低温预处理和高温饥饿胁迫对冬小麦小孢子胚胎发生和植株再生的影响

以几种不同基因型的冬小麦(Triticum aestivum)为材料，研究了低温预处理(单核早期的离体麦穗，4℃，处理3周)和高温饥饿胁迫(上述处理过的麦穗的花药，置于饥饿培养基B中，33℃处理4d)对几种冬小麦基因型小孢子胚胎发生和植株再生的影响。结果表明：高温饥饿处理后，供试6种基因型都得到了诱导胚，其中F1-2获得的胚最多，为107．2／穗；低温预处理后，供试6种基因型中有5个基因型获得了诱导胚，说明高温饥饿处理可以在一定程度上克服基因型对胚胎发生的限制作用；高温饥饿预处理后，可获得大量的小孢子胚胎，但胚胎发育缓慢，分化绿苗频率极低：低温处理诱导产生的胚胎虽然相对较少，但胚胎生长速度快，再生能力强，绿苗产量高，适合在加倍单倍体育种中应用。     

利用雄性不育系育成桔梗新品种‘中梗1号’、‘中梗2号’和‘中梗3号’

 ‘中梗1号’、‘中梗2号’和‘中梗3号’是利用雄性不育系GP1BC1-12-11配制选择出的桔梗一代杂种,生长势强,根部药材产量高,抗立枯病。2年生‘中梗1号’桔梗总皂苷含量2.45%,桔梗皂苷D含量0.092%,侧根少,适于饮片加工。‘中梗2号’桔梗总皂苷含量2.89%,桔梗皂苷D含量0.097%,适于提取加工。‘中梗3号’桔梗总皂苷含量2.59%,桔梗皂苷D含量0.077%,粗纤维含量低,适于食用和药用。     

桔梗新品种‘中梗白花1号’和‘中梗粉花1号’

 桔梗新品种‘中梗白花1号’和‘中梗粉花1号’是利用来自大田生产的桔梗白花和粉花材料,采用系统选育方法,历经4代自交纯化育成,均为晚熟品种,花期长,适于药用和观赏栽培。‘中梗白花1号’侧根多,根部药材产量高,桔梗皂苷含量高,抗立枯病。‘中梗粉花1号’植株直立,侧根少,根部药材产量和桔梗皂苷含量均较高,抗立枯病。     

利用Taguchi方法优化荆芥ISSR-PCR反应体系

利用Taguchi方法对荆芥ISSR-PCR反应体系的5因素(dNTP,引物,模板DNA,Mg2 7aq酶)在4个水平上进行优化试验,使用Quantity One 4.6.2软件对电泳图片进行处理,PCR结果用SAS 9.1.3 SP4软件进行统计分析.得到如下主要结果:荆芥ISSR-PCR最佳反应体系(25 μL):dNTP 169.0 μmol/L,引物0.2 μmol/L,模板DNA 20.6 ng,Mg2 浓度2.1 mmol/L,Taq酶1.2 U;将目的条带权重赋值(s)引入PCR电泳结果量化赋值公式,增强其通用性;使用Taguchi方法进行荆芥ISSR-PCR反应体系优化效果明显,但建立的引物浓度回归方程无最大值,说明该方法的应用仍具有一定局限性.     

紫苏种子适宜的液体分选全程技术研究

为进一步推进液体分选在提升种子质量方面的应用,选用紫苏种子（发芽率约 55%）为材料,分别采用 0.85g/cm3 、0.90g/cm3、0.95g/cm3、1.00g/cm3 的乙醇溶液作为分选液体,对紫苏种子进行分选。结果表明：紫苏种子的比重与种子活力显著相关,如采用 0.90g/cm3、0.95g/cm3 的乙醇溶液进行分选,获选紫苏种子占比分别为 88.3% 和 67.7%,发芽率分别显著提升至78.9% 和 88.3%,均达到紫苏种子的相关质量标准要求,效果均显著优于传统的风选 - 圆孔筛筛选 - 比重选清选工艺（获选占比 61.9%,发芽率 68.0%）。综合确定紫苏种子液体分选全程工艺为：用 0.90g/cm3 的乙醇溶液分选紫苏种子,捞出下沉的种子,离心甩干 3min,43℃旋转烘干 35min。     

濒危药用植物降香黄檀DNA提取及RAPD反应体系优化

采用改良CTAB法提取了降香黄檀(Dalbergia odorifera T. Chen)新鲜叶片和硅胶干燥后放置3个月的叶片基因组DNA,并对影响RAPD反应的各因素进行了优化。结果显示新鲜的降香黄檀叶可以得到质量较高的DNA,硅胶保存后部分叶片所提的DNA有降解。优化后反应体系为:25μL反应体系中包括,模板的DNA 20ng,Taq DNA Polymerase 2.5U,Mg2 5mmol.L-1,dNTP 0.3 mmol.L-1,引物(S37)0.4μmol.L-1。反应条件为94℃预变性4min;94℃30s,36℃1min,72℃2min,40个循环;72℃延伸10min。     

利用基因枪共转化法获得转bar与P5CS基因黑麦草

以多年生黑麦草(Lolium perenne L.)种子成熟胚为外植体进行高效诱导愈伤组织的组培条件,在此基础上用基因枪法轰击其成熟胚的愈伤组织,共转化分别携带bar基因和P5CS基因表达框架的2种质粒,经1.2‰草丁磷(Glufosinate)抗性筛选获得了转基因再生植株.经聚合酶链式反应(PCR)检测筛选到整合bar基因的株系18个,遗传转化率为0.72%,其中5个检测到P5CS,共转化效率为27.8%.     

36种常用栽培药材种子播种质量现状研究

从待售种子批中取样，以检测其净度、生活力和千粒重，定量了解我国常用栽培药材种子播种质量现状。结果表明，来自不同市场或产区的药材种子质量参差不齐，36种药材770批次种子的净度平均为90．5％；生活力平均为54％，16．2％的种子批生活力低于20％；净度及生活力均达播种要求的种子批仅占52．6％；同种药材不同批次种子生活力、千粒重均存在较大差异，RSD分别达58．71％、14．38％。总体而言，种子播种质量较差，亟待改善。     

基于机器视觉技术的小粒中药材种子净度快速检测

为探究机器视觉技术用于小粒中药材种子净度快速检测的可行性,以黄芩、桔梗、黄芪、紫苏和柴胡5种常见小粒中药材种子为材料,使用扫描仪获取净种子、其他植物种子和所含杂质的图像,采用种子自动化分析系统(PhenoSeed)批量提取种子、其他植物种子及所含杂质的颜色、尺寸及纹理信息,通过相关性分析和主成分分析进行特征变量的筛选,采用多层感知器(MLP)和二元逻辑回归(BLR)建立上述5种中药材种子净度快速检测模型。结果表明,净种子、其他植物种子及所含杂质在物理指标方面存在显著差异,针对不同种子,采用不同指标建立的MLP净度模型的训练集和测试集准确率均在96.0%以上,该模型在不同中药材种子上的稳定性均优于BLR模型;以特征指标建立的模型稳定性优于全部指标的建模效果,运用特征变量建立的MLP模型对不同净度梯度(75.0%~100.0%)的混合样本进行预测,回归曲线的决定系数均达到0.99以上。采用机器视觉技术获取种子、其他植物种子及所含杂质颜色、尺寸和纹理等信息,以特征指标建立MLP模型可用于小粒中药材种子的净度快速检测。     

北柴胡鲨烯合酶基因及其编码区cDNA克隆与序列分析

鲨烯合酶(EC.2.5.1.21,squalene synthase,SS)是植物甾醇和三萜化合物生物合成途径中的关键酶。为研究鲨烯合酶在柴胡皂苷生物合成中的作用,以北柴胡(Bupleurum chinense DC.)不定根为试材,采用Trizol法提取总RNA,利用RT-PCR方法从北柴胡中扩增出了鲨烯合酶cDNA特异片段,并进行了克隆、测序。测序结果显示得到了两个序列不同的cDNA(BcSS1和BcSS2),分别为1245bp和1248bp,分别编码414及415个氨基酸。BcSS1和BcSS2间的核苷酸和氨基酸一致性分别为98%和96%。NCBI Blastx结果显示与三岛柴胡和三七SS氨基酸序列相似性最高,BcSS1的一致性分别为99%和90%,BcSS2的分别为97%和87%。在此基础上,利用PCR技术从北柴胡不定根中扩增得到了一个SS基因克隆,长5880bp,包含12个内含子。