3种苹果潜隐性病毒一步多重RT-PCR检测体系的优化

为建立更为快速准确的苹果潜隐性病毒检测方法,以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的田间苹果成龄树为试材,设计合成了扩增目的片段为273 bp(ASGV)、358bp(ACLSV)和432 bp(ASPV)的3对特异性引物,并对影响RT-PCR体系的主要参数进行试验优化.结果表明:建立的一步多重RT-PCR体系可以实现对3种主要潜隐性病毒的特异性检测;通过对田间多个样品的检测验证,表明该方法的准确性和灵敏度都很高,并缩短了单个样品的检测时间,极大地提高了工作效率.     

计算机自动控制系统在火电厂的应用

对于火电厂的发电机组来说,自动化控制系统的重要作用就是保证自动化设备安全运行,在自动化控制系统运作的时候可以适当减少劳动强度,是劳动条件得到根本改善的重要途径和措施。文章对火电厂的计算机自动控制系统发展、应用现状及未来前景进行了分析。     

野生赤狐驯化与繁殖初步实验

我场于1987年7月从黑龙江省逊克、密山等地引进野生赤狐10只,其中公狐5只,母狐5只。2岁的8只,1岁的2只。1988年3月初,通过发情鉴定,人工放对,配上3只,配种率为60%,这3只母狐均按期产仔,共产仔8只。现将我场对赤狐驯化与配种繁殖方面的几点体会总结     

挪威银狐试养简报

<正> 1987年12月,我场通过中国土畜产进出口总公司从挪威引进银狐100只(其中公狐30只,母狐70只),均为当年育成狐.经过近一年的试养,繁殖情况良好,今年受配母狐61只,受配率87%,产仔218只,成活212只,成活率97%,群平均成活3.03只.一、日粮的组成和标准从我场实际出发,科学地制定日粮标准,合理搭配饲料,尽可能做到品种多样化,充分满足各生物学时期的营养需要.(一)准备配种期日粮标准:种公狐总代谢能为547千卡,种母狐总代谢能为530千卡.种公狐粗蛋白的含量为62.8克,种母狐为60.6克(其中包括蔬菜及饲料酵母中的蛋白含量).     

两步多重RT-PCR快速检测苹果潜隐性病毒

【目的】为建立检测3种苹果潜隐性病毒更为快速准确的方法,【方法】以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的成龄苹果树韧皮部为试材,根据基因库中苹果茎痘病毒(Apple stempitting virus,ASPV)的外壳蛋白基因序列,设计合成了2对特异性引物,分别与合成的苹果茎沟病毒(ASGV)引物和苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的引物组合配伍,筛选出最佳的引物对组合。对cDNA的合成所用引物和总RNA模板进行遴选和量化,对PCR过程中cDNA的用量、引物对的终浓度、退火温度等主要影响因素进行优化。【结果】结果表明,反转录引物为Oligo(dT)18、总RNA 0.1～3.0μL时,可以得到较好的cDNA;ASPV-FR与ASGV-Pch、ACLSV-Pch引物组合优于ASPV-Pch,并且筛选出4组最佳的终浓度处理组合;cDNA用量为2.0~4.0μL、退火温度为50.0~52.9℃、循环数为35时,扩增效果较好。采用优化的多重RT-PCR体系对采自陕西和山东两省的样品进行检测,并用3种病毒的单重RT-PCR体系进行验证。【结论】结果呈现高度一致性,充分印证了该多重RT-PCR体系的准确性,适用于大量样品的快速检测。     

几种提取液对苹果成熟叶片总RNA提取质量的影响

[目的]筛选一种快速有效地提取高质量的苹果成熟叶片总RNA的提取液。[方法]以红富士苹果成熟叶片为材料,用3种不同的提取液提取苹果成熟叶片的总RNA,并通过分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和RT-RCR检测RNA质量。[结果]3种试剂中2种可以提取出总RNA。[结论]用RNAiso-mate for Plant Tissu和RNAiso Plus搭配使用和RNAiso for Polysaccharide-rich Plant Tissue单独使用均可提取出质量较好的RNA,前者质量优于后者。     

番茄ACC合成酶反义cDNA转化及转基因番茄果实贮藏生理特性研究

ＡＣＣ合成酶ｃＤＮＡ被反向插入载体ＰＭＯＮ３１６，通过三亲交配，将表达质粒转移到农杆菌中，采用叶盘法转化番茄子叶。经卡那霉素筛选及分子杂交检测，表明，反义ＡＣＣ合成酶基因已在ｍＲＮＡ水平表达。对转基因番茄果实的成熟生理指标测定结果说明，转基因番茄果实成熟受到严重抑制，乙烯的峰值仅为正常番茄的２５％￣３０％，ＰＧ活性有所下降，果实在室温下可贮藏１个多月，品质和其他性状与正常番茄相近。