龄贵妃鸡96只,每组32只,分为对照组、低剂量添加剂组、高剂量添加剂组(对照组喂基础日粮,低剂量组喂基础日粮添加1.12 g/kg的复方中药添加剂,高剂量组喂基础日粮添加11.2 g/kg的复方中药添加剂)。结果表明,试验组鸡的产蛋性能和蛋品质均有所增加,且随添加剂量的增加效果更加明显;高剂量组的蛋黄胆固醇含量有显著性降低。使用含有党参、淫羊藿等药材的复方中药添加剂可以提高贵妃鸡的产蛋性能和蛋品质。     

不同培养体系及肝素剂量对Boer山羊精子体外获能的研究

用S ,D ,B 3种培养体系对Boer山羊精子进行体外获能 ,肝素添加剂量设 5个水平 .获能处理前先进行活精子分离 ,然后按试验之需 ,用含有肝素的培养液获能处理 ,获能后用溶血磷脂酰胆碱 (LC)诱导顶体反应 (AR) ,TG染色法测得有顶体反应的活精子作为评价精子获能的指标 .试验结果表明 ,(1)S培养液效果最好 ,4h的顶体反应率达 6 0 .88% ,与D ,B培养液的获能效果相比 ,差异极显著 (P <0 0 1) .(2 )肝素的添加剂量以 15mg·L-1和 2 0mg·L-1的效果最好 ,与其它处理组的效果相比差异显著 (P <0 0 5 ) ,但这 2个水平间的效果差异不显著 (P >0 0 5 ) .     

质粒制备绝对定量PCR标准曲线方法的建立

用质粒制备绝对定量PCR标准曲线存在着作为标准品的双链环状质粒分子与待测样品单链线性cDNA分子结构不一致的问题.为了消除二者之间的差异,确保绝对定量PCR测定方法的准确性,我们在用质粒制备标准曲线和测定未知样品中特定基因mRNA分子拷贝数时进行了两个改进:1)用酶切的方法使环状质粒线性化,用线性质粒制备标准曲线;2)将未知样品cDNA扩增出一条正义链,再与作为标准曲线的质粒标准品同时开始荧光定量PCR循环.实验结果表明,1)具有相同拷贝数的环状和线性质粒在一起进行定量PCR测定时,环状质粒所得的Ct值大于线性质粒所得的Ct值(P＜0.05);2)本研究测定的cDNA样品中先扩增一次测出的起始拷贝数均大于未先扩增一次的测定结果.样品起始拷贝数两次测定结果的差异分析表明5个样品中有3个样品的测定差异达到了显著水平(P＜0.05).应用该方法改进的鸡GATA5基因绝对定量PCR的标准曲线能够准确地反应目的产物扩增.经改进的质粒制备绝对定量PCR标准曲线的方法更为简便易行,并提高了测定的准确性.     

蛋鸡与肉鸡小肠早期生长发育的差异研究

以白来航蛋鸡和爱拔益加肉鸡为研究对象,研究了蛋鸡与肉鸡小肠早期生长发育规律的差异。在相同条件下以同一饲料饲喂两种鸡公雏,在出雏当天以及出雏后1、3、7、14和28日龄分批屠宰测定,测量小肠总长度及总重量,并保留空肠中段样本,制作小肠显微切片,对两个品种仔鸡的小肠早期发育的几个主要指标进行测量,并运用线形回归的方法将所得的数据进行分析比较。使用正大521蛋小鸡饲料饲喂的白来航蛋仔鸡和爱拔益加肉仔鸡,其肠道的各项指标均呈增长趋势,且爱拔益加肉仔鸡小肠的增重增长生长发育较白来航蛋鸡快。     

PepT1基因绝对荧光定量PCR标准曲线的建立

为研究PepT1 mRNA在鸡小肠的表达对于蛋白质消化吸收的影响,实验建立了PepT1基因绝对荧光定量PCR标准曲线。根据GenBank中PepT1的序列信息设计合成两对引物,引物一是克隆引物,用于从鸡小肠细胞中扩增出cDNA片段;引物二是荧光定量PCR引物,其长度包含于引物一中,用荧光定量PCR来检测基因的表达。通过克隆出PepT1基因282 bp部分片段并插入到PMD18载体中,从而构建出绝对荧光定量PCR标准曲线。从实验结果得出标准曲线的回归方程为Y=-3.205X+34.170,其回归系数R2=0.990,溶解曲线表现为单一的峰,通过对结果的具体分析,认为该方法可靠,特异性均较强,可成功构建目的基因的标准曲线。     

橡胶树桩种植前假植方法研究

将挖取的实生苗树桩和热研7-33-97芽接桩分别假植在砂床上和泥土床上,10 d、20 d后再种植,与当天挖取的橡胶苗树桩进行种植对比试验。结果表明:种植后30 d,在砂床上假植20 d的实生苗树桩和热研7-33-97芽接桩的出芽数、株高明显高于其他各处理。说明将挖取的橡胶苗进行假植后再种植,与当天挖苗当天种植相比,不但没有降低成活率,还可提前出芽。