不同条件对ND、EDS—76病毒血凝性影响的观察

分别观察了不同稀释液、不同感作温度、不同红细胞浓度及不同感作时间对ND、EDS－76病毒HA效价、血凝特性及血凝解脱现象的影响。结果表明，在进行HA试验时，以PH7．2的PBS液为稀释液、0．5％鸡红细胞为指示系统、在37℃下感作20min或室温下感作30min为最适试验条件。各样品在0．5％红细胞下测得的HA效价比0．8％红细胞时平均高0．25－0．5个滴度，其它情况下测得的HA效价基本相同，但红细胞的凝集状态及观察结果的时间有所不同。其中，感作温度越高（37℃），出现结果越早，且凝集现象越明显，但解脱作用发生得也越快。ND病毒所引起的血凝现象仅可持续2h左右，而EDS－76病毒引起的血凝现象可持续至24h不发生解脱，这一特性可作为鉴别2种病毒的1个指标。     

ND─EDS二联油乳剂灭活苗的研制

用鸡新城疫（ＮＤ）克隆３０毒株接种鸡胚，鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ）ＢＨ９１毒株接种鸭胚，分别收获ＮＤ鸡胚尿囊液毒和ＥＤＳ鸭胚尿囊液毒，用福尔马林灭活，二者混合后，加入１０号白油油相中，制成ＮＤ─ＥＤＳ二联油乳剂灭活苗。该苗接种在产前母鸡，可使接种鸡获得对ＮＤ和ＥＤＳ强毒攻击坚强的抵抗力。该苗安全、稳定，４℃保存期至少可达１２个月以上，适用于基层推广使用。     

鸡新城疫——减蛋综合征二联油佐剂疫苗的研制

应用鸡新城疫（ＮＤ）ＬａＳｏｔａ株和减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）ＬＡ３株,分别接种鸡胚和鸭胚增殖病毒,血凝价分别达≥１：１２８０和≥１：１００００时,收取病毒,经福尔马林灭活,按一定比例加入吐温－８０、油佐剂制成ＮＤ－ＥＤＳ－７６二联疫苗,经无菌检验、安全性试验、剂量选择、保护性试验、免疫效果和免疫期测定及保存期观察,结果表明：该二联苗安全性好,于蛋鸡开产前１月皮下注射１ｍＬ／只,２５ｄ后ＮＤ和ＥＤＳ－７６抗体可先后达到高峰,免疫期１年。保存期４℃为１年,２０℃为３个月。     

鸡新城疫和减蛋综合征异源二联灭活疫苗研究

将鸭源新城疫（ＮＤ）病毒Ｄ＿（１０）株和减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）病毒ＧＣ＿２株于同一鸭胚同时增殖，用甲醛灭活后加入１０号白油制成ＮＤ和ＥＤＳ－７６异源二联灭活疫苗，简化了生产工艺，降低了成本，克服了鸡胚苗潜伏带毒的危险。经２０余万只鸡试用，表明该疫苗可有效预防ＮＤ和ＤＥＳ－７６。     

鸡新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征三联油乳剂苗的研制及应用

用新城疫病毒（克隆H88株。）、传染性支气管炎病毒（JP株和H52株）和减蛋综合征病毒（H91株）分别接种于鸡胚和鸭胚,并收取其含毒鸡、鸭胚尿囊液,用一定浓度甲醛溶液灭活,按一定比例混匀,以7号白油为佐剂制成鸡新城疫（ND）－传染性支气管炎（IB）－减蛋综合征（EDS76）三联油乳剂灭活苗（三联苗）。三联苗免疫30日龄雏鸡,免疫后7天产生免疫应答,免疫后21天保护率达100％。疫苗在4℃～8℃保存期为12个月,10℃～25℃保存期为6月,该疫苗在全省不同地区鸡群应用400余万羽份,取得满意效果。     

检测EDS76病毒抗体Dot—ELISA方法建立的及应用

建立了检测ＥＤＳ７６病毒抗体Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法。待检血清最适稀释度为１∶１０,ＥＤＳ７６病毒ＤＥＦ细胞培养物最佳工作浓度为１∶５,ＨＲＰ－ＭｃＡｂ工作浓度为１∶４００。所建方法与常见几种鸡的传染病血清无交叉反应,１２０份临床样本中检出６６份阳性。     

鸡产蛋下降综合症(EDS—76)灭活油乳剂苗的研究 Ⅰ.灭活油乳剂苗的制备

在本试验中,司本-80和硬脂酸铝加入油相,吐温-80加入灭活的EDS-76尿囊毒为水相制备成油乳剂苗。福尔马林灭活病毒制备的疫苗其免疫效果高于热灭活病毒制备的疫苗,免疫后三周,前者的HI抗体水平达9.5log_2,而后者仅为4.0log_2.福尔马林灭活病毒制备的疫苗于腹腔、皮下注射小白鼠、豚鼠、兔子和10倍剂量接种产蛋鸡,结果均无不良反应;该疫苗为完全油包水剂型、不导电,滴于冷水表面不扩散,亲水亲油平衡值(HLB)为6.67;镜下所见疫苗颗粒为0.5μ直径大小。4℃存放6个月稳定,有效期至少6个月。     

利用Cre/lox特异位点重组系统获得无选择标记转AtMYB12基因的马铃薯

类黄酮是植物产生的一类次级代谢产物的总称,长期食用含类黄酮的果实和蔬菜有易于人体健康,目前广泛种植的马铃薯品种中仅含有痕量的类黄酮。AtMYB12是拟南芥中鉴定的调控类黄酮生物合成的特异性转录因子,并在烟草和番茄中得到了功能验证。为了增加马铃薯中类黄酮的含量,本研究构建pX6-patatin：：AtMYB12无选择标记...     

拟南芥转录因子AtMYB73转录活性区域分析及互作蛋白的筛选

【目的】确定拟南芥抗逆转录因子AtMYB73的转录活性区域并筛选获得与其互作的蛋白,为进一步阐明AtMYB73调控拟南芥抗逆的分子机制奠定基础。【方法】构建转录因子AtMYB73的酵母诱饵表达载体pAS1-AtMYB73,检测pAS1-AtMYB73的自激活性及其对酵母Y190的细胞毒性。克隆AtMYB73的N端区域（含有R2R3结构域）和C端区域（不含R2R3结构域）,检测AtMYB73的N端和C端的转录激活活性,分析AtMYB73自激活结构域的位置。利用酵母双杂交技术,以AtMYB73为诱饵筛选拟南芥的cDNA文库,将阳性克隆进行鉴定、测序;利用TAIR数据库对筛选获得的AtMYB73的候选互作蛋白进行分析。构建AtMYB73和F12F1.4的酵母双杂交载体pGBDT7-AtMYB73和pGADT7-F12F1.4,通过酵母双杂交技术,对其互作关系进行分析。【结果】含pAS1-MYB73的酵母菌在不同浓度的3-AT的SD/-His/-Trp/、SD/-Ade/-Trp培养基上均能生长,表明AtMYB73具有较高的自激活活性。含pAS1-AtMYB73的酵母菌在SD/-Trp/Amp液体培养基中培养24 h的OD₆₀₀值大于0.8,表明诱饵载体对酵母Y190没有细胞毒性。成功构建了pAS1-AtMYB73-N和pAS1-AtMYB73-C载体,获得了含有pAS1-AtMYB73-N和pAS1-AtMYB73-C的酵母;含pAS1-AtMYB73-N的酵母在含X-a-gal的YPAD培养基上呈现无色,而含pAS1-AtMYB73-C的酵母则呈现蓝色,表明AtMYB73的C端有明显的自激活性,而N端没有自激活性。以AtMYB73为诱饵,筛选拟南芥的cDNA文库,获得了与光合作用、防御反应途径、抗逆等相关的8个蛋白。利用酵母双杂交技术,确定了MYB73与F12F1.4之间存在一定的互作。【结论】拟南芥抗逆转录因子AtMYB73具有较高的转录激活活性,其活性区域位于C端;以AtMYB73为诱饵,筛选获得了与光合作用、防御反应途径、抗逆等相关的8个AtMYB73的候选互作蛋白;利用酵母双杂交技术,确定了AtMYB73与F12F1.4之间的互作关系。     

鸡减蛋综合症油乳剂灭活疫苗的免疫效果观察

将试验鸡分成3组,第一组、第二组和第三组鸡分别接种鸡减蛋综合症油乳剂灭活苗1ml、 1．5ml和2ml。接种疫苗后3、4、5、6、7、9、11、13、15d采取各组鸡血,检测HI抗体。接种2ml油乳剂灭 活苗的组鸡HI抗体效价上升快,效价高,但下降也非常快,较适合于紧急接种。1ml和1．5ml油乳剂 灭活苗接种鸡HI抗体效价上升较慢,产生免疫力的时间较迟,但维持高抗体水平的时间较长,适于 预防接种。