适温条件下盐度对海刺猬活力、摄食和存活的影响

海刺猬(Glyptocidaris crenularis)是海胆中经济价值较高的一种,因其性腺品质较高,具有很大的市场潜力。然而,其生长发育却极易受到环境因素的影响,这也就制约了海刺猬人工养殖的开展。在适温(18.5~23.6℃)条件下,对41‰、38‰、35‰、32‰、29‰、26‰、23‰、20‰、17‰九个盐度下,海刺猬的活力、摄食和存活状况进行了初步的观察和分析。实验结果表明,盐度会对海刺猬的活力、摄食和存活产生影响。在盐度为29‰、32‰、35‰组中海刺猬的状态良好,活力较强;盐度过高或过低,都会抑制海刺猬的摄食。而在出现死亡的各组中,高盐度组(38‰、41‰)出现死亡现象的时间早于低盐组(17‰),同时其存活率低于低盐组。因此,相对于高盐度来说,海刺猬具有一定的低盐耐受力。研究表明,在适温(18.5~23.6℃)条件下,海刺猬的最适盐度为29‰~32‰。     

5种经济海胆线粒体16SrRNA基因片段的序列分析

对光棘球海胆、中间球海胆、马粪海胆,海刺猬和紫海胆线粒体DNA 16SrRNA基因片段进行了PCR扩增和测序,得到395 bp的可信片段。通过ClustalX 1.83和Mega 3.0软件对所得线粒体16SrRNA片段序列进行比较,共检测到118个碱基变异,其中简约信息位点为33个。应用Mega 3.0计算各种间的相对遗传距离,以糙海参为外类群,得到NJ系统树和MP系统树,系统树各分支的置信度由“Bootstrap”1000次循环检验。结果表明,马粪海胆与光棘球海胆的亲缘关系较近,其次为中间球海胆,而紫海胆、海刺猬与这3种海胆的关系相对较远。     

遮蔽行为对海刺猬摄食、生长和性腺性状的影响

海胆遮蔽行为对于海胆的生长和发育的影响目前还不清楚,在实验室条件下,研究了遮蔽行为对海刺猬(Glyptocidaris crenularis)摄食、生长和性腺性状的影响.实验设两个对照组和一个处理组:对照组为无任何遮蔽条件的空白组和以堆积砖块创造的黑暗空间来满足海胆的掩蔽行为的掩蔽组,遮蔽组则以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)的贝壳作为遮蔽物来满足海胆的遮蔽行为.结果显示:遮蔽组的海胆周摄食量要显著大于掩蔽组(P＜O.05),而空白组与遮蔽组和掩蔽组之间的差异不显著(P＞0.05);各组海胆的存活率没有显著差异(P＞0.05);空白组和遮蔽组海胆的壳径、壳高、体重要显著大于掩蔽组(P＜0.05),而空白组和遮蔽组之间没有显著性的差异(P＞0.05);空白组和遮蔽组的性腺湿重、性腺干重、性腺指数、壳湿重、壳干重、亚氏提灯湿重、亚氏提灯干重要显著大于掩蔽组(P＜0.05),而空白组和遮蔽组之间没有显著性的差异(P＞0.05);空白组的提灯指数要显著小于遮蔽组和掩蔽组(P＜0.05),而遮蔽组和掩蔽组之间没有显著的差异(P＞0.05).结果证明,遮蔽和掩蔽行为对海刺猬生长及发育的影响是有差别的,掩蔽行为对海刺猬的生长与发育造成了负面影响,而遮蔽行为在一定的生活环境条件下不会对其生长造成影响.研究表明,海刺猬的遮蔽行为反映了其对外界不利环境条件的一种适应性,且这种行为对其生长和发育的影响与掩蔽行为有所不同.至于海刺猬遮蔽行为的进化选择压力,目前的研究还不足以下定论,需要进一步深入的研究.     

海刺猬体腔液凝集素的纯化、性质及其色氨酸的化学修饰

通过DEAE-纤维素52离子交换层析、Sephadex G-200凝胶层析,从海刺猬体腔液中分离纯化海刺猬Glyptocidaris crenularis凝集素(简称为GCL),并对其部分性质和色氨酸的化学修饰进行了研究.结果表明:在还原与非还原SDS - PAGE上,GCL都显示单一蛋白质条带,其相对分子量为94462; GCL对人O型、兔、鸡、狗红细胞均具有血凝活性,对兔和狗红细胞的血凝活性最强,但对人A、B、AB型及鲫红细胞无血凝活性;GCL血凝活性在温度为4～33℃时最高,经36℃热处理10 min后,GCL对兔红细胞的血凝活性保留25％,经48℃加热10 min后,其血凝活性完全丧失;GCL血凝活性在pH为7.5 ～8.5时最高;ca2+对GCL血凝活性无抑制作用,EDTA和Mg2+对其血凝活性有抑制作用;GCL血凝活性不被所测试的α-乳糖、D-果糖、D-半乳糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和γ-球蛋白所抑制,但被蔗糖和麦芽糖所抑制,最小抑制浓度分别为40 mmol/L和20 mmol/L;用N-溴代丁二酰亚胺(NBS)对GCL分子中的色氨酸(Trp)残基进行化学修饰,有5.1个Trp残基被修饰,修饰后其血凝活性丧失75％,表明Trp残基是GCL血凝活性的重要组成部分.     

四种海胆杂交的可行性及子代的早期发育

报道了中国北部沿海马粪海胆、海刺猬、光棘球海胆三种主要海胆与引自日本的中间球海胆四种海胆之间的不同组合的杂交试验及其子代浮游幼体及幼海胆的早期生长发育.结果表明,采用生殖调控可使不同海胆达到同步繁殖,在8～24℃下各种海胆杂交组合的受精率与亲本亲缘关系有关,同时受到双亲繁殖适宜温度的影响,受精率介于0～69.6%之间,均低于自交组.以马粪海胆和海刺猬为亲本的正反交、以马粪海胆和中间球海胆为亲本的正反交以及马粪海胆()×光棘球海胆()各组杂交胚胎均可发育至四腕幼虫,但畸形率较高,浮游时间比自交组延长3～10d,在其中的3个杂交组得到了幼海胆,经过14个月的室内培育,杂交组成活率低于自交组,壳直径达2.59～2.88cin.     

不同实验生态环境对海刺猬遮蔽行为的影响

研究了较长时间生活在3种不同实验遮蔽条件下海刺猬(Glyptocidaris crenularis)的遮蔽行为特点.结果表明:不同生活环境下海刺猬都保持着遮蔽行为.生活在以贝壳作为遮蔽材料环境下(遮蔽组)和以砖块作为掩蔽材料环境下(掩蔽组)的海刺猬初次遮蔽耗时要显著短于生活在无遮蔽(或掩蔽)材料环境下(空白组)的海刺猬(N=3,P＜0.05).3组海刺猬用于遮蔽的贝壳总数和有遮蔽行为的海刺猬总数都呈现先增加后趋于平稳的趋势.掩蔽组有遮蔽行为的海刺猬总数要显著多于遮蔽组和空白组(P＜0.05),后两者差异不显著.3组海刺猬用于遮蔽的贝壳总数差异不显著(P＞0.05).海刺猬遮蔽时对两种贝壳(菲律宾蛤仔和贻贝)存在显著的选择差异(P＜0.05).生活环境中一段时间内遮蔽物的缺失并不会使其失去这种行为,但是会在一定程度上影响该行为的强度.因此,光照很可能是海刺猬遮蔽行为的一个进化压力,该行为也许只是作为一种避光策略.海刺猬对遮蔽材料具有显著的选择性,这可能与遮蔽材料自身特征和海刺猬的生理状态相关.     

海刺猬和中间球海胆性腺的组织学和组织化学

对海刺猬Glyptocidaris crerularis和中间球海胆Stronylocentrotus intermedius性腺的组织学和组织化学进行了比较研究。结果表明,两者性腺结构均为滤泡型,滤泡由生殖细胞和营养细胞组成,随着生殖细胞的发育成熟,营养细胞中颗粒逐渐减少,当生殖细胞排放后,营养颗粒的数量逐渐增加,且中间球海胆的营养颗粒数量较海刺猬多。观察和分析了海刺猬和中间球海胆的雌、雄生殖细胞、营养颗粒、滤泡细胞的DNA、RNA、多糖、蛋白质和结合脂类的分布、数量及其变化,发现中间球海胆滤泡中营养颗粒的多糖和蛋白质含量比海刺猬高,其它指标两者都很相近。     

三苯基锡和三丁基锡对海胆的急性毒性研究

采用发育生物学和生态毒理学的模式生物海胆检测两种典型的有机锡化合物三苯基锡(TPT)和三丁基锡(TBT)对水生生物的急性毒性,同时对上述物质对海胆的安全性进行初步评估,以期为有机锡的防控提供基础数据。半静水条件下,通过概率单位法(Bliss)得到TPT和TBT对黄海胆24h,48h,72h,96h的LC50,分别为:25.007、18.743、9.514、6.662μg·L-1和19.850、15.986、7.888、4.916μg·L-1,并计算TPT和TBT对海胆的安全浓度分别为0.666和0.492μg·L-1。结果发现,TPT和TBT对黄海胆均表现为剧毒作用,TBT毒性大于TPT。海胆对上述毒物具有很高的敏感性,结果稳定,重现性好,建议将海胆作为海洋环境中有机锡污染的监测生物。     

三种海胆性腺总脂的脂肪酸组成的研究

本文采用了ＦＦＡＰ石英毛细和气相色谱柱，对光棘球海胆，虾夷马粪海胆及海刺猬的性腺中总脂的脂肪酸组成进行了研究。结果表明这几种海胆含有四十种以上的脂肪酸，分布十分相似。主要的ＨＵＦＡ为１８：４ｎ－３（３．２％－７．４），２０：４ｎ－６（６．４％－１６．７％）及２０：５ｎ－３（６．６％－１２．１％），并含有非常罕见的ｎ－５及ｎ－７烯酸。