颐和园南湖岛木香的快速扦插繁殖技术

名园名树既具有生物学价值,又具有活的历史文化价值。本文对颐和园南湖岛的木香扦插繁殖进行分析,提出了适合北方气候环境的快速扦插繁殖技术。通过此途径对名园植物资源以保护,具有着生物资源和历史遗产保护的双重意义。     

细胞穿透肽介导的小黑麦小孢子遗传转化研究

本研究选用小黑麦小孢子作为供试材料,进行细胞穿透肽介导的植物单倍体细胞遗传转化可行性研究。提取单核靠边期的小黑麦小孢子进行悬浮培养,将细胞穿透肽与报告基因GFP的表达框复合物对小孢子进行转化。转化植株进行了PCR分子检测,并在荧光体视显微镜下观察外源GFP基因的表达情况。共获得21株候选转基因植株,其中染色体自然加倍植株为10株。T1代加倍植株的PCR检测结果显示,加倍的转基因株系中有3个株系的PCR检测结果呈阳性。通过荧光体视显微镜可在转基因植株的幼胚部位观测到GFP蛋白的荧光。以上结果表明外源GFP基因已经整合到小黑麦基因组上并且得到表达并稳定遗传。因此,由细胞穿透肽介导的植物单细胞转化是一种有效、可行的植物单细胞转基因方法。     

人工合成gna基因在小麦中的表达及其抗蚜虫效果研究

利用经密码子优化的、人工合成雪花莲凝集素(Galanthusnivalisagglutinin),gna基因及RbcS启动子构建了高效特异表达载体pBAC202,通过基因枪轰击小麦幼胚和幼穗,将外源gna基因导入到3个高产小麦(TriticumaestivumL.)品种中,获得42个转基因后代株系。对转基因后代植株进行了DNA点杂交、PCR及PCR-Southern验证,确认外源gna基因已成功地整合到小麦基因组中。进一步的凝集素活性检测表明,小麦叶片中表达的凝集素可使红细胞凝集,并具有正常的生物学活性。转基因植株在人工饲养条件下进行抗蚜虫(Rhopalosiphumpadi)试验,蚜口密度抑制率从19%～73%不等,部分株系抑虫效果较好。利用转基因的方式可将外源抗虫基因gna导入到小麦中,并可有效地增强小麦的抗蚜能力,为选育具抗虫特性的优质小麦提供新的途径。     

克隆羊的STR-PCR亲权鉴定

建立了利用STR-PCR技术检测克隆羊的DNA多态性的方法,即利用带有荧光标记的特异性引物,扩增产物带有荧光,在allelic ladder的指示下计算出扩增产物大小,即等位基因的大小。用该方法对克隆羊的8个DNA位点进行了遗传多态性分析,成功地对各位点进行基因型分离检测,结果表明克隆羊的基因组DNA和供核羊的基因组DNA是一致的。此方法和其他方法检测的结果完全一致。     

利用SDS-PAGE鉴定转基因小麦HMW-GS的表达类型和后代遗传

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)在蛋白质水平上对T2～T5代小麦转基因株系高分子量谷蛋白亚基(HMW—GS)的遗传表达及其分离进行了鉴定和分析。结果发现，外源1Dx5和1Dy10基因在T2代部分株系中表达；在有的株系中出现了原亚基(8亚基)的缺失或沉默和新亚基(暂定8^*)的产生，因而检测出2 5 10 12，2 5 7 8^* 10 12，5 7 10，2 7 10 12的多种类型。对2 5 10 12型株系进行了多代跟踪分析，发现其在T2～T5代陆续发生分离，存在于不同单株、不同单穗的子粒和同一单粒后代之间。经筛选，获得了天然不存在的亚基类型为2 5 10 12，2 10 12，2 5 12等稳定表达的种质创新株系。     

低温预处理和高温饥饿胁迫对冬小麦小孢子胚胎发生和植株再生的影响

以几种不同基因型的冬小麦(Triticum aestivum)为材料，研究了低温预处理(单核早期的离体麦穗，4℃，处理3周)和高温饥饿胁迫(上述处理过的麦穗的花药，置于饥饿培养基B中，33℃处理4d)对几种冬小麦基因型小孢子胚胎发生和植株再生的影响。结果表明：高温饥饿处理后，供试6种基因型都得到了诱导胚，其中F1-2获得的胚最多，为107．2／穗；低温预处理后，供试6种基因型中有5个基因型获得了诱导胚，说明高温饥饿处理可以在一定程度上克服基因型对胚胎发生的限制作用；高温饥饿预处理后，可获得大量的小孢子胚胎，但胚胎发育缓慢，分化绿苗频率极低：低温处理诱导产生的胚胎虽然相对较少，但胚胎生长速度快，再生能力强，绿苗产量高，适合在加倍单倍体育种中应用。     

3品种鹅Myostatin基因3′-调控区SNPs群体遗传学分析

利用已测得的鹅Myostatin基因3′-调控区核苷酸序列设计5对PCR-SSCP引物,对扬州鹅、皖西白鹅以及五龙鹅3品种家鹅该区域内单核苷酸多态性进行了分析,并探索了单核苷酸多态性与生产性能之间的关系。结果表明,检测到A→G（88位）和G→T（353位）2个单碱基突变位点。88位处,E等位基因为优势等位基因,具有EE、EF两种基因型,以扬州鹅杂合子频率最高（0.550）,皖西白鹅30个个体仅有一例EF型;353位处,G为优势等位基因,具有GG、GH和HH 3种基因型,3品种均具有较高的GG基因型频率、较低的HH基因型频率。屠体性能分析发现,EF基因型家鹅具有更高的屠体性能;扬州鹅、皖西白鹅GG型个体的腿肌重和腿肌率显著高于HH型个体（P〈0.05）,五龙鹅腿肌重、腿肌率具有GG型（GH型（HH型的趋势,但差异不显著（P〉0.05）。     

肉兔血浆碱性磷酸酶活性比较及其与生产性能关系的研究

对新西兰白兔、加利福尼亚兔、布列塔尼亚兔 (A系 )、齐卡兔 (G系 )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ ) 1 0 0日龄血浆碱性磷酸酶 (AKP)活性 ,及其与1 0 0日龄体重、平均日增重和料重比的关系进行了研究。结果表明 :齐卡兔 (G系 )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 )血浆 AKP活性显著高于其他 5个品种 (或组合 ) (P<0 .0 5) ,其他 5个品种 (或组合 )间血浆 AKP活性差异不显著 (P>0 .0 5)。 8个品种 (或组合 )血浆AKP活性与 1 0 0日龄体重、平均日增重均呈正相关 ,总相关系数达极显著水平 (P<0 .0 1 ) ;与料重比均呈负相关 ,但不显著 (P>0 .0 5)     

鹅Myostatin基因编码区核苷酸多态性研究

利用鹅Myostatin基因3个外显子设计4对引物,分析扬州鹅、皖西白鹅和五龙鹅3个品种鹅的Myostatin基因编码区的单核苷酸多态性。结果表明:鹅该基因编码区高度保守,仅第3外显子的第263 bp处检测到由A→C的单碱基“沉默“突变,该突变位点仅检测到AA、AB 2种基因型,且杂合子频率极低(2.5%),皖西白鹅群体未能检测到AB型个体。对五龙鹅群体的初步分析发现,AB型个体具有较高的产肉性能,但因所检测到的杂合子个体数较少,故该位点各基因型与生产性能间的关系有待于进一步研究证实。