双T-DNA表达载体转化大豆的研究

利用含有筛选标记基因和目的基因△6-脂肪酸脱氢酶基因的双T-DNA共转化表达载体pLIN61,经农杆菌EHA101介导,采用子叶节转化法转化大豆,使用除草剂Glufosinate作为筛选剂,获得了一批携带有玻璃苣△6-脂肪酸脱氢酶基因的转基因大豆,转化效率为2.0%,共转化频率及实际转化率分别为56.25%、1.12%.PCR检测和Southern杂交结果证明,玻璃苣D6D已经整合到大豆的基因组上.RT-PCR检测结果显示,玻璃苣△6-脂肪酸脱氢酶基因在转基因大豆的转录水平上得到了表达.     

食用菌益螨的初步观察试验

食用菌益螨的初步观察试验郭丽琼１林俊扬２周子华１（１福建农业大学土地与环境学系食用菌教研组福州３５０００２；２福建省田市农业科学研究所，莆田黄石，３５１１４）食用菌生产经常受到菇蚊、菇蝇及害螨的严重为害。据报道，蘑菇、草菇由于菇蚊、菇蝇的为害造成大幅...     

简便高质量的食用菌总RNA提取方法

STE法是针对食用菌多糖含量高而设计的一种提取食用菌总RNA的有效方法。本研究以灵芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌丝体为材料，采用STE法提取其总RNA，同时以Trizol法作对照。结果表明：采用STE法提取的三种菌丝的总RNAA260／A280比值在1．80～2．10范围内，A260／A230略大于2．00；而Trizol法提取的总RNAA260／A280比值小于1．80，A260／A230小于1．90，明显比STE法效果差；总RNA电泳检测表明：STE法的3条带（28S rRNA、18SrRNA和5SrRNA）清晰，无拖尾，无杂带，效果比Trizol法好；将STE法提取的总RNA进行反转录后合成双链cDNA，进行预扩增，电泳显示呈弥散状；再进行选择性扩增，有相同或相异的条带。进一步表明STE法提取的总RNA质量较高，可以满足后续分子生物学研究的要求。     

杏鲍菇菇脚对肉兔生长性能及肉品质影响研究

研究在饲料中添加杏鲍菇废弃菇脚,并且投喂柚子皮对肉兔的生长性能及肉品质的影响。把48只30d～32d龄的新西兰肉兔随机分为3组,分别投喂0％、1％、5％烘干菇脚,同时每组又分为2组,分别投喂烘干柚子皮。结果表明添加5％杏鲍菇菇脚及投喂柚予皮均能显著降低兔粪TBARS水平,改善肠道抗氧化状况;饲喂菇脚对肉兔增重和兔肉品质没有影响,兔肉中无棉酚残留;柚子皮对增重无显著影响,但能显著降低兔肉胆固醇含量。     

药用真菌植酸酶生产菌的筛选及基因片段的克隆

从15种药用真菌中筛选出8种产植酸酶的菌株，并对透明圈与菌落直径比较大的芸芝，茯苓、红托、赤芝进行酶活测定和基因片段的克隆。     

杀虫剂和杀螨剂对蘑菇菌丝生长的影响

采用改良琼脂玻皿法研究了５种杀虫剂和杀螨剂对蘑菇丝生长的影响，结果表明，不同药剂对蘑菇菌丝生长的影响程度差异显著，其中敌敌畏和洗衣粉对蘑基菌生长的影响最大，其平均抑制分别为－８８．６４％和－５６．７７％，两者差异不显著，中西溴氟菊酯和氯氰酯次之，平均抑制率分别为－２１．５２％和－２７．８９％，两者差异不显著，灭螨灵平均抑制率最小，为－１７．０４％药剂质量分数与蘑菇菌丝的生长速度有显著或极显著的负相     

杀虫杀螨剂对草菇菌丝生长的影响

采用修正的琼脂玻皿法研究了四种杀虫杀螨剂对草菇菌丝生长的影响.结果表明,不同药剂对草菇菌丝生长的影响程度存在着显著差异.其中敌敌畏对草菇菌丝生长的影响最大,其平均抑制率为-65.55%;中西溴氟菊酯影响最小,平均抑制率为-11.40%,且在25.00×10~(-6)和20.00×10~(-6)的低浓度下对草菇菌丝的生长还有促进作用,促进率分别为 11.25%和 17.75%;灭螨灵和氯氰菊酯的平均抑制率分别为-29.20%和-29.60%.药剂的浓度与草菇菌丝的生长率成显著或极显著的负相关,即草菇菌丝的生长率随药剂处理浓度的增大而降低.本研究结果还表明,药剂对草菇菌丝生长的影响不仅表现在生长率上,还表现在草菇菌丝密度、分枝次数、厚垣孢子数量及菌丝色泽上.     

基于CRISPR/Cas9技术研究金针菇冷诱导结实基因HK1和HK2的编辑转化系统

对金针菇(Flammulina velutipes)冷诱导相关的组氨酸激酶基因HK1和HK2构建了基因组编辑(CRISPR/Cas9)pgfvs-Cas9-HK1-gRNA和pgfvs-Cas9-HK2-gRNA表达载体,探索了金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度,利用PEG介导的方法将表达载体pgfvs-Cas9-HK1/HK2-gRNA转化金针菇原生质体,经潮霉素筛选后的拟转化子再进行PCR鉴定。结果显示:金针菇菌丝体及原生质体对潮霉素的最低敏感浓度均为50μg/mL;经潮霉素筛选后的部分拟转化子成功扩增出Cas9的部分片段,携带有HK1、HK2基因载体的Cas9蛋白基因成功整合到了金针菇的基因组中,两个表达载体转化率分别为24.1%和12.5%。