南京及周边地区猪伪狂犬病病毒野毒感染的抗体调查

应用美国IDEXX生产的伪狂犬病毒gE诊断试剂盒,检测了南京市及安徽省滁州市、马鞍山市、芜湖市在2018年~2019年间送检的683份血清样品,并对不同地区、不同年龄阶段的猪血清学结果数据进行统计学分析。结果显示,在这次调查中,各地均存在猪伪狂犬病毒(PRV)感染,场阳性率为82.35%(28/34),样品阳性率为40.26%(275/683),不同日龄感染PRV的阳性率也不同,高低依次为生产母猪>育肥猪>保育猪>哺乳仔猪。     

保育猪伪狂犬病的防控

保育猪伪狂犬病对猪的危害性非常大,而且具有流行性和传染性,一旦一头猪染病,可能会大面积传染,因此必须要做好保育猪伪狂犬病的防控工作.     

猪伪狂犬病的发病原因、临床症状、实验室诊断与防控

猪伪狂犬病是由于感染疱疹病毒而导致的一种传染性疾病,全年任何季节都能够发生,但在气候寒冷的冬春季节和产仔旺季较为多发。该病会导致哺乳仔猪发生病毒血症以及神经系统疾病,从而大批量死亡;妊娠母猪感染后会发生繁殖障碍,如流产、死产等;中大型猪感染后会发生肺炎,并影响生长发育。该病在世界范围内都能够发生,且是严重影响我国养猪行业健康发展的一种主要疾病,严重损害养猪业的经济效益。     

安徽省猪伪狂犬病毒的分离鉴定及其主要毒力基因分子特征

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)引起的一种急性、热性传染病。自2011年底以来,PRV发生了变异,传统的PRV弱毒疫苗已不能对PRV变异株提供完全保护,这给我国PR防控带来了巨大挑战。为了解安徽省PRV流行特征及其主要毒力基因遗传变异情况。利用PCR技术、细胞接种试验、电子显微镜观察、间接免疫荧光试验及兔体接种试验等方法,对安徽省临诊病例中疑似PRV感染的病猪进行病原检测及PRV分离鉴定,并通过设计6对特异性引物对PRV分离株主要毒力基因(gE、gI、TK、gB、gC、gD)进行克隆及测序分析。2016—2018年安徽省临诊病例中共分离鉴定15株PRV;PRV分离株主要毒力基因序列均与2011年后国内PRV变异株同源性较高;与2011年前国内PRV经典株序列比对,PRV分离株gE、gB、gC及gD基因存在多个位点的一致性替换、插入或缺失,且gE、gC基因多位点突变位于其重要的抗原表位区。本研究分离的15株PRV均为变异株,变异株已成为安徽省主要的流行毒株。15株PRV分离株的gI、TK基因序列较为保守,而gE、gC蛋白抗原表位区域氨基酸的突变可能导致其毒力及抗原性发生改变。部分PRV分离株与邻近地区PRV序列同源性均为100%,可能与频繁跨省调运生猪、跨区引种等原因有关。     

猪源伪狂犬病病毒AH02LA株糖蛋白的基因序列测定与对比分析

为了分析猪源伪狂犬病病毒AH02LA株糖蛋白的基因序列特征,本研究设计了17对特异性引物,通过PCR扩增AH02LA株的11个糖蛋白基因并进行序列测定,然后将其与PRV变异株(TJ株与HeN1株)和PRV经典株(Bartha株与Kaplan株)作比对分析。结果:成功扩增了11个糖蛋白基因序列,序列比对发现,AH02LA株的gB、gD、gG、gK和gM基因与PRV变异株的同源性为100%,而与PRV经典株的同源性为98%~99%;AH02LA株的gC、gE和gI基因与PRV变异株的同源性为99%,而与经典株的同源性为95%~97%,而且AH02LA株的gB、gC、gD、gE、gI和gN基因的插入或缺失也与变异株完全一致。研究表明,AH02LA株的主要糖蛋白基因序列与变异株高度同源,该毒株是一株典型的变异株。     

鸭鹅伪结核病的分析诊断和防治方案

伪结核病是由伪结核耶尔森菌引起的一种接触性传染病。其特征性病变为多个器官中形成类似结核病的干酪样结节。伪结核病广泛分布于世界各地,其易感动物以家兔、鼠等啮齿动物为主,哺乳动物和禽类也可感染。虽然鸭鹅伪结核病发生较少,但也有报道。北京某麻鸭养殖场曾暴发本病,发病率为22.70%,死亡率为13.60%。需要养殖者给予一定重视。本文从病原、流行病学、临床症状、病理变化、诊断和鉴别、预防措施和治疗方法等方面对鸭鹅伪结核病进行了介绍。     

近段时间猪场病毒性腹泻案例分享与总结

非洲猪瘟的侵袭导致很多猪场母猪来源偏杂,容易诱发猪病。虽然猪场非常重视生物安全,但是仍然造成局部地区性流行。笔者分享了工作中接触的典型的案例,供读者参考,希望对读者有所启发。从2018年8月国内发生非洲猪瘟以来,由于疫情原因造成很多母猪淘汰,不少猪场由于引种困难,采购大量三元母猪,或者来源广泛的二元种猪,造成不少猪场防控非洲猪瘟、猪蓝耳病、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪伪狂犬病压力大大增加。     

猪伪狂犬病毒gE蛋白的酵母表达及其单克隆抗体的筛选

为获得具有生物学活性的猪伪狂犬病毒(PRV)gE蛋白及其特异性单克隆抗体,利用电转技术将pPICZαA-gE重组质粒转入毕赤酵母X-33并筛选出阳性克隆,通过SDS-PAGE、Western blot鉴定筛选出PRV gE蛋白表达菌株。通过诱导表达获得gE分泌蛋白,并利用Ni柱进行纯化,应用Western blot、Dot blot、ELISA方法对纯化蛋白进行活性鉴定。同时将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,细胞融合后通过免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选单克隆抗体,并对单克隆抗体进行了反应性测定、效价测定及亚型鉴定。结果显示,PRV gE蛋白在毕赤酵母中成功表达,并获得了纯化蛋白,纯度达90%以上,且具有良好的生物学活性,与PRV阳性血清反应性良好;筛选到4株敏感性强、特异性良好的gE单克隆抗体,均可同时特异识别PRV gE蛋白及病毒,分别命名为2F10、4C10、9E1、10C3。综上,用酵母系统成功表达了PRV gE蛋白,并筛选到4株针对PRV gE蛋白的单克隆抗体。     

一起猪伪狂犬、猪瘟、传染性胸膜肺炎混合感染的诊断与防制

2018年12月10日,我市安阳县某养猪场发生以呼吸道症状、腹泻及死亡为主要临床特征的急性传染病。经临床调查、剖检和实验室病原学诊断,确诊为猪伪狂犬病与猪瘟、传染性胸膜肺炎混合感染。通过加强饲养管理、改善硬件设施、紧急预防接种和对症治疗,该病得到了有效控制。