胸腺肽αl原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

构建胸腺肽αl（Thymosin αl,Tαl）基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,为大量获得胸腺肽αl打下基础。将人工合成的Tαl三串体基因插入到表达载体pET32a后,CaC12法转化大肠杆菌BL21,经氨苄青霉素筛选后用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测BL21中胸腺肽αl的表达。大肠杆菌中检测到与目的蛋白相对分子量(31kD)相符的条带。成功构建了Tαl原核表达载体,该蛋白能在大肠杆菌中表达。     

乳酸菌对寄生曲霉孢子活性的影响

国外对乳酸菌抑制黄曲霉生长与产毒的研究始于1980年.乳酸菌主要被应用于多种发酵乳制品中,其代谢产生的低pH值环境可抑制多种有害微生物的生长.在多种发酵乳制品中存在的寄生曲霉可使食品腐败或产生对人类有危害的黄曲霉毒素.试验旨在研究植物乳酸杆菌和保加利亚乳酸杆菌对曲霉孢子是否具有灭活作用.     

重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达

重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tαl基因并连接到pMD18-T载体上,双酶切回收的Tαl插入到pET32a后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导,经15%SDS-PAGE检测,胸腺素αl获得可溶性表达。检测到与目的蛋白相对分子量(21.8KDa)相符的条带。重组胸腺素alpha 1在大肠杆菌中获得可溶性表达。     

胸腺肽αl原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

 构建胸腺肽αl（Thymosin αl,Tαl）基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21中进行表达,为大量获得胸腺肽αl打下基础。将人工合成的Tαl三串体基因插入到表达载体pET32a后,CaC12法转化大肠杆菌BL21,经氨苄青霉素筛选后用IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测BL21中胸腺肽αl的表达。大肠杆菌中检测到与目的蛋白相对分子量(31kD)相符的条带。成功构建了Tαl原核表达载体,该蛋白能在大肠杆菌中表达。     

重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达

重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达.根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上,双酶切回收的Tα1插入到pET32-α后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导,经15%SDS-PAGE检测,胸腺素α1获得可溶性表达.检测到与目的蛋白相对分子量(21.8 kDa)相符的条带.重组胸腺素alpha 1在大肠杆菌中获得可溶性表达.     

重组胸腺肽α1在大肠杆菌中的表达与免疫活性检测

根据大肠杆菌密码子偏嗜性修改、合成胸腺肽alpha 1（Tα1）基因并连接到pET32α（＋）中构建融合表达载体pET32α-Tα1,转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导,经15%SDS-PAGE检测,Tα1获得可溶性表达。将诱导表达菌高压均质破碎后进行亲和层析纯化,洗脱蛋白峰经脱盐处理后进行免疫活性测定。通过脾淋巴细胞转化试验测定纯化重组Tα1和人用Tα1的活性,结果显示,重组表达的Tα1具有明显的促进淋巴细胞增殖的活性;脱E受体法E玫瑰花环试验测定结果显示,制备的重组Tα1的E玫瑰花结百分率高于空白对照组14.3%以上（胸腺肽溶液的质量标准为提高10%）,能够明显增强T细胞的活性。     

新城疫-禽流感(HH9N2亚型)二联灭活疫苗免疫效果评估

为筛选适合父母代种鸡场的新城疫(ND)-禽流感(H9N2 AI)二联灭活疫苗(以下简称"新流"),研究选择A、B、C、D、E、F 6个公司的"新流"产品,分别在7、21日龄对SPF鸡进行两次颈部皮下免疫。免疫后定期采集血清,通过血凝与血凝抑制试验(HI)集中检测H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)和新城疫病毒(NDV)抗体,绘制HI抗体曲线。免疫后48 d用106EID50H9N2AIV攻毒,定期采集喉头、泄殖腔棉拭子检测排毒情况。结果表明:两次免疫"新流"产品后,H9N2AIV和NDV抗体效价在46日龄达到最高峰,在49日龄开始下降。攻毒后,免疫C和D公司"新流"的SPF鸡H9N2 AIV排毒时间最短。研究结果为鸡场选择疫苗提供了科学依据。     

五种不同种类消毒剂杀菌效果评估

为给父母代种鸡殖场正确做好消毒工作提供一套理论数据,本研究选择5种消毒剂对鸡场采集细菌培养物消毒效果进行评估。将3.1×10~7CFU/ml的细菌液与不同稀释倍数消毒剂分别反应30min、1、3、5、10、12、24h,培养并计数反应后的菌落总数。结果表明,复方戊二醛溶液稀释至1000倍、火碱稀释至1%、10%聚维酮碘稀释至0.5%、过硫酸钾复合粉稀释至800倍、复方酚溶液稀释至600倍,反应30min杀菌率可达100%。该研究结果,结合5种消毒剂的成本和消毒机理可以选择合适的消毒方案。     

H_7Re-1疫苗筛选及免疫效果评估

为筛选免疫效果好的H_7Re-1疫苗,本试验选择四个厂家的H_7Re-1疫苗,分别对SPF鸡进行两次免疫。免疫后通过抗体检测结果筛选出H_7抗体最好的疫苗在肉种鸡场应用。对免疫H_7Re-1疫苗的三个肉种鸡场定期采血,跟踪检测H_7抗体,评估免疫效果。结果表明:A公司的H_7Re-1疫苗在SPF鸡上的免疫抗体最高达11.13log2。三个种鸡场免疫A公司H_7Re-1疫苗后,H_7抗体均显著上升,抗体峰值均在9log2左右,免疫效果较好。     

奶山羊瘤胃瘘管手术新方法的尝试

消化器官的造瘘技术是进行反刍动物营养学研究的主要手段之一,尝试采用全身麻醉与传导麻醉相结合,瘘管安装前瘤胃浆肌层2层连续缝合的方法对6只奶山羊进行了瘤胃瘘管手术,2个月后6只奶山羊均恢复良好,可以满足科研需要。可见,该瘤胃瘘管安装技术较传统方法有明显优势,值得推广。