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维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)引起的细菌性疾病已威胁到鱼类养殖业的发展。Cbl(类CysB蛋白)是细菌硫代谢的重要调控因子之一。本研究选取pET-28a为Cbl的原核表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主菌,使用IPTG(Isopropyl-beta-D-thiogalactoside,异丙基?β?D?硫代半乳糖苷)诱导表达,用SDS-PAGE凝胶电泳验证蛋白条带,再用BOSTER的BCA蛋白浓度测定试剂盒测量Cbl蛋白浓度,寻找较适宜的蛋白表达条件。结果表明,当诱导时间为8 h,IPTG终浓度为0.1 mmol·L?1,诱导温度为15 ℃,咪唑洗脱浓度为100 mmol·L?1时,Cbl蛋白质量浓度能达到601.405 mg·L?1,可满足后续实验要求。 相似文献
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