链霉菌N2粗提物对水稻抗性相关生理因子的影响

为探明新型抗真菌活性物质农抗N2粗提物诱导水稻幼苗增强抗性的生理机制,开发绿色高效的生物农药,用不同浓度农抗N2粗提物处理水稻,测定了农抗N2粗提物防治水稻纹枯病的能力,及其对水稻抗性相关生理因子的影响。结果发现,经2.88,5.77,11.53μg/m L农抗N2粗提物处理后,离体水稻叶片的病情指数相比CK组分别降低了33.34%、41.67%和50%,有效地阻止了纹枯病菌侵染活体水稻植株。此外,适宜浓度的农抗N2粗提物不仅能激活水稻幼苗体内SOD、CAT和POD等抗氧化酶活,有效清除活性氧含量,而且能显著增强PPO和PAL相关酚类物质代谢酶的活性,增加总酚的积累,尤以1.44μg/m L效果最佳;同时,农抗N2粗提物能促进可溶性总蛋白、几丁质酶和β-1,3葡聚糖酶相关病程蛋白的产生,且于48 h左右达最大值,由此水稻幼苗的抗病害能力得到显著提升。该研究结果为揭示生防Streptomyces sp.N2的生防机理及应用提供了有力的科学依据。     

Streptomyces sp.N2所产农抗N2对桔青霉的拮抗活性及作用机制研究

【目的】Streptomyces sp. N2是本课题组分离筛选到的一株可产新型抗真菌活性物质(3-甲基-3,5-氨基-4-烯-吡喃-2-酮,分子式为C_6H_7O_2N,农抗N2)的新种,此活性物质对桔青霉具有良好的拮抗效果。从生长特征、细胞形态学等角度,为揭示农抗N2在桔青霉生长发育中的抑菌作用机理奠定基础。【方法】首先采用常量培养基稀释法测定了农抗N2对桔青霉的最低抑菌浓度、杯碟法测定了不同浓度农抗N2对桔青霉的抑菌活性菌丝和生长量法测定了不同浓度农抗N2对桔青霉生长曲线的影响,并通过扫描电镜及透射电镜探究了农抗N2对桔青霉超微结构的影响。【结果】Streptomyces sp. N2所产农抗N2对桔青霉有较强的抑制作用,而且其机理初步判定为破坏桔青霉菌丝的菌丝结构,推迟了桔青霉对数期的到来而抑制菌体的生长。菌体最低抑菌浓度(3 d)为5.77μg/mL,其对应的抑菌圈大小为(13.04±1.06)mm。药液处理后,桔青霉生长对数期推迟了2 d。由扫描电镜以及透射电镜结果可推测,农抗N2可干扰桔青霉细胞壁合成,破坏细胞膜结构,致使细胞发生质壁分离。【结论】农抗N2对桔青霉的菌丝生长具有很强的抑制作用,且具有浓度效应,其对桔青霉的形态和结构有很大的破坏作用,可以推测农抗N2能够影响桔青霉细胞壁相关蛋白的合成,使细胞壁的通透性增强,影响其细胞膜及内部细胞器。     

重组枯草芽孢杆菌产角蛋白酶的发酵培养基及发酵条件优化

角蛋白是潜在的优良饲用蛋白资源，其中角蛋白酶作为可特异性降解角蛋白的酶类，在角蛋白饲料化领域展现出广泛的应用潜力和价值。本研究以自主构建的重组角蛋白酶工程菌枯草芽孢杆菌WB600-pMA5-kerJY-23为研究对象，利用单因素和二次通用旋转组合设计试验对其摇瓶发酵产角蛋白酶的发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明：该菌株最佳发酵产酶条件为：葡萄糖25 g/L，蔗糖25 g/L，酵母浸膏20 g/L，硫酸铵10 g/L，磷酸氢二钾1.5 g/L，氯化钠0.3 g/L，氯化钙0.025 g/L，硫酸镁0.025 g/L，硫酸亚铁0.015 g/L，氯化锰0.05 g/L，初始pH 8，装液量45 mL/250 mL三角瓶，接种量6%，培养温度37℃，摇床转速200 r/min，发酵周期36 h。在该优化条件下，重组枯草芽孢杆菌WB600发酵产角蛋白酶的酶活达到（2110±15.011）U/mL，较优化前提高了5.10倍（P <0.05），为该酶在角蛋白降解及资源化利用领域的应用提供了理论依据与研究基础。     

利用甜高粱秸秆汁产单细胞蛋白的分批补料发酵研究

本文以甜高粱秸秆汁为主要的发酵原料,对热带假丝酵母SG-1在15-L罐上产单细胞蛋白(SCP)的分批补料发酵过程进行研究。首先对分批发酵模式下的菌体代谢过程变化进行研究。研究发现,接种后菌体快速进入繁殖阶段,但是总糖在12 h处于耗竭状态,使得菌体量和SCP产量过早的在18 h就达到峰值。基于此,在15-L罐上建立了热带假丝酵母SG-1产SCP的分批补料发酵模式。结果表明:菌体代谢因基质的补加而得到进一步的延续,放罐时(42 h)其菌体干重和SCP产量分别达19.86 g/L和9.93 g/L,显著高于分批发酵模式的10.45 g/L和4.70 g/L。     

新型Streptomyces sp. N2代谢粗提物的抑菌活性及其水果保鲜初探

【目的】为明确新型广谱拮抗链霉菌N2的抗菌谱,开发安全高效的生物防腐剂。【方法】采用菌丝生长速率法和杯碟法,初步评价了N2粗提物对酵母菌、13种植物病原真菌、3种G+和3种G-细菌的抑菌效果。【结果】N2粗提物具有广谱、高效的拮抗特性,尤以对葡萄座腔菌、意大利青霉、烟草黑胫病菌、枯草芽孢杆菌(G+)和水稻黄单胞菌(G-)的抑制作用最为明显。通过建立毒力回归方程发现N2粗提物对辣椒疫病菌、葡萄座腔菌、西瓜枯萎病菌、棉花枯萎病菌、烟草黑胫病菌、水稻纹枯病菌、莴苣菌核病菌和稻瘟病菌的EC50分别为0.45、1.02、3.39、1.70、1.49、1.18、1.12和0.68μg·m L~(-1)。同时,离体水果的生物防效与保鲜试验的结果表明,N2粗提物中的有效抗菌物质能显著提高猕猴桃的相对防效,抑制水果表面有害病菌的生长,减缓水果的水分散失,提高水果的贮藏品质。【结论】综上可知,链霉菌N2拥有广谱拮抗特性,有望在食品保鲜领域发挥重要作用。     

核黄素产生菌阿舒假囊酵母种子培养条件研究

在摇瓶培养条件下,对核黄素产生菌阿舒假囊酵母种子的质量控制策略进行了详细研究.首先,确定以葡萄糖、蛋白胨、玉米浆、KH2PO4和MgSO4等因素为试验考察对象,采用L9(43)正交设计对阿舒假囊酵母的种子培养基进行了优化.结果表明,在原始种子培养基配方的基础上增加有机N源(蛋白胨和玉米浆)以及葡萄糖的用量,可显著提高发酵过程中核黄素的合成量,最终确定阿舒假囊酵母的种子培养基配方为:葡萄糖30 g/L、蛋白胨15 g/L、玉米浆5 g/L、KH2PO4 1.0 g/L、MgSO4 0.75 g/L.在此种子培养基配方下,摇瓶发酵所得的核黄素产量达345.68 mg/L,比原始种子培养基配方下的核黄素产量提高了43.33%.接下来,对阿舒假囊酵母种子培养过程的代谢变化情况进行考察.结果表明:种子大约在6 h以后进入旺盛的对数生长期,随着菌体量不断增大,总糖浓度迅速下降,在48 h时生物量达到最大,此时菌体干重达到5.96 g/L左右,之后种子进入衰亡期.最后对接种时机进行了考察,结果表明:在摇瓶发酵过程中,最佳的接种时机应控制在36~38 h.     

鄱阳湖区藻类丰度分布及其与环境因子的关联分析

于2012年10月至2013年7月在江西省鄱阳湖4个采样点进行了采样,并对表层水体中藻类丰度与环境因子之间的关系进行研究。结果表明,藻类丰度随季节变化差异显著(P0.05),夏季最高[(2.58±1.85)×10~6CFU/L],冬季最低[(4.3±3.2)×10~5 CFU/L],水体理化因子也随季节和采样点的不同而有很大的变化。通过相关分析和GAM分析表明,鄱阳湖藻类丰度与水温和叶绿素a呈极显著的正相关(P0.01),与氨氮、总磷呈极显著负相关(P0.01)。从总体情况看,鄱阳湖水体藻类丰度呈上升趋势,水质正在逐步恶化,需要加以关注。     

热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的发酵培养基优化

本试验以甜高粱秸秆汁为主要的发酵原料,应用二次正交旋转组合试验设计方法对热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的发酵培养基进行优化。结果显示,热带假丝酵母SG-1产单细胞蛋白的较佳发酵培养基组成为:甜高粱秸秆汁220 mL/L、工业葡萄糖37.5 g/L、工业蛋白胨37.5 g/L、MgSO4.7H2O 3.75 g/L、KH2PO43.75 g/L。该优化条件下单细胞蛋白产量达15.38 g/L,比初始发酵培养基(甜高粱秸秆汁120 mL/L、工业葡萄糖20 g/L、工业蛋白胨20 g/L、MgSO4.7H2O 2.0 g/L、KH2PO42.0 g/L)单细胞蛋白产量(10.77 g/L)提高了42.80%。     

拮抗植物病原真菌Streptomyces corchorusii AUH-1 的分离与鉴定

为了获得对植物病原真菌具有抑制作用的拮抗菌株,以西瓜枯萎病菌为指示菌,采用平板对峙试验进行植物病原真菌拮抗菌的分离筛选。从南昌、赣州、鹰潭、萍乡、武夷山、石家庄等地采集的26个不同类型土样中,分离筛选到1株对西瓜枯萎病菌具有良好抑制作用的菌株AUH-1,其抑菌率达到36.15%。根据菌体形态学观察、生理生化特征以及16S r DNA序列分析,对拮抗菌进行菌种鉴定,结果表明该菌株为黄麻链霉菌(Streptomyces corchorusii),并命名为黄麻链霉菌AUH-1。