猪流行性腹泻病毒黑龙江分离株ORF3基因的克隆、表达及分子进化分析

克隆2017年黑龙江省大庆地区流行PEDV毒株(HLJ/DQ/2017)ORF3基因,通过真核表达及分子进化分析方法,为研究ORF3蛋白生物学功能提供重要的实验基础。TRIzol裂解法提取病毒RNA,RT-PCR技术扩增ORF3基因片段并测序,克隆至p EGFP-N1载体上,转染至HeLa细胞。应用DNAStar、DNAMAN、MEGA5.0软件进行序列比对和发育树绘制,应用Western Blot技术、Immunofluorescence技术检测ORF3蛋白的表达和细胞定位。经过酶切和测序验证p EGFP-N1载体中正确插入了ORF3基因,Western Blot法、Immunofluorescence法证实ORF3-EGFP融合蛋白聚集成核表达在HeLa细胞质的局部,由进化树分析显示,该毒株和2015年黑龙江地区流行的两个株毒株(HLJ/2015/116、HLJ/2015/DP1-1)位于同一群,但相比2011年黑龙江地区爆发的毒株(CH/HLJ/HH-2/2011),前者亲缘关系更近一些。融合蛋白ORF3-EGFP在HeLa细胞中聚集成核表达,遗传进化分析表明,该毒株与2015年黑龙江省流行的PEDV毒株相比无较大变异,且为目前世界最为流行的PEDV毒株类型。     

研究性教学模式下遗传学教学的改革与实践

研究性教学是培养学生创新精神、提高学生研究能力的有效方式。笔者根据在黑龙江八一农垦大学十多年的遗传学教学经验,对本科生进行了遗传学研究性教学的改革与实践。文章概括了遗传学研究性教学模式,并且提出遗传学教学改革应该努力培养创新型人才,不断进行教学梯队建设,优化教学条件,加强教学效果,可以更好地提高学生的创造性和学习的主动性,开拓学生的视野,为培养创新性人才奠定良好的基础。     

猪流行性腹泻病毒E基因真核表达载体的构建及融合蛋白的表达

E蛋白是猪流行性腹泻病毒的小膜蛋白,为了研究E蛋白在病毒侵染宿主细胞过程中的作用,构建了PEDV E基因的真核表达载体。通过RT-PCR技术扩增E基因片段,经双酶切连接至pEGFP-N1载体,酶切鉴定及测序结果证实PEDV E基因成功克隆到pEGFP-N1中,并将重组质粒命名为pEGFP-N1-E。将pEGFP-N1-E转染He La,利用Western Blot和免疫荧光技术检测pEGFP-N1-E的表达以及定位情况,结果显示pEGFP-N1-E在He La细胞中成功表达,并且在胞质胞核均匀分布。结果表明:pEGFP-N1-E已被成功构建,并且在He La细胞中正确表达。为后续研究关于E基因的功能及其在抗病毒中所发挥的作用等方面奠定了研究基础。     

协同创新型人才的培养与探索——以生物制品学课程为依托

以生物制品学为依托,研究了创新型人才培养的制约因素,制订了创新型人才培养的策略和评价体系,培养了协同创新型人才的人文素质和科研创新精神,最终提升了协同创新型人才的培养水平。     

互联网思维下研究生科研素质培养模式研究——以分子病毒学课程为例

以分子病毒学课程为例,开展了互联网思维下生物学研究生科研素质培养模式的研究。通过构建研究生的专业知识体系、训练研究生的实验操作能力、培养研究生的科研思维水平和训练研究生的论文写作能力,提升了生物学研究生创新型人才的培养水平,说明该模式是提高生物学研究生人才培养质量的有效途径。     

雏鸡绿脓杆菌与大肠杆菌病混合感染的诊治

一、发病情况 2007年5月中旬，山东省嘉祥县某乡镇养殖专业村部分养殖户饲养的商品蛋雏鸡出现不明原因的死亡现象，鸡只死亡主要集中在出壳后的2～4天。在近8天的时间内．各养殖户饲养的10000多只雏鸡先后死亡1000多只，引起了养殖户的恐慌，给养殖户造成了严重损失。     

母猪产后常见病疗法

1．母猪产后拒食。因产道感染而拒 食的母猪,可用青霉素800万单位,链 霉素400万单位,混合在20毫升安乃近 中进行肌肉1次注射,每天2次,连注2 天。因喂料过多、饲料浓度太大造成厌 食的母猪,精料、粗料、青料搭配要合 理,不宜饲喂得过肥或过瘦。中药治 疗:黄芩60克、黄连50克、银 花40克、陈皮40克、厚朴40克、 地丁草100克、车前草80克、夏 枯草80克、猪苦胆1个,加醋 200毫升,共煎沸后加入稀饭中 1次喂给。每天1次,连喂3天, 可增进食欲。     

南京琵琶鸭制作

琵 琶 鸭 又 称 琵 琶 腊 鸭 , 一 年 四 季均 可 生 产 。 一 、原 料 配 方 鸭 10只 ,盐 0.5～1千 克,盐卤 水适 量 二 、制 作 方 法 1. 料 :选择 肉 质 嫩 、油 脂 少 的 鸭 选作 加 工 原 料 。因 油 脂 过 多 的 鸭 子 ,夏 天晒 干 易 滴 油 ,而 使 风     

蔬菜育苗可在地下进行

地下苗床一年四季都适合育苗,对反季节栽培的蔬菜来说,地下育苗更能显示其优势.