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1.
以分离自西藏那曲县罗玛镇传统发酵酸牦牛奶中的乳酸乳球菌乳脂亚种(Lactococcus lactis subsp.Cremoris)IMAU60064为试验菌株,研究其最佳的培养条件。对碳源、氮源、缓冲盐等培养基成分及培养条件进行优化,并采用响应面法对优选的碳源、氮源和缓冲盐类的组成含量进行优化,得到IMAU60064的增殖培养基为:葡萄糖23g/L、大豆蛋白胨11g/L、牛肉膏11g/L、胰蛋白胨5g/L、NaAC1.8g/L、K2HP041.2g/L、柠檬酸钠1.2g/L、MgSO4·7H200.4g/L、MnSO4·5H2O54mg/L、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g/L、吐温80为1g/L。Lactococcus lactis subsp.cremorisIMAU60064在此增殖培养基中经30℃,14h培养活菌数可达到3.26×10^8cFu/mL,比在MRS中(6.54×10^7CFU/mL)提高近5倍。  相似文献   
2.
利用精子介导法建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型   总被引:1,自引:0,他引:1  
为探讨超急排斥反应(Hyperacute rejection,HAR)及延迟性异种排斥反应(Delayed xenograft rejection,DXR)的分子调控机制,采用优化的精子介导法(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)对建立hHT/hDAF双基因转移小鼠模型进行了研究。结果表明,应用树枝状聚合物(Dendrimers)优化SMGT后,2细胞胚GFP+RFP的阳性率达到4.51%,同对照组相比差异极显著(P0.01)。选取标记基因GFP+RFP双阳性的胚胎进行移植后获得36只仔鼠,PCR及Southern Blot检测结果表明,17只小鼠PCR结果呈hHT+hDAF双阳性,其中5只小鼠Southern Blot结果呈hHT+hDAF双阳性。上述结果表明,成功建立了Hht/hDAF双基因转移小鼠模型。  相似文献   
3.
牛乳β-酪蛋白检测的ELISA方法   总被引:3,自引:0,他引:3  
体外乳腺细胞培养是整体泌乳研究的有效补充,也在乳腺生物反应器的研究中发挥着重要作用.但乳腺细胞分离培养成功的标志不仅仅是细胞的形态特征及增殖特性,更重要的是细胞的生理功能及分化状态.β-酪蛋白为乳中所特有的蛋白质,其在乳中的含量仅次于α-S1酪蛋白居第二位,故可用这种蛋白做为乳腺细胞分化功能的指标.  相似文献   
4.
5.
牛β-酪蛋白座位无启动子基因打靶载体的构建   总被引:2,自引:0,他引:2  
将带有新霉素基因(neo)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的质粒pEGFP-C1进行了改造,去掉neo基因的启动子(Psv40),在无启动子的neo和完整的GFP基因两侧分别加入一个LoxP位点。然后将带有LoxP位点、筛选标记基因和报告基因的结构装入左右分别为牛β-casein基因1590bp和5833bp的同源臂结构中,构建成无启动子基因打靶载体pT-1590-LoxP-GFP-LoxP-5833。  相似文献   
6.
体外乳腺细胞培养是整体泌乳研究的有效补充,也在乳腺生物反应器的研究中发挥着重要作用。但乳腺细胞分离培养成功的标志不仅仅是细胞的形态特征及增殖特性,更重要的是细胞的生理功能及分化状态。卜酪蛋白为乳中所特有的蛋白质,其在乳中的含量仅次于a一马酪蛋白居第二位,故可用这种蛋白做为乳腺细胞分化功能的指标。(①闷p出linkal;;mln~mp)方法是以胡作为标记物或指示剂,进行抗原或抗体的检测。与放射免疫法比较。具有所需仪器设备简单、试剂价廉、无放射性危害等优点。9-$蛋白的EIJSA检测国内未见文献报道,…  相似文献   
7.
构建了β-葡聚糖酶表达载体 P~(SGI)。转化枯草杆菌 SO113后,可高效表达β-葡聚糖酶,并分泌到培养基中。其酶活性约为无表达质粒的枯草杆菌的十倍。  相似文献   
8.
表达鸡传染性法氏囊病病毒VP2重组鸡痘病毒的构建   总被引:2,自引:0,他引:2  
含IBDV保护性抗原VP2的质粒,以SphI消化,然后用T4噬菌体DNA聚合酶将末端补平,产物纯化后再以SalI消化一次,经再次纯化后与SmaI和SalI分步酶切的鸡痘病毒插入载体pFG1175-1相连,使唤基因顺向插入到载体P75启动子下游,得到含IBD VP2基因的重组插入载体pFG VP2。  相似文献   
9.
转基因羊研究进展   总被引:3,自引:0,他引:3  
转基因动物已成为当今生命科学发展的热点,其中转基因羊的研究又是转基因动物中较为活跃的领域。自1985年用显微注射法获得了第1只转基因羊以来,随后有关转基因羊获得成功及取得突破的相关报道逐渐增多;同时转基因羊的研制目的也从当初的转基因育种逐渐倾向于乳腺生物反应器,并亦取得显著成效。本文就此作一简要综述。  相似文献   
10.
克隆了鸡(Gallus gallus)的γ-干扰素cDNA,并用大肠杆菌(Escherichia coli)进行了温度诱导型表达。用PCR方法扩增了鸡γ-干扰素基因组基因,将其克隆到载体pGEM-T上。对重组载体的插入片段进行酶切分析和部分序列测定:证明了基因的正确性;克隆的鸡γ-干扰素基因的编码序列中存在一个点突变(G→A),这一突变导致一个三联体密码子GAA变为AAA,编码的氨基酸由谷氨酸(Glu)变为赖氨酸(Lys)。用鸡γ-干扰素基因组基因构建了真核表达载体pCI-ChIFN。将这一真核表达载体转染兔成纤维细胞的细胞系中进行表达实验:提取转染后细胞裂解物中的RNA,再以此为模板进行RT—PCR,获得了完整的鸡γ-干扰素cDNA基因,同时证明鸡γ-干扰素基因组基因能在兔成纤维细胞系中表达。用鸡γ-干扰素cDNA构建了温度诱导型原核表达载体pBVcDNA,并将其转导到大肠杆菌DH5α中,经细菌发酵和温度诱导,表达了一个18kD的特异蛋白,其表达量占细菌总蛋白的8.75%。  相似文献   
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