油菜花药培养技术在育种中的初步应用

油菜花药培养研究始于七十年代,1975年我国从白菜型油菜(Brassica。campestris)中成功地诱导出了花粉植株,随后又获得了甘蓝型油菜(B.napus)的花粉植株。所采用的方法通过诱导愈伤组织的途径来获得花粉植株的。但由于使用的培养基中激素浓度较高而蔗糖浓度又偏低,导致花丝、药隔、药壁的体细胞极易产生愈伤组织,不仅给油菜花粉植株的诱导与鉴定带来了很大的干扰,而且造成花粉植株的诱导率远较水稻、烟草、小麦等     

芥菜型油菜（Brassicajunacea）游离细胞培养及体细胞无性系的建立

以芥菜型油菜子叶和下胚轴来源的愈伤组织为材料，进行悬浮细胞振荡培养，通过诱导愈伤组织及分化试验表明：用乳白色且结构紧密的愈伤组织进行悬浮振荡培养能获得较正常的单细胞；在悬浮振荡培养的第６－７天内及时过滤并将单细胞转入浅层液体静置培养，可高频率产生愈伤组织；俞伤组织的质量对芽的分化有重要影响，不同基因型来源的愈伤组织其植株再生频率有很大差异。通过试验在云南芥菜型油菜中发现了一批易再生材料并建立了体细     

菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养

探讨菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养的规律,并用正交设计法对影响细胞悬浮培养的主要因素如温度、接种量、生长素2,4-D、蔗糖含量进行分析,得出菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养的优化条件:温度20℃、接种量0.2 g@30ml-1、激素2,4-D 0.2mg@L-1、蔗糖含量2.0%.     

用农杆菌共培养法将雄性不育基因导入水稻的研究

利用农杆菌共培养法将雄性不育基因（TA29-Barnase)导入水稻品种日本晴的胚性愈伤，通过50-150mg/L卡那霉素筛选，从500个胚性愈伤中获得16个筛选愈伤团，并分化出了3株绿苗，经PCR扩增分析。16个筛选愈伤团中有7个呈阳性；3株绿苗全部呈阳性。     

EMS对甘蓝型油菜离体小孢子胚胎发生能力的影响

EMS(甲基磺酸乙酯)是烈性致癌物质，对育种者而言，它又是很好的诱变剂。本试验用不同的EMS浓度(0，1．0．1．5．2．0，2．5，3．0mmol／L)和不同时间(12，24，36h)处理甘蓝型油菜的离体小孢子，通过统计每花蕾产胚的数量．观察到随着EMS浓度的增高和处理时间的延长．每花蕾产胚的数量减少，即小孢子的胚胎发生能力减弱。研究得出当EMS浓度为2．5mmol／L．处理时间为24h，每花蕾产胚的数量接近对照产胚数量的一半．根据半致死剂量(LC40)原则，这一浓度和时间对EMS诱变甘蓝型油菜离体小孢子具有重要的应用价值。     

菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养

探讨菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养的规律 ,并用正交设计法对影响细胞悬浮培养的主要因素如温度、接种量、生长素 2 ,4 -D、蔗糖含量进行分析 ,得出菘蓝下胚轴愈伤组织细胞悬浮培养的优化条件 :温度 2 0℃、接种量 0 .2g·30ml-1、激素 2 ,4 -D 0 .2mg·L-1、蔗糖含量 2 .0 %。     

几种基因转移技术在小麦上的应用

采用基因枪法、电脉冲法、农杆菌介导法和浸泡法将外源基因质粒ｐＺＦＸ２导入小麦细胞中,经卡那霉素筛选,获得了抗生的愈伤组织和再生植株。通过此项试验,研究了不同方法的转化效果,摸索了适宜的小麦基因转化条件。     

甘蓝型油菜种质创新的研究与利用

对4个甘蓝型油菜杂交组合F1和白花甘蓝(Brassica oleracea)与双低甘蓝型油菜(B.napus)品种花油3号种间杂交及回交BC4代的植株进行小孢子培养,获得大量的再生植株。通过田间连续的定向选择,结果获得了16份含油量45.19%~50.52%的新种质以及3份双低白花甘蓝型油菜新种质。研究结果表明,应用油菜小孢子培养技术及双单倍体育种技术进行油菜特异种质的创新,是一种快速获得新种质的有效途径,具有较好的应用前景。     

用EMS诱变和小孢子培养快速获得甘蓝型油菜高油酸种质材料的研究

用EMS(甲基磺酸乙酯)溶液诱变甘蓝型油菜的小孢子，离心去除EMS，用秋水仙碱溶液对诱变后的小孢子进行染色体加倍。再离心去除秋水仙碱，用NLN-13培养基进行小孢子培养。当小孢子发育成完整的试管植株后，用幼叶氧化法定性、快速地筛选高油酸突变材料。筛选获得的材料经移栽定植，用气相色谱法精确地分析其种子的脂肪酸组成，得到了一份油酸含量为80．3396％的高油酸突变材料。本研究提高了油酸改良工作中诱变频率，降低测试分析费用。