| 羊口疮病毒安徽株116基因的生物信息学分析及原核表达 |
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| 引用本文： | 王勇,张学琪,白彩霞,刘自敏,胡凯,胡子慧,孙裴.羊口疮病毒安徽株116基因的生物信息学分析及原核表达[J].安徽农业大学学报,2020,47(6):894. |
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| 作者姓名： | 王勇 张学琪 白彩霞 刘自敏 胡凯 胡子慧 孙裴 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036;淮北市畜牧中心，淮北 235000 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（2018YFD0502006）, 2019年国家级大学生创新训练计划（201910364044）和安徽省大学生创新训练计划（201810364023）共同资助。 |
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| 摘 要： | 为了对羊口疮病毒（Orf virus, ORFV）安徽株116基因进行生物信息学分析及原核表达。以ORFVAH-F10株为模板PCR扩增116基因，使用生物信息学软件预测该基因编码蛋白的结构与功能。同时将扩增产物克隆至pET-32a（＋）原核表达载体，经BamH I及EcoR I双酶切鉴定后进行测序，构建pET-32a（＋）-116重组质粒。转化至大肠杆菌Rosetta（DE3）进行IPTG诱导，纯化蛋白后免疫BALB/c雌性小鼠制备多克隆抗体。测序结果显示，ORFV116基因全长561 bp，编码186个氨基酸。生物信息学分析结果显示：该蛋白分子量约为20.33 kDa，为不稳定亲水性蛋白；无信号肽、保守结构域及跨膜结构域；含有2个N糖基化位点和42个磷酸化位点；二级结构以无规则卷曲为主，分别为延伸链（5.91%）、α-螺旋（14.52%）与无规则卷曲（79.57%）；预测该蛋白含有20个可能的B细胞优势抗原表位与4个CTL细胞表位。SDS-PAGE及Western-blot结果显示，ORFV116蛋白大小约为51 kDa，主要以可溶形式表达且具有良好的反应原性。
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| 关 键 词： | 羊口疮病毒 116基因 生物信息学分析 原核表达 |
Bioinformatics analysis and prokaryotic expression of Orf virus Anhui strain 116 gene |
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| WANG Yong,ZHANG Xueqi,BAI Caixi,LIU Zimin,HU Kai,HU Zihui,SUN Pei.Bioinformatics analysis and prokaryotic expression of Orf virus Anhui strain 116 gene[J].Journal of Anhui Agricultural University,2020,47(6):894. |
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| Authors: | WANG Yong ZHANG Xueqi BAI Caixi LIU Zimin HU Kai HU Zihui SUN Pei |
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| Institution: | School of Animal Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036;Animal Husbandry Center of Huaibei, Huaibei 235000 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Orf virus 116 gene Bioinformatics analysis Prokaryotic expression |
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