羊口疮病毒安徽株116基因的生物信息学分析及原核表达

为了对羊口疮病毒（Orf virus, ORFV）安徽株116基因进行生物信息学分析及原核表达。以ORFVAH-F10株为模板PCR扩增116基因，使用生物信息学软件预测该基因编码蛋白的结构与功能。同时将扩增产物克隆至pET-32a（＋）原核表达载体，经BamH I及EcoR I双酶切鉴定后进行测序，构建pET-32a（＋）-116重组质粒。转化至大肠杆菌Rosetta（DE3）进行IPTG诱导，纯化蛋白后免疫BALB/c雌性小鼠制备多克隆抗体。测序结果显示，ORFV116基因全长561 bp，编码186个氨基酸。生物信息学分析结果显示：该蛋白分子量约为20.33 kDa，为不稳定亲水性蛋白；无信号肽、保守结构域及跨膜结构域；含有2个N糖基化位点和42个磷酸化位点；二级结构以无规则卷曲为主，分别为延伸链（5.91%）、α-螺旋（14.52%）与无规则卷曲（79.57%）；预测该蛋白含有20个可能的B细胞优势抗原表位与4个CTL细胞表位。SDS-PAGE及Western-blot结果显示，ORFV116蛋白大小约为51 kDa，主要以可溶形式表达且具有良好的反应原性。     

茄子嫁接新法——茄苗嫁接法

为防治茄子黄萎病、枯萎病、青枯病等频发,为抵御这些土传病害,使茄子优质高产,增加经济效益,实行无公害蔬菜生产管理,我们采用茄子嫁接新方法,即茄苗嫁接法.     

一株J亚型禽白血病病毒的分离鉴定及其gp85基因的序列分析

为确定安徽巢湖某地方品种养鸡场的疑似禽白血病(avian leukosis,AL)的病原,以DF-1细胞从肿瘤组织中分离病毒,采用RT-PCR方法进行鉴定,并对其感染细胞上清进行透射电镜观察。同时对送检病鸡的心、肝、脾及腺胃等进行组织病理学观察,最后将扩增出的gp85基因与GenBank收录的其他ALV序列进行比对分析。结果表明:PCR扩增产物大小约为928 bp,经测序证实为ALV gp85基因,将该分离株命名为AHCH-2018株。透射电镜观察到具有囊膜的大小约100 nm的病毒粒子。组织病理学结果显示,病鸡的心、肝、脾及腺胃中有大量成灶淋巴细胞增殖。遗传进化分析结果表明,分离株的gp85基因与多株ALV J参考毒株核苷酸序列的同源性为94.1%~99.5%,且与GD1401J株的核苷酸同源性最高,达99.5%,与A、B、C、D、E亚群同源性为46.5%~49.7%。该分离株与J亚群原型毒株处于同一大分支。本研究为了解安徽土鸡种群中禽白血病的分子流行病学特点提供了一定的数据参考。     

日光温室芹菜与小白菜混种高产高效技术

隆德县在发展蔬菜生产的过程中,探索出了温棚内实行不同种间的套种、混种方式,从而使温室每茬产量和效益大幅度增加。 1997年,大庄乡田滩村王宗贤、大庄村马有仓等,通过采用芹菜与小白菜混种,番茄与辣椒间作等措施,使温棚年均 6茬蔬菜亩产量达到 13 370 kg,亩产值达 26 470元,比单种芹菜或小白菜、番茄或辣椒亩增产 6 870 kg,增产 105.6％,亩增产值 13 740元,增长 105.7％。 1 芹菜与小白菜混种的理论根据 1.1 苗龄长短不同芹菜苗龄一般 70～ 80天,而小白菜 30天。若同时混种发芽种子,由于小白菜生长期短,播种后 30～ 55天可采收,此时芹菜正在幼苗期,营养生长生产阶段能错开,互不影响。     

沼气综合利用试验研究

通过对宁夏隆德县多个农户试验田进行沼液浸种、沼渣和沼液施肥、沼液防治病虫害的试验研究,结果表明：沼液浸种使小麦产量平均增长14．7％,玉米产量平均增长18．0％,小白菜产量平均增长35．0％;用沼液、沼渣施肥比常规施肥使小麦产量平均增长23．3％,蒜苗产量平均增长13．8％,苦苣产量平均增长15．8％;沼液对西芹病虫害的平均防治效果为94．2％,并且使西芹增产29．0％。     

无农药防治农作物病虫害技术

农药防治农作物病虫害技术尽管在农业生产上取得了显著的成就,然而,由于高效剧毒和低毒残留有机农药的大量使用,对作物、人畜、天敌、环境的毒害、残伤、杀灭、污染,仍造成公害.……     

大力发展农、牧、能源一体化立体农业推动宁南山区新农村建设

宁南山区"三料"奇缺,生态环境脆弱,农民收入增长缓慢,而发展农、牧、能源一体化立体农业使养殖业、种植业、生态、新农村建设四者有机的结合起来,是构建"天人合一"和谐农村的重要内容和手段。     

隆德县“四位一体”生态温棚增效技术

隆德县自1999年实施国家生态建设项目之一的"四位一体"生态温棚建造以来,至目前共建成50座,其中已投产的40座在不足两季度时间里,由于质量过关,技术过硬,已显示了生产、省电、节煤、增效的威力.在年初的两季度可产鲜菇10.4万kg或鲜菜14.4万kg,收入31.2万元,扣除成本后两个季度纯收入20.8万元.     

1株番鸭源奇异变形杆菌的分离鉴定及其毒力基因分析

为查清引起滁州地区某养殖场雏番鸭死亡原因,本研究通过对分离细菌的鉴定和动物致病性试验,确定奇异变形杆菌是引起此次雏番鸭发病的病原体,并将分离的奇异变形杆菌命名为AHcz-1株.根据其16S rRNA基因序列,建立其遗传进化树;根据已报道的8个毒力基因ureC、zapA、mrpA、ucaA、rsbA、pmfA、atfA、atfC序列,设计引物进行PCR扩增,并对毒力基因进行序列分析.结果显示:AHcz-1株与日本株(AB932526.1)亲缘关系最近,同源性高达100%;毒力基因pmfA、atfA、ureC均未发生变异;AHcz-1株具有较强的致病性;致病菌对丁胺卡那高度敏感,对庆大霉素、恩诺沙星中度敏感,对其它17种抗生素不敏感,表明AHcz-1株具有多重耐药性.本研究为番鸭源奇异变形杆菌临床诊断、临床用药及遗传变异研究奠定了基础.     

无农药防治农作物病虫害技术

农药防治农作物病虫害技术尽管在农业生产上取得了显著的成就,然而,由于高效剧毒和低毒残留有机农药的大量使用,对作物、人畜、天敌、环境的毒害、残伤、杀灭、污染,仍造成公害.