表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2重组鸡痘病毒的构建

含ＩＢＤＶ保护性抗原ＶＰ２的质粒,以ＳｐｈＩ消化,然后用Ｔ４噬菌体ＤＮＡ聚合酶将末端补平,产物纯化后再以ＳａｌＩ消化一次,经再次纯化后与ＳｍａＩ和ＳａｌＩ分步酶切的鸡痘病毒插入载体ｐＦＧ１１７５－１相连,使唤基因顺向插入到载体Ｐ７５启动子下游,得到含ＩＢＤ ＶＰ２基因的重组插入载体ｐＦＧ ＶＰ２。     

鸡传染性法氏囊病毒Ts,OH毒株,鱼传染性胰脏坏死病毒DRT …

用幼鸡成纤维细胞繁殖鸡传染性法氏囊病病毒（ＴＢＤＶ）Ｔｓ毒株,病毒颗粒经提纯后提取基因组ｄｓＲＮＡ。根据已报道的加拿大ＯＨ株序列设计引物,用ＲＴ－ＰＣＲ进行ｃＤＮＡ扩增,获得９７６ｂｐ、７７４ｂｐ和９９７ｂｐ的三个部分重叠的片段,分别克隆于ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ载体,利用ＳＰ６,Ｔ７ 异引物及ＰＣＲ引物进行序列分析,并连接为一个寒带的大片段,结果表明,所克隆片段为２６６５ｂｐ的ＩＢＤＶＶＰ、基因的大     

格氏栲林群落物种多样性研究

对格氏栲天然林群落的物种多样性和物种重要值进行调查分析 ,初步探讨格氏栲群落乔木树种的演替趋势。格氏栲林群落物种多样性Simpon指数和Shannon -Wiener指数分别达 0 95 8和 3 495 ,显示该群落是相对稳定性较大的群落 ,群落物种多样性丰富 ;群落重要值分析表明格氏栲是该群落的主要优势种。群落演替趋势说明 ,要加强保护格氏栲自然更新 ,通过种子繁殖和萌蘖等方式互补 ,从而使其成为稳定的群落。     

再谈提高农村税费改革效益

继十六大报告中“继续推进农村税费改革,减轻农民负担,保护农民利益”后,温家宝总理在今年三月五号的政府工作报告中再次强调：“要继续推进农村税费改革：除烟叶外,取消农业特产税。从今年起,要逐步降低农业税税率,平均每年降低1个百分点以上,五年内取消农     

漳江口红树林保护区越冬水鸟的年际变化

通过对2009年至2014年连续6年的12月对漳江口红树林国家级自然保护区的越冬水鸟进行的调查,结果表明：该保护区共记录到越冬水鸟6目11科39种,主要类群为鸻鹬类、鹭类、鸭类和鸥类。保护区的越冬水鸟物种数量年际变化不大,在26~32种间波动,其中22种记录于所有年份;而水鸟数量年际间有比较大的波动,最少为1204只,最多达到5399只,近年来水鸟数量有下降的趋势。结合保护区现状提出保护对策和建议。     

生态示范区乡村生态旅游开发策略研究——以河北省阜城县为例

生态示范区富集生态旅游资源,开发生态旅游可以取得经济、社会、生态多方面的效益。以国家生态示范区河北省阜城县为例,指出乡村生态旅游需要充分利用资源,将农业、工业和旅游业结合发展,精心设计旅游产品,因地制宜地进行分区和布局,同时利益相关者要密切合作,保护好生态环境。     

牛α1，3-半乳糖转移酶基因部分片段的克隆及无启动子打靶载体的构建*

利用La-PCR的方法,从牛的基因组中成功地获得2．4kb和5．2kb的扩增产物。其中2．4kb片段位于5～7外显子之间,包括了完整的第5及第6内含子;5．2kb片段位于8～9外显子,包括了完整的第8内含子。2个片段分别克隆于pCR-XL-TOPO载体。测序结果表明所克隆的两片段均为牛α1,3半乳糖转移酶基因的基因组序列。2．4kb和5．2kb的两个片段分别作为打靶载体的5’、3’同源臂构建了无启动子打靶载体TOPO-IRESneo7．6。电击转染牛胎儿成纤维细胞以期敲除牛的α1,3半乳糖转移酶基因。     

鸡传染性法氏囊病毒Ts、OH毒株、鱼传染性胰脏坏死病毒DRT毒株的同源性分析

用幼鸡成纤维细胞繁殖鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)Ts毒株,病毒颗粒经提纯后提取基因组dsRNA.根据已报道的加拿大OH株序列设计引物,用RT-PCR进行 cDNA扩增,获得976 bp、774 bp和997 bp的三个部分重叠的片段,分别克隆于pGEM-Teasy载体,利用SP6,T7特异引物及PCR引物进行序列分析,并连接为一个完整的大片段.结果表明,所克隆片段为2 665 bp的IBDV VP1基因的大开放读框.序列分析表明:Ts株与OH株的核苷酸序列同源性为91 %;与DRT毒株的氨基酸序列同源性为42.5 %.尽管Ts株与DRT株的整体同源性很低,但在VP1蛋白的中部仍发现有高同源区段.在两种病毒中均发现与GTP结合蛋白、依赖于RNA的RNA聚合酶(RdRp)相关的保守序列.然而,与单链RNA病毒不同的是:作为RdRp家族特征的G-D-D序列在两种病毒中都未发现.     

鸡传染性法氏囊病病毒基因组A片段cDNA序列分析

用鸡胚成纤维细胞繁殖鸡传染性法氏囊病病毒（IBDV）天水毒株。用提纯的病毒颗粒提取基因组RNA。根据已报道的英国52／70株的序列设计引物，用反转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）进行cDNA扩增，获得1558bp和1590bp两个部分重叠的片段。结果表明，所克隆片段为3099的IBDV大开放读框。经与已报道的多个毒株相应序列比较后发现，核苷酸同源性介于97.4%-99.8%之间，推导的氨基酸同源性介于98.1%-99.5%。