苜蓿皂苷对小白鼠体内溶血的研究

为了探究摄入苜蓿皂苷(alfalfa saponin, AS)是否会引起血管内溶血,选取180只健康小白鼠,按体重和性别随机分为6个处理,每个处理3个重复,每个重复10只。将1mL 0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2 g·mL^-1皂苷分别灌胃Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组小鼠,对照组灌胃等量的生理盐水(1 mL),试验期为30 d。检测红细胞数目(red blood cell, RBC)、形态、压积(hematocrit, HCT)、平均红细胞体积(erythrocyte mean corpuscular volume, MCV)、平均血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin, MCH)、血浆游离血红蛋白(free hemoglobin, FHb)、网织红细胞计数(reticulocyte count, RET)及红细胞渗透脆性最大、最小抵抗值(maximum/minimum osmotic fragility of red blood cells, OF_max/OF_min),采血和骨髓制作观察血涂片及骨髓涂片,制作实质性器官心、肝的切片。结果表明: 1)灌胃苜蓿皂苷后,小白鼠血常规中红细胞数目和血细胞比容均降低且Ⅴ组显著低于对照组(P<0.05),平均血红蛋白浓度均高于对照组且Ⅳ、Ⅴ组与对照组相比差异显著(P<0.05)。2)Ⅳ、Ⅴ组血浆游离血红蛋白含量极显著高于对照组(P<0.01);Ⅳ组网织红细胞计数极显著高于对照组(P<0.01)。3)随着灌胃剂量的加大,红细胞逐渐出现轻度大小不等,着色较深,形态异常的现象。4)红细胞渗透脆性最大抵抗值显著升高且差异显著(P<0.05),最小抵抗值有逐渐升高的趋势。5)灌胃后粒系比有不同程度的降低,Ⅴ组与对照组相比差异显著(P<0.05);红系比则有不同程度的升高,Ⅴ组与对照组相比差异显著(P<0.05);粒红比不但降低而且变化明显,Ⅳ、Ⅴ组显著低于对照组(P<0.05)。 6)灌胃对实质性器官没有影响但是组织更易碎。综上,高剂量的苜蓿皂苷能够引起血管内溶血。     

海拔高度对披碱草属植物形态特征的可塑性

海拔是影响植物生物进化和亲缘关系的重要因素,为了探明海拔对披碱草属植物表型特征的影响,本试验对不同海拔(3098~4203 m)的3种披碱草属植物:六倍体垂穗披碱草(Elymus nutans)、四倍体的昆仑披碱草(Elymus burchan-buddae)和老芒麦(E. sibiricus),27个种群810个体的13个表型性状进行测定,结果表明,垂穗披碱草的变异系数范围为8.8%~59.1%,昆仑披碱草为8.2%~53.7%,老芒麦为7.6%~56.7%,外稃长是3种披碱草变异系数最小的表型性状。聚类分析可以看出形态上相似的种群海拔来源基本相同,而且聚为一类的多数种群具有相似的生境。相关分析表明:海拔和供试材料的多个表型性状之间存在着明显的相关性(P<0.01)。本研究表明,海拔对披碱草属植物形态特征具有较强的可塑性,不同披碱草属植物的形态特征对海拔变化的反应不同,四倍体披碱草属植物对海拔的变化反应更加敏感。因此,部分形态特征可以用于披碱草属植物在海拔梯度上的演化规律的分析。     

人双埃克病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为建立一种能快速、简便、灵敏地检测人双埃克病毒(Human Parechovirus,HPeV)SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank发表的人双埃克病毒8个基因型的参考毒株全序列,针对5′端非编码区保守序列设计1对特异性引物,通过RT-PCR扩增此靶序列,构建重组质粒作为标准阳性模板,经过优化反应条件,建立标准曲线和融解曲线,对其灵敏性、特异性和重复性进行评价;检测临床粪便样品共156份,并与常规套式RT-PCR检测结果进行比较。结果显示,建立的标准曲线Ct值与模板浓度呈现良好的线性关系(r2=0.999),融解曲线特异,检测灵敏度可达60拷贝/μL,比常规PCR检测方法高100倍,重复性变异系数小(<1%),能特异地检测HPeV。临床样本检测结果也表明该法(检出30份)灵敏度高于套式RT-PCR(检出21份)。实验结果证明建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,有望成为HPeVs的分子诊断、流行病学调查等相关研究的工具。     

不同放牧强度下垂穗披碱草遗传多样性分析

放牧对草地植物种群遗传与进化产生重要影响,本研究利用SSR分子标记对4个不同放牧强度下垂穗披碱草种群遗传多样性进行研究,试验地选择在甘肃省甘南自治州玛曲县的阿孜试验站,利用8对多态性强的SSR引物对不同放牧压力下4个居群的800个个体基因组进行检测,每个位点的有效等位基因数在1.2267~1.9976之间。利用popgene分析发现不放牧垂穗披碱草种群遗传多样性最高,在3种不同放牧地,中等放牧强度的遗传多样性指数较高,其次为重牧,最后为轻度放牧。在不同放牧干扰下的4个垂穗披碱草种群的遗传分化系数为0.5168,基因流N_m=0.2337,说明4个种群的遗传变异主要发生在种群之间。从种质资源保护角度来讲,不放牧对于垂穗披碱草种质资源的保护是有利的;从草地利用角度,中等放牧强度比较合理。     

粮经间作套种高效模式的调查研究与推广

通过与科技人员采用查阅资料，深入农村与农户座谈、发放调查表、田间实地调查等方法，对商洛粮经间作套种高效模式进行了走访调查和推广。     

根腐病原镰刀菌-品种-土壤水分互作对苜蓿保护酶活性的影响

为了探明不同水分、镰刀菌对苜蓿品种保护酶活性的影响,本研究选择紫花苜蓿品种‘阿尔冈金’、‘丰宝’与‘苜蓿王’在不同水分条件下接种半裸镰孢和腐皮镰孢后,对其幼苗分别进行PPO,POD,SOD及PAL的活性的测定,评价接种真菌对保护酶活性的影响及菌种、水分、品种三者之间对其保护酶活性的相互关系。结果表明:接菌显著抑制了苜蓿品种PPO的活性(P<0.05),而且菌种和品种、菌种和水分之间有显著的互作(P<0.05)。同一水分条件下,无论是30%,50%还是70%的水分处理,均以‘丰宝’的酶活最低,‘苜蓿王’的酶活最高。在接菌条件下,‘阿尔冈金’、‘丰宝’均提高了其PAL活性但差异不显著。菌种和水分均显著影响各苜蓿品种的POD,SOD,PAL活性(P<0.05),且多因素之间存在显著的互作效应(P<0.05)。     

多胚亚麻的胚珠整体透明与解剖观察

利用改进的整体透明技术,以观察多胚性的亚麻受精后的胚珠,同时对整体透明方法进行了讨论.方法:利用60℃ 1M氢氧化钠溶液处理植物材料,然后利用10％次氯酸钠溶液透明,于显微镜下进行解剖观察.结果:在显微镜下,能观察到亚麻受精后胚珠内的幼胚,通过解剖还能清楚地观察到胚珠内的双胚的排列方式；并确定供试材料的双胚的发生率为8％.讨论:与传统的整体透明和切片方法相比,本改进的整体透明方法省时省力,并且能够完成整体透明和解剖的3D数据采集,适用于多胚亚麻幼胚的观察.缺点是用DAPI染色DNA效果不好.