丙型肝炎病毒NS4B蛋白调控Hep3B细胞非折叠蛋白质反应研究

研究表达的丙型肝炎病毒(HCV)NS4B对Hep3B细胞非折叠蛋白质反应的影响。NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染Hep3B细胞,G418筛选和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内XBP1 mRNA剪接,Western blot鉴定ATF6蛋白切割,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78和XBP1启动子活性。G418筛选和Western Blot鉴定证实获得稳定表达NS4B的Hep3B细胞;在该细胞内,XBP1 mRNA剪接、ATF6切割、XBP1和Grp78启动子激活均被检测到。NS4B在Hep3B的稳定表达诱导了非折叠蛋白质反应。     

持续表达HCV NS5B的Bel-7402细胞系的构建与鉴定

HCV NS5B是HCV复制所必需的RNA依赖的RNA聚合酶和抗HCV药物的一个理想靶标,构建持续表达NS5B的肝细胞系将有助于研究HCV在肝细胞的复制机制和抗HCV药物的研发.ScaI酶切含有NS5B基因的重组表达载体pcDNA-5B,获得的线性化pcDNA-5B通过脂质体转染人肝癌细胞系Bel-7402细胞,G418筛选转染细胞.阳性细胞经基因组PCR、RT-PCR和Western Blot鉴定,证实获得持续表达NS5B的Bel-7402细胞系.体外复制试验和荧光索酶试验表明:Bel-7402细胞表达的NSSB蛋白有体外和细胞内RNA依赖的PNA聚合酶活性.持续表达有聚合酶活性的HCV NS5B的Bel-7402细胞系的建立为进一步研究NS5B催化的HCV复制机制和NS5B抑制剂的筛选奠定基础.     

温度对双歧杆菌及其产品质量影响研究进展

双歧杆菌作为消化道的生理性益生菌,已被广泛应用于食品、医药、饲料等行业.由于双歧杆菌的生长和存活条件比较苛刻,在生产与贮藏过程中保证功能菌的活菌数量和产品质量的问题亟待解决,其中温度是对产品影响最为重要的因素之一.从双歧杆菌生长和其产品品质两方面阐述了温度对其影响的概况.     

江西省首次发现不明水生生物聚集体的初步研究报告

目的:为了探索不明水生生物聚集体的生物种类组成和化合物成分.材料:以南昌县泾口乡大浦村水域中的不明水生生物聚集体为试验材料.通过对水生生物聚集体的细胞生物组成采用显微观察,通过与微生物鉴别图谱比对,经中科院武汉水生所及上海水产学院的专家鉴定;聚集体透明的非细胞物质采用理化分析法,分别测定其水份,有机物质的组成含量和灰份含量.结果:聚集体细胞生物主要由蓝藻门(Cyanophyta)的6种藻类:水网藻(Hydrodictyon reticulatum)、水溪绿球藻(Chlorococcumin fusionum)、椭圆小球藻(Chlorella ellitpsoidea)、四尾栅藻(Scenedesmus quadricauda)、亚麻色单歧藻(Tolypothrix byssoides)、阿氏拟鱼腥藻(Anabaenopsis arnolodii)和硅藻门(Bacillariophyta)的3种藻类:偏心圆筛藻(Coscinodiscus excentricus)、短线脆杆藻(Fragilaria brevistriata)、近缘桥弯藻(Cymbella affinis)等组成;聚集体透明的非细胞物质主要由水分、有机质和灰分组成,其中水分占98.90%.干物质仅占5.10%;在干物质巾总糖和蛋白质及灰份的含量分别为17.37%、79.77%和2.68%.结果表明:南昌县泾口乡大浦材水域中的发现的不明水生生物聚集体主要由水网藻等9种分布广泛的藻类组成,无毒,并非是传说中的"太岁".     

洋葱伯克霍尔德菌T1828和ZWL15-Tn5转座子插入突变体库的构建及相关突变体的筛选初探

采用双亲结合法将含有Tn5转座子的质粒pRLl063a导入洋葱伯克霍尔德菌T1828和ZWL15中,在含有卡那霉素和链霉素的抗性平板上筛选抗性接合子。通过随机插入诱变后,共获得300个突变株。PCR检测随机挑选的6株突变株,结果显示为阳性;且6株突变株发酵后高效液相色谱检测不能合成冠毒素。研究结果表明,6株突变株均已被Tn5插入染色体基因组且丧失冠毒素合成的能力。本研究为今后转座子插入位点侧翼序列的克隆与测序,并进行功能回复试验提供了基础。