黄沙鳖β-防御素基因克隆及其表达分析

[目的]明确β-防御素在黄沙鳖先天免疫中的潜在作用,为开展黄沙鳖绿色病害防治及促进其养殖业健康发展打下基础.[方法]运用RACE克隆黄沙鳖β-防御素基因(Hs-BD1)cDNA序列,采用SignalP-5.0、PredictProtein、PSIPRED、Robetta和Clustal X等在线软件进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR检测Hs-BD1基因在黄沙鳖不同组织中的表达特征及细菌感染前后的表达变化.[结果]Hs-BD1基因cDNA序列全长493 bp,包括72 bp的5'非编码区(5'-UTR)、201 bp的开放阅读框(ORF)及220 bp的3'非编码区(3'-UTR).Hs-BD1基因编码66个氨基酸残基,包括22个氨基酸残基组成的信号肽区、3个氨基酸残基组成的前肽区和41个氨基酸组成的成熟肽区.其中,成熟肽区具有6个保守的半胱氨酸残基(31Cys、58Cys、38Cys、52Cys、42Cys和59Cys)及位于C1和C2间的甘氨酸残基(Gly),即Hs-BD1基因属于β-防御素家族.Hs-BD1氨基酸序列与中华鳖β-防御素16的相似性最高(93.9%),基于β-防御素序列相似性构建的系统发育进化树也显示黄沙鳖与中华鳖和西部锦龟聚为一支,其亲缘关系相对较近.6个保守的半胱氨酸残基分别以C1-C5、C2-C4和C3-C6的连接方式形成3个二硫键;Hs-BD1成熟蛋白三级结构是由α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲组成.Hs-BD1基因在黄沙鳖肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的相对表达量较高,在心脏、肠道、肌肉、脑组织和表皮中的相对表达量均较低;以温和气单胞菌攻毒后,Hs-BD1基因在黄沙鳖脾脏中的相对表达量呈上升—下降—上升—下降的变化趋势,在攻毒后第3和36 h共出现2个表达峰值,对应的相对表达量分别是攻毒前(0 h)的20.8和10.6倍,差异均极显著(P<0.01).[结论]Hs-BD1基因在黄沙鳖的多个组织中均有表达,尤其在肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的相对表达量较高,且可被温和气单胞菌感染诱导表达,说明Hs-BD1基因在黄沙鳖抵抗病原感染的过程中发挥调控作用.     

植物精油包埋工艺及包埋植物精油的应用进展

植物精油因其所具有的天然性、营养性和生物活性被广泛添加应用于动物生产中,成为一种新型抗生素替代品。综述总结了植物精油功能,结合植物精油包埋工艺阐述了包埋植物精油的应用研究进展,以期为开展植物精油作为饲料添加剂在动物生产中的研究提供参考。     

雄性食蟹猴生殖系统中Ghrelin的分布定位

本文采用免疫组织化学染色方法,探讨ghrelin在雄性食蟹猴生殖系统内的分布定位。通过对ghrelin免疫阳性细胞在生殖系统中分布部位、含量及细胞形态等方面的研究,为今后ghrelin在食蟹猴体内的功能研究奠定形态学基础。免疫组化染色发现,ghrelin阳性细胞在食蟹猴的生殖系统中有分布。Ghrelin免疫阳性细胞被染为棕色到棕黑色,主要分布于睾丸、附睾及输精管中,精囊腺中无ghrelin阳性细胞分布。Ghrelin阳性细胞在组织中多呈散在分布。细胞大小不一、形态各异,多呈圆形、卵圆形、锥体形、长柱形及其他不规则形。     

广西地方鸡种线粒体基因SNP筛选研究

为了从线粒体基因水平筛选广西地方鸡种质资源DNA条形码,研究利用混合池基因组DNA为模板,利用PCR和直接测序技术,对6个广西地方鸡品种和1个商业化肉鸡品种线粒体上6个基因的SNP进行了分析。结果显示:16 S rRNA在7个品种中都未发现SNP,其他5个基因在7个品种中存在SNP。其中广西三黄鸡、广西麻鸡和龙胜凤鸡SNP位点的百分比相似,南丹瑶鸡和东兰乌鸡SNP位点的百分比相似,而霞烟鸡与艾维茵肉鸡SNP位点的百分比相似。研究结果为进一步开发广西地方鸡品种的DNA条形码奠定了基础。     

黄颡鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药性及其消失速率研究

在离体条件下通过测定最小抑菌浓度MIC值,研究4株黄颡鱼源嗜水气单胞菌对氟苯尼考的耐药产生速率与耐药性消失速率。结果表明:以37℃条件下培养48h为1代,HSY02菌株对氟苯尼考的最小抑菌浓度为3.906 3μg/m L,HSY01、HSY03、HSY04菌株对氟苯尼考的最小抑菌浓度为1.953 1μg/m L。在含有氟苯尼考的药物营养肉汤培养基中连续传代8代后,氟苯尼考对3株嗜水气单胞菌HSY01、HSY03、HSY04的最小抑菌浓度(MIC)由1.953 1μg/m L上升至62.50μg/m L,耐药性增长了32倍。HSY02菌株的最小抑菌浓度(MIC)由3.906 3μg/m L上升至62.50μg/m L,耐药性增长了16倍;且耐药性获得后保持稳定,其消失速率为0。     

丁酸钠对犊牛胃肠道发育的研究进展

丁酸钠是一种绿色新型饲料添加剂，目前在动物饲料中应用广泛，且效果良好。作者主要介绍了丁酸钠的生物学功能、对犊牛胃肠道发育的影响及其在犊牛日粮中的应用效果。重点总结了丁酸钠促进犊牛胃肠道发育的影响机制，包括作为胃肠道组织的能量来源调控激素和生长因子的分泌，提高消化和吸收相关酶的分泌及活性，提高肠道免疫细胞保护性蛋白的分泌等。现有研究表明，日粮干物质中添加0.3%丁酸钠就能达到促进犊牛生长和胃肠道发育的效果，但具体添加水平、添加阶段和方式等尚不明确。此外，日粮粗饲料水平、精料发酵所产生的内源丁酸对外源丁酸钠的作用效果是否有影响也鲜有报道，有待进一步开展研究。     

松籽对蛋鸡血清生化指标和免疫性能的影响

试验旨在探讨松籽对蛋鸡的血清生化指标和免疫性能的影响。试验选用360只48周龄蛋鸡,随机分成4组,每组3个重复,每个重复30只鸡。试验1、2、3、4组分别在基础日粮中均匀添加0、1%、2%、3%的松籽,试验6周。结果表明:2%松籽添加水平能显著降低血清血脂的含量(P0.05),同时也能显著提高免疫蛋白的含量(P0.05)。试验组血清细胞因子干扰素-γ和白介素-2的含量均显著高于对照组(P0.05)。试验组血清的H5型禽流感、H9型禽流感病毒和新城疫病毒抗体滴度相对于对照组也得到一定程度的提高。从以上结果可以看出,饲粮中添加松籽可以改善蛋鸡的健康水平和提高蛋鸡的免疫力。     

倒扣草水煮液和抗菌药联用对3株多重耐药大肠杆菌的体外抑菌效果研究

倒扣草是一种抗炎、抗菌、抗肿瘤的常见中药,为了倒扣草水煮液对3株多重耐药大肠杆菌的抑菌效果,采用微量肉汤二倍稀释法测定倒扣草水煮液与头孢曲松钠、阿莫西林、头孢噻呋钠、环丙沙星、克林沙星、磷霉素、氟苯尼考、利福平等抗菌药的最小抑菌浓度(MICs);采用微量棋盘稀释法测定1/2MIC倒扣草水煮液与不同浓度抗菌药联用时的最小抑菌分级指数(FICI);结合3株多重耐药大肠杆菌的MICs与FICI值,选取3种耐药基因超广谱β-内酰胺类耐药基因CTX-M、氟苯尼考耐药基因floR、磷霉素fos A3进行PCR扩增。结果表明,倒扣草对多重耐药大肠杆菌具有一定的抑菌效果,其中对产CTX-M型大肠杆菌E1,倒扣草水提液与头孢噻肟、环丙沙星、利福平呈现相加效应;对产floR型大肠杆菌E2,倒扣草水提液与氟苯尼考、头孢噻肟、克林沙星、利福平呈现协同或相加效应;对产CTX-M型大肠杆菌E3,倒扣草水提液与磷霉素、利福平、黏杆菌素、痢菌净及氟苯尼考呈现协同或相加效应。倒扣草水煮液与部分抗菌药联用可降低抗菌药对多重耐药大肠杆菌的最小抑菌浓度(MICs),对畜牧业减少或降低抗菌药的使用有着实际意义。     

奶牛蹄叶炎的诊治

正蹄叶炎是奶牛最常见的蹄病,是每个奶牛场所面临的最为棘手的问题之一~[1]。临床表现为蹄真皮与角小叶的弥漫性、非化脓性的渗出性炎症~[2],如果在某奶牛场该病集中高发,其发病原因往往与亚急性瘤胃酸中毒有关~[3]。本文对南宁市某奶牛场就奶牛蹄叶炎疾病的求诊及本研究组对该病例的诊断与治疗情况介绍如下,以供兽医技术人员和奶牛养殖者参考。