自噬抑制细胞焦亡对脓毒症肺损伤的保护作用

为研究自噬抑制细胞焦亡对脓毒症肺损伤的保护作用,研究先于体外使用盲肠内容物刺激小鼠腹腔巨噬细胞使其发生炎性反应,通过乳酸脱氢酶检测法、酶联免疫吸附(ELISA)法及Western blottin法检测雷帕霉素激活自噬对巨噬细胞发生细胞焦亡的影响。结果发现激活自噬能降低巨噬细胞炎性小体的活化及炎性细胞因子的释放,抑制细胞焦亡。随后对健康C57小鼠构建脓毒症模型,观察雷帕霉素预处理对各组小鼠死亡率的影响,并通过Western blotting检测肺组织中LC3蛋白表达变化,HE染色观察肺组织形态学改变,发现雷帕霉素预处理能够减轻脓毒症小鼠肺组织病理损伤,降低小鼠死亡率。结果表明自噬能够抑制细胞焦亡,对降低脓毒症急性肺损伤具有重要意义。     

不同样品中犬输血传播性病毒的PCR检测比较与基因分析

根据NCBI上输血传播性病毒(Torque-Teno virus,TTV)犬基因组序列(Cf-TTV10,GenBank登录号:AB076002)设计嵌套引物,从犬血清与粪便中鉴定出TTV。199份犬血清样品中检出阳性率为14.6%(29/199),158份犬粪便样品的检出率为12.7%(20/158),通过基因分析与鉴定确定为同一型,验证了从粪便样品和血液样品的提取检测的犬TTV阳性率基本保持一致(P>0.05),为下一步进行TTV的传染特性和分子流行病学的研究提供了基础。     

汉赛巴尔通氏体与人类健康

巴尔通氏体是一类红细胞内寄生病原体,目前已经成功鉴定20余个种或亚种.其中大约10种具有感染人类致病能力.猫抓病(Bartonella henselae),血管瘤(Bartonella bacilliformis)及战壕热(Bartonella quintana)是人类巴尔通氏体病的主要表现形式.然而医学领域时于该类疾...     

人双埃克病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种能快速、简便、灵敏地检测人双埃克病毒(Human Parechovirus,HPeV)SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank发表的人双埃克病毒8个基因型的参考毒株全序列,针对5′端非编码区保守序列设计1对特异性引物,通过RT-PCR扩增此靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板,经过优化反应条件,建立标准曲线和融解曲线,对其灵敏性、特异性和重复性进行评价;检测临床粪便样品共156份,并与常规套式RT-PCR检测结果进行比较。结果显示,建立的标准曲线Ct值与模板浓度呈现良好的线性关系(r2=0.999),融解曲线特异,检测灵敏度可达60拷贝/μL,比常规PCR检测方法高100倍,重复性变异系数小(<1%),能特异地检测HPeV。临床样本检测结果也表明该法(检出30份)灵敏度高于套式RT-PCR(检出21份)。实验结果证明建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,有望成为HPeVs的分子诊断、流行病学调查等相关研究的工具。     

半套式PCR方法检测猪附红细胞体病的建立

建立一种客观敏感的附红细胞体病早期实验室诊断方法。本实验采用已公布的附红细胞体序列设计半套式引物进行PCR扩增,对扩增出得特异性条带进行序列分析。镜检结果阳性率为75%,PCR检测结果阳性率为90%,测序结果与已公布的序列同源性达99.9%。半套式PCR方法比镜检高效准确,适合附红细胞体病的早期诊断。     

嗜血支原体(附红细胞体)病原学研究进展

嗜血支原体病作为一种新发人兽共患病正日益得到兽医学界与相关部门的关注.该病原主要寄生于人和动物的红细胞表面、血浆及骨髓中,以贫血、黄疸、发热等为主要临床症状.并有隐性感染、慢性迁延、条件致病、急性发病时致死率高的特征;最初猪嗜血支原体命名为附红细胞体,并将其归为立克次氏体目.而后在其16S rRNA基因序列鉴定后将其重新分类为支原体类微生物.但是该分类还存在异议.研究报道证实人类也可感染嗜血支原体微生物,病人以低热、乏力、嗜睡、反复上呼吸道感染、腹泻腹痛、肝脾肿大,红细胞、血红蛋白血小板减少、胆红素增高为特征.然而,该病在临床医师中尚未引起足够重视.     

猪附红细胞体小鼠感染模型的建立及相关指标检测

构建了猪附红细胞体小鼠感染模型,研究了感染后血液常规指标,红细胞免疫功能和脾淋巴细胞转化功能,旨在为附红细胞体病跨种间感染机制研究以及免疫功能变化研究提供借鉴。研究采用分离纯化的猪附红细胞体为感染源,以尾静脉注射方式人工感染SPF小鼠,感染后通过血液压片镜检,PCR检测及透射电镜检测鉴定模型建立成功。同时检测对照组和试验组小鼠的血液常规指标变化,红细胞免疫黏附功能和脾淋巴细胞转化功能变化,发现试验组小鼠红细胞总数减少,血红蛋白含量降低,红细胞比容降低,红细胞免疫黏附功能下降,其他指标没有显著变化。     

巴尔通体体外侵染巨噬细胞特性研究

巴尔通体（Bartonella）是一类革兰氏阴性、营养需求苛刻的兼性胞内需氧菌,感染导致人类罹患猫抓病及杆菌样血管瘤。组织病理学研究结果发现淋巴结内存在大量巴尔通体,提示巴尔通体具有能逃避宿主先天免疫吞噬的功能。然而目前关于巴尔通体与巨噬细胞间相互作用的研究尚未深入开展。本研究利用鼠源巴尔通体（Bartonella tribocorum）体外感染J774A、RAW264.7及C57小鼠腹腔巨噬细胞,探索巴尔通体在巨噬细胞内存活特性。免疫荧光试验结果显示巨噬细胞能有效吞噬巴尔通体,细胞形态未发生显著变化。庆大霉素保护试验结果证实被吞噬的巴尔通体在不同巨噬细胞内均能增殖及存活至48 h,且能在LPS诱导活化的巨噬细胞中存活。     

大鼠盲肠结扎与穿刺脓毒症模型的建立与分析

脓毒症是重症监护病房(ICU)的一种常见疾病,目前临床上对脓毒症的治疗效率不高。更为严重的是脓毒症患者的死亡率仍然很高,其内部的病理生理过程尚不清楚。许多种类的脓毒症的动物模型已经建立,其中盲肠结扎穿孔(CLP)模型,代表临床脓毒症最理想的模型。然而就CLP模型造模的死亡率、炎症反应以及病理变化而言不同的实验室之间结果有较大差异。目的:为了建立在有限实验条件下稳定性重复性好的大鼠模型,为后续的研究打下了基础。方法:1、确定了实验条件下盲肠结扎程度与大鼠死亡率之间关系。2、收集组织切片,确定其病理改变。3、在相同造模程度下,2种不同麻醉(水合氯醛和异氟烷)分别麻醉的大鼠,观察CLP大鼠死亡率的影响。结果:1、成功确定模型中大鼠盲肠结扎的程度。2、组织病理切片显示脓毒症的典型病理组织损伤,符合进一步研究的需要。3、在研究中发现相同造模程度下异氟醚麻醉组CLP大鼠死亡率为25%;水合氯醛麻醉组CLP大鼠死亡率达68.75%。     

红细胞免疫研究进展

红细胞是机体的一种重要的固有免疫细胞,在天然免疫中有很重要的作用.文章综述了红细胞免疫功能检测方法和动物红细胞免疫的研究进展,从针对CR1分子的研究、红细胞免疫调控和红细胞系统免疫学等3个方面重点概述了近年红细胞免疫研究的热点.