鸭坦布苏病毒的流行现状和防疫用品的研究

正一、概述2011—2016年均发现了鸭坦布苏病毒在我国流行,是一种地方流行性疾病。在马来西亚报道过发病,泰国和越南等国也有发病。该病毒最早是1968年,Tembusu病毒首次在Sarawak地区的蚊子体内分离到;1982年和1992年在泰国北部地区蚊子体内分离到;1995年,我国研究人员从石家庄地区发病的康贝尔鸭肝和脾组织中分离到似乎属于黄病毒科的病毒。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的诊断及其分子特点

采用流行病学调查、临床症状观察、病理学检查、病毒分离、分离毒株测序以及遗传演化分析的方法,对北京及其周边地区4个猪场剖检的4头猪进行分析。结果:流行病学和临床症状表现为急性高热性传染病;病理学观察为非化脓性脑炎和间质性肺炎等多器官严重的病理变化;RT-PCR和病毒分离确定该疫情的主要病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)。与典型PRRSV感染不同的是:成年猪感染率达50%以上,病死率达80%以上;PRRSV分离株全基因序列分析表明属于PRRSV北美洲型,特别是PRRSV NSP2不连续缺失30个氨基酸,说明此次流行的PRRSV毒株可能为高致病性毒株。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株ORF6基因的克隆与原核表达研究

根据GenBank中美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF6基因序列,设计合成一对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增出PRRSV的ORF6基因(M基因)。将所扩增片段克隆入原核表达载体pET-32a(+),pET-ORF6重组质粒转化DH5a宿主菌后,经双酶切、PCR鉴定后挑选阳性克隆测序鉴定并对插入的ORF6基因序列进行分析。结果表明,ORF6基因的原核表达载体构建成功。ORF6基因推导的氨基酸与美洲型相应基因的同源性为96.0%～100%,与LV株的同源性为79.9%,系统进化树表明该PRRSV属于美洲型。将构建成功的重组质粒pET-ORF6转化BL21,诱导后经SDS-PAGE和Western-blot分析表明:克隆在HIS标签的膜基质蛋白基因与HIS获得了高效表达,表达的融合蛋白HIS-M分子量约为39kDa,并且有免疫学反应活性。     

鸡传染性腺胃炎病原的分离鉴定

河北省某个体户蛋用种鸡场连续孵化出的７批海赛商品雏鸡共６万余只，在３０－８０日龄时发生一种以极度消瘦、腺胃肿大为特征的疾病。采集发病鸡的腺胃进行病原分离鉴定，从中分离出传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）。将发病鸡的腺胃匀乳剂及第５代鸡胚分离物接种ＳＰＦ鸡，结果用鸡腺胃匀尔剂接种的了与自然病鸡盯同的临床症状，而用第５代鸡胚分离物接种的鸡未能复制出胃肿大病例。取各接种绥鸡血清进行了１７种相关病原抗体检测，结     

一株犬细小病毒的分离及VP2基因序列分析

采集病犬的粪便,经处理后接种狗肾传代细胞系（MDCK）,培养96h无任何细胞病变,盲传到第3代时细胞系出现明显的细胞脱落,核圆缩,形成CPE（cytopathic effect）。继续传代到第7代。第1、2代的细胞培养物不能凝集猪的红细胞,第3代以后的细胞培养物可以凝集猪的红细胞。采用PCR技术,在各代次的培养物中均能扩增得到特异性的DNA片断,经序列测定后鉴定为犬细小病毒,定名为BJY06。为进一步研究该分离株的遗传演化情况,扩增得到了VP2基因的全序列。经序列测定,用DANStar软件分析表明BJY06毒株为CPV-2a亚型,所得到的VP2基因全长1755bp,含有完整的阅读框架,编码584个氨基酸。与其它亚型的毒株相比较核苷酸的同源性为98.3%～99.6%。氨基酸同源性为97.1%～100%。     

鸡传染性喉气管炎的病理学研究

本研究对１４ 周龄的４２ 只 Ｓ Ｐ Ｆ鸡经气囊感染鸡喉气管炎病毒，通过病理组织学和扫描电镜检查，对不同感染阶段试验鸡进行研究。试验结果表明：感染后１２ｈ 气管粘膜淋巴细胞开始增生，以后逐渐增多，在８～９ ｄ 时逐渐减少，１２ ｄ 时基本降到原有水平；感染后２４ ｄ 气管粘膜上皮细胞开始形成合体细胞，３～４ ｄ 时普遍转变为合体细胞，并坏死脱落，６～７ ｄ 时出现再生，１２ ｄ 时基本恢复原有结构；腺体细胞在感染后坏死最早最严重，腺体细胞也是包涵体形成最早的细胞；在感染１２ ｄ时，气管粘膜上皮细胞纤毛项端开始融合并缩短，随后融合加剧，最终变成颗粒状或断裂脱落，上皮细胞表面裸露。除气管的病变外，肺脏发生支气管炎及出现核内包涵体，脾脏淋巴细胞，巨噬细胞增生及坏死，胸腺和法氏囊淋巴细胞增生及轻度坏死等变化。     

2010—2013年我国鸡传染性支气管炎病毒分离株S1基因分子特性分析

为掌握近年来我国传染性支气管炎病毒的流行动态和变化规律,利用检测转化至克隆载体鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列,应用MEGA5分析软件进行聚类分析,并对瑞普生物疫病诊断研究服务中心2010—2013年间从我国野外分离并测定的30株传染性支气管炎的S1基因序列与常用疫苗毒株和GenBank中代表性IBV毒株的对应基因序列进行比较,结果发现:1)30株野外分离株可分为2个基因型:LX4型和TW型,分别占总数的93.3%和6.7%;2)LX4型分离株S1基因和氨基酸序列与常见疫苗毒株序列差别很大,同源性仅分别为77.6%~86.3%和75.8%~85.7%;3)分析S基因裂解位点时发现同一基因型毒株的裂解位点氨基酸序列高度趋同,且型间差异性较大。可见,近年来我国主要IBV分离株属于LX4型,并且彼此间亲缘关系较近,与我国现用传染性支气管炎主要弱毒疫苗和国外参考株属于不同的基因型,这可能是导致疫苗免疫失败,传染性支气管炎(IB)在鸡群中爆发的主要原因。该研究结果为筛选针对我国目前流行IBV毒株的疫苗株提供参考。     

蛋鸡大肠杆菌病的诊治

北京市通州区某蛋鸡场的部分产蛋鸡 30 0日龄时突然出现以一侧眼睛失明、头面部肿胀、拉绿色稀便、低发病率、高死亡率为主要特征的疾病。经细菌培养、生化鉴定和回鸡试验证明该病是由 O119血清型大肠杆菌引起。1　发病情况和大体病变发病鸡场共饲养 3批不同日龄的海赛克斯产蛋鸡群、鸡群的日龄分别为 1 60、30 0、450天左右 ,每批2 0 0 0只左右。 2 0 0 0年 1月初 ,30 0日龄左右的鸡群开始陆续发病 ,发病鸡的临床表现为病鸡头面部肿胀 ,眼睑肿胀 ,眼睛失明 ,拉绿色稀便 ,采食量降低。发病鸡发病率、死亡率逐渐增高 ,发病后第 4天 ,死亡率…     

肉用仔鸡新城疫的诊断及免疫试验观察

20 0 1年 6～ 7月份 ,北京市延庆县某肉鸡场饲养的艾维茵商品代肉用仔鸡发生了一起以呼吸道症状、拉绿色稀便 ,后期出现神经症状为特征的疾病 ,鸡群死亡率高达 5 0 %以上。经临床及实验室诊断 ,此次发病是由ＮＤＶ强毒所致。采用现场分离的ＮＤＶ强毒株制成灭活疫苗 ,免疫肉仔鸡 ,免疫后鸡群无任何不良反应 ,整个饲养期生长正常。1　发病情况及临床症状该鸡场共饲养 92 0 0只艾维茵商品代肉仔鸡 ,分别放在 5栋鸡舍内。最北边两栋鸡舍先开始发病 (第四栋和第五栋 ,共 380 0只 )。从 2 1日龄起 ,这两栋鸡舍的部分鸡只出现呼吸道症状 ,拉绿色稀…     

H5亚型禽流感疫苗对特禽及水禽的免疫效果观察

用H5N2亚型禽流感疫苗,分别免疫SPF鸡、乌鸡、珍珠鸡、贵妃鸡、火鸡、鸭及鹅,免疫后采血测定其HI抗体,观察我国现有的H5N2亚型禽流感疫苗对特禽及水禽的免疫效力.结果,免疫后3周,SPF鸡、乌鸡、珍珠鸡、贵妃鸡、火鸡、鸭及鹅的平均HI抗体滴度分别为2 7.2、2 7.6、2 4.3、2 4.83、2 4.6、2 6.2及2 5.3,乌鸡两次免疫,其中一次HI抗体为2 9.65.试验证明,SPF鸡、特禽及水禽用H5N2亚型禽流感疫苗免疫后,均能产生一定水平的HI抗体,但不同种类的家禽所产生的HI抗体滴度存在较大差异,以SPF鸡及乌鸡所产生的HI抗体滴度最高,而珍珠鸡、贵妃鸡及火鸡所产生的HI抗体滴度较低,水禽对H5N2亚型禽流感疫苗可产生一定水平的HI抗体.