互叶白千层栽培技术研究进展

互叶白千层(Melaleuca alternifolia)是一种药用和香料植物,其精油用途广泛,市场需求大。本文从互叶白千层栽培密度、施肥、水分管理、采收等几个方面阐述了国内互叶白千层栽培技术研究进展,用以总结一系列的栽培技术。栽培技术的日趋成熟将促进互叶白千层林分产量的提高,为白千层产业提质增效提供技术支撑。     

尾叶桉GLU4肉桂酰-辅酶A还原酶基因克隆及原核表达

肉桂酰-辅酶A还原酶(Cinnamoyl Co-A Reductase,CCR)是木质素合成中的关键酶,根据植物中CCR保守序列设计引物,以尾叶桉GLU4嫩茎为材料克隆到其CCR基因,命名为Eu CCR。该基因g DNA长2 918bp,c DNA长1 045 bp,CDS区编码336个氨基酸。EuCCR核酸序列与Gen Bank已登录的桉属植物CCR基因同源性达到96%以上,与伞房属、杯果木属植物CCR的同源性达85%以上,其编码的氨基酸序列经比对发现具有完整FR_SDR_e结构域及NADP结合位点和底物结合位点,与可可树等植物中CCR基因编码序列同源性也在84%以上,确定为CCR基因。对EuCCR蛋白序列理化性质及结构进行生物信息学分析,利用MEGA软件对基因序列进行系统进化树分析。采用pQE30/M15系统对EuCCR进行原核表达,重组质粒成功表达分子量约36 kD的目的蛋白。本研究从尾叶桉GLU4中克隆得到EuCCR基因并原核表达,为该基因的酶学分析以及利用该基因转化调控尾叶桉木质素合成奠定基础。     

EuCAD基因不同位置片段RNAi对烟草木质素合成的调控效果

为尾叶桉GLU4无性系肉桂酰乙醇脱氢酶基因(EuCAD)调控其木质素的合成提供技术参考,以模式植物烟草为试验材料,采用生物信息学技术分析其EuCAD基因序列,根据保守结构域的分布情况选择EuCAD基因不同位置的4个片段(S1、S2、S3和S4)分别构建RNA干扰载体并转化烟草后获得转基因烟草植株(pS1、pS2、pS3和pS4),检测分析转基因烟草植株中CAD基因表达水平、茎部解剖结构、木质素及纤维素的含量变化。结果表明：S1和S2片段对木质素的调控效果最明显,其转基因烟草植株pS1和pS2的基因表达水平分别较野生型降低87.48%和87.30%,木质素含量较野生型降低15.26%和11.44%;S3和S4片段的调控效果较差,pS3和pS4多项表型检测结果与野生型相比降幅较小或无差异。     

2个油茶品种种子萌发过程中激素生理初探

比较了岑溪软枝油茶和三江81号种子的萌发情况,并采用反相HPLC法探讨了岑溪软枝油茶和三江81号在种子萌发过程中ZR,GA3,IAA和ABA这4种植物主要的内源激素的动态变化规律和比值变化。结果表明,岑溪软枝油茶发芽稍早于三江81号,发芽率高于三江81号。在种子萌发过程中,激素变化趋势类似,岑溪软枝油茶中的ZR,GA3,IAA激素总体水平都要高于三江81号,但在岑溪软枝油茶中ABA的降低速度和幅度都要大于三江81号,激素含量动态变化及比值变化与种子萌发情况表现出相关性,对油茶种子萌发过程的生理生化变化取得了更进一步的了解。     

淹水胁迫中澳洲茶树内源激素动态变化

为探明淹水胁迫过程中澳洲茶树的生理响应机制,对其淹水胁迫下内源激素动态变化规律进行了研究。结果表明,在淹水胁迫前期,ZR,GA3,IAA和ABA这4种内源激素含量都呈小幅波动,而胁迫中、后期,ZR,GA3,IAA这3种促进植株生长的激素整体呈升高趋势,ABA则呈下降趋势,(ZR+GA3+IAA)/ABA的值也逐渐升高。研究结果将有助于更深入了解澳洲茶树在淹水条件下的激素应答机制,为种植生产中的合理用水提供理论基础。     

高效液相色谱法分离和测定油茶茎尖组织中4种内源激素

建立了高效液相色谱法测定油茶茎尖组织中生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米核苷(ZR)、脱落酸(ABA)4种内源激素的方法。应用反相C18色谱柱,以甲醇-水(含0.75%冰乙酸,35∶65,V/V)为流动相,流速为0.8 ml/min,进样量10μl,检测波长254 nm,柱温30℃,该方法各峰分离效果理想。IAA、GA3、ZR、ABA的最低检出限分别为0.05、0.01、0.02、0.01 mg/L,回收率分别为98.2%、97.9%、96.3%、93.4%。该方法易操作且准确性高。     

塔拉种子组培芽器官诱导技术研究

以塔拉种子萌发的嫩芽为对象,研究其丛芽发生、生长的技术。结果表明,塔拉嫩芽培养理想的基本培养基是改良MS(MS+Ca(NO3)2100 mg/L);继代芽在改良MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+20 000mg/L蔗糖培养基,室温(25±1)℃,4 000～6 000 lx自然散射光照条件下,培养28天增殖系数达4.3,叶色翠绿,生长健壮。     

试管内沙基质培养油茶无菌芽技术初报

以油茶(Camellia oleifera L.)茎段为材料,通过外植体消毒方法的正交试验、外植体采集时间和培养基质试验,提出了一种油茶无菌芽培养的新方法:在4,5月份或9,10月份,采集半木质化茎段,清洗后采用75%酒精消毒5 s和0.1%HgCl2消毒10 min的组合进行处理,接种在含有改良MS液体培养基的河沙基质中,新萌发的嫩芽接种至MS固体培养基培养7 d,未污染的无菌芽可用于下一步的组织培养。此方法可有效避免褐化,降低污染率,不需频繁转接,且有效萌芽率高,最高可达90.91%。     

EuCAD 基因小片段 RNAi对烟草木质素合成的影响

【目的】深入研究尾叶桉(Eucalyptus urophylla)肉桂酰乙醇脱氢酶(CAD)基因序列中的关键片段并利用其进行木质素合成调控。【方法】采用生物信息学工具对EuCAD基因进行序列分析,根据编码蛋白保守结构域的分布情况进行筛选,获得一段44 bp关键序列用于构建RNA干扰载体并转化烟草,获得转基因植株并对基因表达水平、木质素含量等表型进行检测。【结果】获得28个转基因株系,转基因植株正常生长发育,与野生型无异,随机挑选3个株系进行检测,发现CAD基因表达水平均较野生型显著降低,以R1株系降幅最大,降至野生型的12.51%。对R1株系进一步检测发现,其茎部直径与野生型无异,但木质部厚度较野生型显著降低,其中第4节处降低11.75%,第6节处降低10.06%,茎部整体木质素含量较野生型降低15.26%。表明该RNAi片段显著抑制烟草中CAD基因表达并影响烟草木质素合成。【结论】通过序列分析筛选出的EuCAD基因小片段,可通过RNA干扰显著影响烟草木质素合成,为尾叶桉木质素合成调控研究提供了技术参考。     

4种不同施肥处理对澳洲茶树组培苗生长动态的影响

通过测量4种不同施肥处理下澳洲茶树组培苗株高和地径月生长量,分析组培苗株高和地径的生长动态;并对各施肥处理下株高和地径进行Logistic曲线拟合,确定Logistic曲线的3个参数及速生点和速生期,为澳洲茶树组培苗科学施肥和抚育提供依据。