亚硝基谷胱甘肽还原酶 GSNOR1正调控植物对疫霉菌的抗性

疫霉属（ Phytophthora）卵菌引致马铃薯晚疫病等作物灾难性病害，严重威胁作物的可持续生产。由于病菌毒性变异，导致品种抗病性丧失问题突出。因此，挖掘植物广谱和持久抗病基因，并探索其在抗病育种中的有效利用具有重要的科学意义。亚硝基谷胱甘肽还原酶1（GSNOR1）是植物氮信号通路中高度保守的关键还原酶，其参与调节r基因介导的植物抗性和非寄主抗性。然而， GSNOR1参与抗疫霉菌的免疫功能和作用机理尚不清楚。本研究中，借助拟南芥与寄生疫霉菌互作的模式体系，首先发现拟南芥T-DNA插入突变体 gsnor1-3对寄生疫霉菌呈现感病表型。进一步利用病毒诱导的基因沉默（VIGS）降低烟草叶片中 GSNOR1同源基因的表达量，在此基础上，通过抗病表型分析以及一系列抗性相关功能的检测，结果表明，沉默本氏烟草 GSNOR1同源基因能够在寄生疫霉菌侵染植物的过程中削弱植物体内的活性氧（ROS）迸发、病程相关基因（PR genes）的诱导表达以及MAPK信号转导，从而增强了植物对疫霉菌的感病性。本研究揭示了植物 GSNOR1对疫霉菌具有高度保守的抗性功能，并初步解析了 GSNOR1正调控植物抗疫霉菌的作用机理，为进一步探索 GSNOR1在马铃薯抗晚疫病中的功能及其在抗病育种中的有效利用奠定了重要的理论 基础。     

余甘子对强致癌物N-亚硝基化合物在人体内合成的阻断作用

本文采用Ohshima的方法,以尿中N-亚硝基脯氨酸(NPRO)量为指标,研究了余甘子果汁阻断人体内N-亚硝基化合物(NNC)的合成。12名志愿者摄入L-脯氨酸500 mg和硝酸钠300 mg后,尿中NPRO的量平均为75.10 nmol,而当摄入上述两种药物的同时,分别给予同浓度的抗坏血酸和余甘子果汁后,尿中NPRO的含量则分别降为41.08 nmol和20.79nmol,且后者此本底值(25.55 nmol)还低。表明在本实验条件下,摄入含抗坏血酸75mg的余甘子果汁13ml,即能完全阻断500mg L-脯氨酸和300mg硝酸钠在人体内所引起的NPRO的合成。同时也证明,余甘子果汁能有效地阻断人体内NNC的合成。     

亚硝基血红蛋白制备的研究

为了获得猪屠宰血血红蛋白与亚硝酸钠反应合成亚硝基血红蛋白（HbNO）的最佳工艺条件，本实验拟从血红蛋白与亚硝酸钠反应合成亚硝基血红蛋白（HbNO）的角度进行正交试验，并讨论了合成工艺过程中相关因素的影响。研究结果认为：亚硝基血红蛋白（HbNO）合成的最佳工艺参数为pH6.2，温度90℃，反应时间20分钟，亚硝酸钠添加量为0.4%。然后经真空冷冻干燥制得成品。     

抗福美双假单胞菌株的NTG化学诱变及分子探针鉴定

利用微生物的抗药性筛选抗福美双的假单胞菌株Ｔ４６，然后通过亚硝基胍（ＮＴＧ）化学诱变获得了对福美双敏感的三株突变株Ｔ４６Ｎ１０、Ｔ４６Ｎ７和Ｔ４６Ｎ１７。利用这三个突变株作受体，通过基因克隆的方法筛选到了可使三个突变株恢复抗性的克隆，抗性基因分别被定位在７ｋｂ、２．５ｋｂ和２０ｋｂ的ＥｃｏＲⅠ片段上。将这三个克隆分别用（３２）Ｐ标记后制成分子探针，然后分别与三个突变菌株的总ＤＮＡ进行ＤＮＡ－ＤＮＡ分子杂交，结果表明，各突变株均存在与菌株Ｔ４６的抗福美双基因克隆的高度同源性，经结合形态、生理生化等分析后证实这三株突变株均源自于出发菌株Ｔ４６。     

亚硝基胍诱变选育L-苏氨酸高产菌的研究

为筛选出L-苏氨酸的高产菌,以谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glu anicum)为出发菌,进行亚硝基胍(NTG)诱变处理选育试验.结果表明:筛选出蛋氨酸+赖氨酸+异亮氨酸缺陷型菌株Y-1(Met-+Lys-+Iso-),经摇瓶发酵72 h后,L-苏氨酸积累可达4.14 g/L.     

GSN0对E.tenella内LDH、G-6-PD、ACO和SOD活性的影响

亚硝基谷胱甘肽(GSNO)对鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊的孢子生殖具有不可逆地抑制作用,但其作用机理尚不清楚.本研究采用聚丙烯酰胺凝胶电泳来分析GSNO对E.tenella卵囊内与糖代谢有关的乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)、乌头酸酶(ACO)以及GSNO对卵囊内与抗氧化有关的超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,电泳后经特异染色显示酶活性.结果表明:GSNO处理的未孢子化与孢子化卵囊中均有LDH、G-6-PD、ACO及SOD活性,这提示外源性NO对球虫孢子生殖的抑制并没有灭活卵囊中LDH、G-6-PD、ACO和SOD的活性或NO对这些酶的作用是可逆的.     

“百花山”净水宝与水产养殖

“百花山”净水宝(水质调理微生态制剂)是由有益的芽孢杆菌制成的活菌生物制剂。能够有效降解水中氨氮、亚硝基氮，分解硫化氢；消除有机物、腐殖质，净化水体；增加水体中和鱼、虾、蟹、蚌体内有益菌群，抑制有害细菌生长，增加鱼、虾、蟹、蚌等水产品的抗病能力，预防鱼病发生；稳定水体pH值和水中溶解氧。     

厄贝沙坦及其复方制剂中痕量杂质N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸残留方法学研究

采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)建立厄贝沙坦及其复方制剂中N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸(NMBA)的测定方法。采用Waters ACQUITY UPLC○RHSS T3色谱柱进行分离,以0.005 mol/L甲酸铵(用甲酸调pH值至3.0)为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,质谱检测器,流速为0.3 mL/min。结果显示NMBA的线性范围为0.156 6~3.132 6 ng/mL,相关系数r>0.99,方法检出限浓度为0.047 0 ng/mL(相当于样品浓度0.01μg/g),定量限浓度为0.156 6 ng/mL(相当于样品浓度0.03μg/g),样品加标回收率在80%~130%。说明该方法可以快速、简便、灵敏、准确地测定厄贝沙坦及其复方制剂中NMBA含量。     

禽霍乱基因缺陷菌株双型联合免疫的研究

将禽源多杀性巴氏杆菌Ｃ４８－１株（血清型为５∶Ａ）用化学诱变剂亚硝基胍（ＮＴＧ）处理，从３０００多个克隆中筛选出９株链霉素依赖性基因缺陷型菌株（Ｃｓｔｄ株），经２０代连续回复突变测定，除１株外，其余８株表型稳定。将８株Ｃｓｔｄ株用小鼠做毒力比较试验，其中５株加注链霉素表现毒力，不加注链霉素则不表现毒力；用小鼠做免疫力测定，其中Ｃｓｔｄ－１和Ｃｓｔｄ－７能保护１０个最小致死量（ＭＬＤ）同型强毒菌的攻击。将Ｃｓｔｄ－１株与另一禽源多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９株（血清型为８∶Ａ）的链霉素依赖型菌株Ｐｓｔｄ－６混合，用小鼠做双型联合免疫试验，结果小鼠能抵抗Ｃ４８－１和Ｐ１０５９两株强毒菌混合培养物１０个ＭＬＤ的攻击，保护率达１００％。