猪附红细胞体小鼠感染模型的建立及相关指标检测

构建了猪附红细胞体小鼠感染模型,研究了感染后血液常规指标,红细胞免疫功能和脾淋巴细胞转化功能,旨在为附红细胞体病跨种间感染机制研究以及免疫功能变化研究提供借鉴。研究采用分离纯化的猪附红细胞体为感染源,以尾静脉注射方式人工感染SPF小鼠,感染后通过血液压片镜检,PCR检测及透射电镜检测鉴定模型建立成功。同时检测对照组和试验组小鼠的血液常规指标变化,红细胞免疫黏附功能和脾淋巴细胞转化功能变化,发现试验组小鼠红细胞总数减少,血红蛋白含量降低,红细胞比容降低,红细胞免疫黏附功能下降,其他指标没有显著变化。     

猪附红细胞体病家兔感染模型的免疫指标检测

[目的]观察家兔人工感染猪附红细胞体后的免疫指标的变化。[方法]采用猪附红细胞体阳性血样,以腹腔注射的方式人工感染家兔。模型建立后,通过血液压片镜检及PCR方法检测。感染家兔进行红细胞免疫功能的测定、T淋巴细胞百分率检测,并利用淋转实验等对家兔感染后的免疫指标进行监测。[结果]家兔感染附红细胞体后,RBC-C3b和RBC-IC花环率明显下降,外周血ANA;E+T淋巴细胞百分率显著降低,淋巴细胞的转化功能差异不明显。[结论]猪附红细胞体人工感染家兔后可引起家兔的细胞免疫,造成红细胞免疫功能下降。     

猪附红细胞体感染SD大鼠模型的建立和免疫学指标的研究

[目的]建立SD大鼠人工感染猪附红细胞体病动物模型,并检测相关的免疫学指标。[方法]用猪附红细胞体阳性血样,腹腔注射SD大鼠,通过光镜检测和PCR鉴定动物模型的成功建立,并对SD大鼠进行红细胞免疫功能测定、T淋巴细胞百分率检测及淋转试验的检测。[结果]SD大鼠感染猪附红细胞体后CD35明显升高,BBC-C3b和RBC-IC花环率明显降低,外周血ANAT＋T淋巴细胞百分率显著降低,淋巴细胞的转化功能差异不明显。[结论]猪附红细胞体人工感染SD大鼠动物模型成功建立,并可引起SD大鼠红细胞免疫功能下降。     

猪附红细胞体病BALB/c小鼠模型的建立

为了解现阶段延边地区猪附红细胞体的致病性,以注射地塞米松和摘除脾脏的BALB/c小鼠为实验动物,以腹腔注射方式人工感染猪附红细胞体,通过临床症状观察、血液涂片姬姆萨染色镜检及PCR方法对BALB/c小鼠感染猪附红细胞体情况进行鉴定,并进行血液常规检测。结果表明,注射地塞米松组、摘除脾脏组和正常感染组BALB/c小鼠在感染后8～10d相继达到高峰,正常感染组BALB/c小鼠在感染后第24天猪附红细胞体消失,注射地塞米松组在感染后第32天消失,而摘除脾脏组在试验结束时仍具有较高的感染率。经血液常规检测,各组BALB/c小鼠在感染猪附红细胞体后,白细胞总数显著升高(P<0.01),淋巴细胞总数、红细胞总数、血红蛋白含量均显著下降(P<0.05),红细胞比容显著下降(P<0.01)。因此,猪附红细胞体对低免疫力的BALB/c小鼠具有一定感染性,并表现出典型临床症状。     

猪附红细胞体对红细胞免疫水平的影响

为了探讨附红细胞体对红细胞免疫水平的影响,从河南省新乡市某猪场选取了4头感染附红细胞体阳性猪和4头无附红细胞体感染的健康猪,进行血涂片染色镜检,测定红细胞C3b受体花环率和红细胞免疫复合物花环率.结果显示:红细胞出现凹陷或变形,甚至形成空洞,这就有可能使其结构和功能发生改变,甚至出现破裂溶血现象.感染附红细胞体病猪红细胞C3b受体花环率和红细胞免疫复合物花环率都显著下降,说明附红细胞体侵袭红细胞的同时,破坏了红细胞膜表面的C3b受体,游离状态的C3b受体数量明显减少,导致机体红细胞的免疫黏附活性降低,红细胞免疫功能低下.红细胞免疫功能的破坏将直接或间接地影响到整个免疫系统功能的协调,从而使机体的抵抗力下降,为其他病原菌的侵入打开了门户.     

猪附红细胞体对仔猪免疫功能的影响及免疫调节剂的筛选

为研究猪附红细胞体对仔猪免疫功能的影响,以及比较免疫增强剂对患猪免疫能力的调节作用,试验选择20头健康大白仔猪,随机分为5组,试验组和阳性对照组人工感染附红细胞体,3个试验组分别给予免疫增强剂防风多糖、黄芪多糖及左旋咪唑,另一组作为阴性对照组,然后测定实验动物的细胞免疫和体液免疫指标。结果表明:猪感染附红细胞体病后,细胞免疫和体液免疫能力均下降。比较3种免疫增强剂的作用,黄芪多糖的免疫增强作用较好。     

猪附红细胞体病免疫调节剂的筛选

【目的】探讨猪附红细胞体病对仔猪非特异性免疫功能的影响,并筛选有效的免疫调节剂作为辅助治疗药物。【方法】选取20头40日龄个体质量相近、无附红细胞体感染的健康仔猪,随机分为5组,1~3组为试验组,4组为阳性对照组,5组为阴性对照组。1~4组人工接种附红细胞体菌血5 mL/头,5组同时注射等量生理盐水。随后1~3试验组分别给予防风多糖溶液0.1 mL/kg、黄芪多糖注射液0.1 mL/kg和左旋咪唑注射液0.05 mL/kg,阴性和阳性对照组给予生理盐水各0.1 mL/kg,连用7 d,分别于第0,4,7,14天自猪前腔静脉采血,测定红细胞感染率、血清溶菌酶活力、淋巴细胞总数、血清总蛋白含量、血清球蛋白含量、血清免疫抑制酸性蛋白(IAP)含量。【结果】阳性对照组、防风多糖组、左旋咪唑组和黄芪多糖组的红细胞感染率分别为62.75%,52.25%,51.25%和40.00%。仔猪感染附红细胞体后,阳性对照组血清总蛋白含量、球蛋白含量显著降低,IAP含量显著升高(P0.05),淋巴细胞总数略有下降,血清溶菌酶活力无显著变化(P0.05)。黄芪多糖、左旋咪唑能显著提高感染仔猪的血清总蛋白含量和溶菌酶活力(P0.05),3种免疫调节剂均能显著提高感染仔猪的血清球蛋白含量(P0.05),降低IAP含量(P0.05)。【结论】3种免疫调节剂均能提高感染仔猪的非特异性免疫,其中以黄芪多糖的效果最好。     

附红细胞体病患畜病理组织学及血液学变化的研究

对急性附红细胞体病患畜（猪、犬）病理组织学、血液学和部分生理生化指标变化的研究显示:患畜均有体温升高、呼吸和心跳加快、谷-丙转氨酶和血清胆红素增高、血糖降低、红细胞压积、红细胞总数、淋巴细胞下降、白细胞总被上升等血液学和生理生化指标变化;病理剖检可见血液稀薄,血凝延迟、胃肠粘膜出血,其他部位粘膜、浆膜和脂肪黄染,肝脾肿大;心、肝、脾、肾等大部分实质器官有含铁血黄素沉着和广泛的器官损害等组织学变化。结果表明:贫血、肝功能下降、血糖降低和广泛的器官损害是急性附红细胞体病主要的特征。     

规模牛场犊牛附红细胞体病的诊治报告

附红细胞体病(Eperythrozoonsis)是由附红细胞体(Eperythrozoon)寄生于人或动物红细胞表面、血浆及骨髓等处引起的人畜共患病,以发热、贫血和黄疽等为主要临床表现[1]。在流行病学特点上,附红细胞体病具有发病动物种类广泛、隐性感染率高的特点。附红细胞体相对宿主有特异性,也有互感性,如猪附红细胞体可以感染小鼠、兔;绵羊附红细胞体可以感染人;牛附红细胞体可以感染小鼠[2]附红细胞体病的传播方式主要有接触性、血源性、垂直性及媒介昆虫4种[3]。     

猪附红细胞体生物学特性的研究

采取新鲜血液压片相衬观察和末梢血液涂片染色镜检法,对河南省新乡地区3000头猪附红细胞体病发病情况进行了调查;并且对体温升高、镜检附红细胞体感染强度为 病猪的血液,分别用光学显微镜、扫描电子显微镜进行形态观察和血液生化指标检测.结果表明:猪附红细胞体病的发病率为46.33%,死亡率为13.88%,隐性感染率为55.93%(755/1350).在光学显微镜下观察,红细胞呈现菠萝样;染色血片观察附红体在红细胞表面及边缘呈各种形式排列,可见强折光性发亮的圆形小体;扫描电子显微镜观察.附红体寄生的红细胞凹陷区,有大、小球体,有的小球体与大球体相连.血清胆红素、白蛋白、尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶增加,血糖、血清总蛋白、超氧化物歧化酶活性下降.     

猪附红细胞体病的防治

附红细胞体病是一种人畜共患病,能感染猪、马、牛、羊、猫、兔、鸡和犬等多种动物,亦能感染人,但相互问有各自种属性。如猪附红细胞体病是由猪附红细胞体寄生于红细胞表面引起的一种血液传染病。     

猪附红细胞体病的诊断与防治

猪附红细胞体病是由猪附红细胞体寄生于猪红细胞内和血浆中而引起的一种血液原生病。从不同方面介绍猪附红细胞体病的诊断与防治,以期为养猪户提供参考。     

一例猪附红细胞体病的诊治与防控

猪附红细胞体病是由猪附红细胞体寄生于猪红细胞而引起的一种血液传染病。本文从发病特点、临床症状、病例剖检和实验室诊断介绍了一例猪附红细胞体病的诊治和防控。     

猪附红细胞体病的防治

猪附红细胞体病是由专性血液寄生物、立克次氏体病原—猪附红细胞体引起的一种散在的热性、溶血性人畜共患传染病,临床上多为隐性感染。附红细胞体具有种特异性,由猪附红细胞体引起的红细胞病只见于家养的猪。(一)病原及流行特点附红细胞体是一种典型的原核生物,为多形态生物体     

4种药物对猪附红细胞体病疗效的观察

试验旨在观察4种药物对猪附红细胞体病的治疗效果,为猪附红细胞体病的治疗提供最佳治疗方案。将40～60日龄患附红细胞体病猪15头随机分成5组,试验Ⅰ组：血虫净;试验Ⅱ组：长效土霉素;试验Ⅲ组：硫酸卡那霉素;试验Ⅳ组：血虫净＋长效土霉素;对照组。对病猪进行治疗,分别在用药后1d、2d、3d、4d、5d、6d耳静脉取血,检测血液中红细胞的感染强度,以检测不到附红细胞体为有效。结果显示：试验Ⅰ组在第4d检测不出附红细胞体;试验Ⅱ纽在第6d检测不出附红细胞体;试验Ⅲ组在第6d检测红细胞感染强度为“＋”;试验IV纽第3d检测不出附红细胞体;对照组无变化。由此可见,血虫净、长效土霉素、硫酸卡那霉素对猪附红细胞体病均有效,但以血虫净＋长效土霉素治疗效果最佳。     

仔猪附红细胞体病贫血和黄疸机制的探讨

[目的]阐明仔猪附红细胞体病贫血和黄疸的发病机制。[方法]对患附红细胞体病仔猪进行血液生化指标的测定和组织器官的病理组织学观察。[结果]患附红细胞体病仔猪的血清胆红素和谷-丙转氨酶显著增高,血糖浓度降低;肝、脾和淋巴结等器官的细胞变性、坏死,红细胞破裂增加,表明患附红细胞体病仔猪的贫血属于溶血性贫血。[结论]红细胞的大量破坏和肝细胞的大量变性、坏死是导致黄疸发生的主要原因。     

人工复制附红细胞体病的研究

21只体重（7±2.3）kg健康杂种犬（经连续5天肌注四环素10mg/kg体重和血液附红细胞体检查阴性后）,随机分为3组;Ⅰ组为切脾组,Ⅱ组为切脾加免疫抑制剂注射组,Ⅲ组为对照组。各组大均腹腔注射附红细胞体病患犬抗凝血4ml（红细胞用红细胞体感染率94％,红细胞数3.8 ×10~6/mm~3）,逐日采血进行血液学变化、生理指标以及临床病征等测定。结果表明,接种后第 1天Ⅰ组和Ⅱ组红细胞附红细胞体感染率为1.5％和2.1％,第6天Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别为81.3％、86.5％和75.2％;血象变化表现出不同程度的红细胞压积、血红蛋白、红细胞总数、嗜酸性白细胞、淋巴细胞下降;白细胞总数、嗜中性白细胞、单核细胞上升的趋势;Ⅰ、Ⅱ组中出现贫血、黄疸、发热、食欲不振、腹泻、呕吐等明显症状的发病犬分别为5只、7只,发病率分别为71％、100％,其中Ⅱ组病势最重,并死亡犬2只。两实验组发病犬其临床症状、血象变化、生理指标及病理组织学变化均同自然发病患犬变化相似,对照组无明显变化。     

猪附红细胞体特异性PCR检测方法的建立

从猪血中分离附红细胞体,提取其基因组DNA,用EcoRI对基因组DNA进行酶切,将酶切片段进行琼脂糖电泳,得到一个1.8 kb的DNA片段,根据DNA序列分析与GenBank已知基因比较和PCR方法确定该片段具有特异性,以该片段为模板进行PCR,并将其扩增产物与其它猪的其他细菌DNA扩增产物相比较,建立一种检测猪外周血中附红细胞体的特异性PCR检测方法,并通过斑点杂交试验检测该产物特异性,通过临床应用检验该法的适用性。结果表明:扩增产物大小为782 bp,其序列与已知附红细胞体序列同源性为100%,斑点杂交试验证实该产物为附红细胞体特异性产物,将该方法应用于检测10头临床症状典型的感染猪和10头健康猪的血液,所有感染和隐性带菌猪的PCR检测结果为阳性,健康猪为阴性。猪外周血中附红细胞体的特异性PCR检测方法适用于检测无临床症状的隐性带菌动物。     

羊附红细胞体小鼠模型的建立

[目的]用人工感染的方法构建羊附红细胞体小鼠模型,并对其进行鉴定。[方法]将注射地塞米松的昆明小鼠以腹腔注射方式人工感染羊附红细胞体,通过镜检、巢式PCR检测、临床症状观察、剖检及病理形态学观察对感染情况进行鉴定。[结果]羊附红细胞体小鼠模型已成功建立。[结论]可以用昆明小鼠建立羊附红细胞体实验动物模型,不仅有助于该病的诊断,而且为羊附红细胞体流行病学、致病力、免疫学以及有效药物筛选等方面的研究提供了一种合适的动物模型。     

猪附红细胞体吉林感染株二维电泳图谱分析

为获得猪附红细胞体吉林感染株2-DE图谱,并筛选猪附红细胞体吉林感染株免疫原性蛋白,本试验采用2-D电泳分析猪附红细胞体蛋白表达谱,利用感染血清与二维电泳凝胶进行免疫印迹。结果表明:二维电泳共检测到(60±5)个蛋白质点,蛋白主要集中在pH值6~9和分子量45~25ku。二维电泳中的9个蛋白点被猪附红细胞体感染血清所识别。本研究将为进一步开展猪附红细胞体病的疫苗和诊断候选分子研究奠定基础。