中蜂来源的微孢子虫对意蜂工蜂的侵染性研究

为探讨中蜂来源的微孢子虫对意蜂的侵染性,本试验将纯化自中蜂的微孢子虫,以每只蜂1×105个和5×105个孢子的接种量,分别给2日、5日、8日、11日龄无微孢子虫感染的意蜂成年工蜂接种,在30℃±0.5℃,65%～80%RH,黑暗中隔离饲养10日后,各日龄工蜂的平均感染率达86.3%～100%,每只蜂中肠的平均产孢量为5.60×105～3.39×106个。在两接种量下,2日、5日龄意蜂工蜂的产孢量均显著(P<0.05)高于8日、11日龄的产孢量。试验首次证实了中蜂来源的微孢子虫对意蜂成年工蜂具较强的侵染性。     

响应面法优化王浆蛋白酶解工艺研究

采用响应面分析法,优化胃蛋白酶酶解王浆蛋白制备抗氧化肽的工艺条件,以1,1-二苯基-2-苦基苯肼(DPPH)清除率为响应值,研究了酶与底物的比值([E]/[S])、底物浓度以及酶解时间对蜂王浆酶解物抗氧化的影响.结果表明,最终确定出制备抗氧化肽的最优酶解条件为,[E]/[S]2.24％、底物浓度1.61％、酶解时间3.7h,在该条件下制备的王浆蛋白酶解物的DPPH自由基清除率为47.84％.     

响应面法优化蜂蜜酸奶的发酵工艺

 在单因素实验的基础上,采用响应面分析实验方法,优化蜂蜜与鲜奶比例、发酵温度、接菌量等影响蜂蜜酸奶发酵效果的工艺参数。经Design ExpertV8.0.6软件对试验结果进行分析,确定蜂蜜酸奶生产的最优工艺参数为：m（蜂蜜/g）∶V（鲜奶/mL）=8.13∶71.87,接种量2.30%,发酵温度42.30℃。在此条件下,还原糖转化率为9.47%,与理论值9.58%的相对误差约为1.15%。该蜂蜜酸奶发酵的最佳工艺参数在生产上具有一定的指导意义。     

我国蜂业机械设备现状与发展

目前,蜂业机械设备可以分为两大类,一类是蜜蜂机具类,一类是蜜蜂产品机具类。蜜蜂机具类主要是用于蜂群饲养管理及蜜蜂产品生产相关的器具设备。蜜蜂产品机具类主要是用于蜂产品的检测及加工相关的器具设备。蜜蜂机具蜜蜂机具是用于蜜蜂饲养管理及蜜蜂产品生产相关的设备或是器具,种类比较多,大致可分为蜜蜂基础管理类及蜜蜂产品生产类。蜜蜂基础管理类包括:供蜜蜂生长繁殖的蜂箱、巢脾、隔板等;人工管理蜂群所需的蜂帽、蜂     

中华蜜蜂酚氧化酶和丝氨酸蛋白酶相关基因 及其全长转录本发掘与分析

为深入开展中华蜜蜂相关研究提供参考信息和基础,利用已获得的纳米孔(Nanopore)测序数据对中华蜜蜂Apis cerana cerana的酚氧化酶(phenoloxidase, PO)和丝氨酸蛋白酶(serine protease, SP)相关基因和全长转录本进行发掘和分析。通过Blast工具将中华蜜蜂所有全长转录本比对KEGG和Nr数据库以筛选出PO和SP相关基因和全长转录本。采用gffcompare软件将PO和SP相关全长转录本与东方蜜蜂参考基因组(ACSNU-2. 0)已注释基因进行比较以优化结构。使用Astalavista软件鉴定PO和SP相关基因的可变剪接(alternative splicing, AS)事件,再利用IGV浏览器进行结构可视化。通过PCR验证AS事件的真实性。利用TAPIS pipeline预测和分析可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation, APA)位点,并通过TBtool软件鉴定APA位点上游的基序(motif)。鉴定到中华蜜蜂PO和SP相关的42个基因与146条转录本。优化了16个参考基因组已注释PO和SP相关基因的结构,其中5′端延长和3′端延长的基因均有7个,5′端和3′端同时延长的基因有2个。鉴定到PO和SP相关的10个基因的389次AS事件,其中最丰富的AS类型是5′端可变剪接。PCR结果证实了2次AS事件的真实性。共鉴定到34个PO和SP相关基因含有1个及以上的APA位点,其中含有3个APA位点的基因数量最多;在APA位点上游鉴定到多个motif,一致性序列为：GGHKSYWSHHTRATWTCNBHDMRRYWYRTNYTVACNGCKGCDCAYTGYR。鉴定到中华蜜蜂PO和SP相关的42个基因和146条全长转录本,优化了东方蜜蜂参考基因组已注释的PO和SP相关基因结构,并发掘出PO和SP相关基因的389次AS事件和237个APA位点。     

东方蜜蜂微孢子虫孢子中长链非编码RNA的竞争性内源RNA调控网络及潜在功能

【背景】 长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类长度>200 nt且不具有编码能力的转录本,能够在真核生物的转录水平和转录后水平通过顺式（cis）、反式（trans）或竞争性内源RNA（competing endogenous RNA,ceRNA）机制调控基因的表达,已被证明在生物体的生长和发育等生物学过程中发挥重要的调控作用。【目的】 结合测序得到的东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae）纯化孢子的small RNA（sRNA）组学数据和前期获得的lncRNA组学数据对lncRNA的调控方式进行深入细致的分析和探讨,揭示lncRNA在东方蜜蜂微孢子虫孢子中的潜在功能。【方法】 利用small RNA-seq（sRNA-seq）技术对东方蜜蜂微孢子虫纯化孢子进行测序,通过相关的生物信息学软件对测序数据进行质控。根据lncRNA与mRNA的位置关系预测lncRNA的上下游基因;使用Blast软件比对GO和KEGG数据库,对上下游基因进行功能和代谢通路注释;利用Target Finder软件预测lncRNA-miRNA及lncRNA-miRNA-mRNA调控网络,进而通过Cytoscape v3.7.2软件对调控网络进行可视化;利用RT-PCR对调控网络中的部分lncRNA、miRNA和mRNA的表达进行验证。【结果】 东方蜜蜂微孢子虫纯化孢子样品的sRNA-seq分别得到16 597 883、15 451 791和12 248 316条raw reads,经质控分别得到15 608 370、14 249 255和11 440 684条clean reads,各样品的Q30≥98.58%。共预测出lncRNA的上下游基因310个,它们可注释到代谢进程、细胞进程、催化活性、结合和细胞等相关的35个功能条目;此外还可注释到56条代谢通路,涉及嘌呤代谢、碳代谢和丙酮酸代谢等物质代谢通路,以及甲烷代谢、氧化磷酸化和糖酵解/糖异生等能量代谢通路。上述结果表明相应的lncRNA可能通过cis作用调节上下游基因的表达,从而参与调控东方蜜蜂微孢子虫孢子中的物质和能量代谢以及细胞生命活动。进一步构建lncRNA-miRNA调控网络,分析结果显示MSTRG.3636.1、MSTRG.4498.1和MSTRG.4883.1可靶向结合4个miRNA（nce-miR-7729、nce-miR-7502、nce-miR-8639和nce-miR-8565）,说明此3个lncRNA可作为ceRNA在东方蜜蜂微孢子虫孢子中发挥潜在作用。LncRNA-miRNA-mRNA调控网络分析结果显示,三者之间形成较为复杂的调控网络关系,miRNA处于调控网络的中心并联系lncRNA和mRNA,nce-miR-7502和nce-miR-8639结合的mRNA最多,达到28个;与MSTRG.3636.1、MSTRG.4498.1和MSTRG.4883.1存在靶向关系的miRNA结合多个mRNA,表明上述3个lncRNA可能通过ceRNA机制发挥作用,从而影响东方蜜蜂微孢子虫孢子中的新陈代谢和生命活动。【结论】 lncRNA可能通过cis作用调控上下游基因的表达,以及作为ceRNA通过吸附miRNA间接影响靶基因的表达,从而参与调节东方蜜蜂微孢子虫孢子中的物质和能量代谢等基本生命活动。     

山茶蜂花粉粗多糖的脱蛋白研究

对山茶蜂花粉粗多糖的脱蛋白方法进行了初步研究.考察了不同体积乙醇沉淀多糖试样的效果和不同体积三氯乙酸沉淀多糖试样中蛋白质的效果,并经Sephadex G-75的洗脱.研究结果表明:乙醇体积为多糖液体积的3.5倍时,沉淀效果最好;多糖液中加入等倍体积的10%三氯乙酸时,脱蛋白效果最佳;多糖经Sephadex G-75的洗脱,出现两个洗脱峰.     

山茶蜂花粉多糖提取工艺的研究

采用正交实验设计,优化提取工艺条件.考察了超声波处理时间、提取温度、提取时间、料液比对多糖提取得率的影响.结果表明,提取温度、超声波处理时间和提取时间对多糖提取得率影响极显著.最终确定山茶蜂花粉多糖的最佳提取条件为:超声波处理30 min,提取温度100℃,提取时间2 h,料液比1:8.     

蜂胶乳化工艺的研究

以蜂胶乳剂的透光率和乳化黄酮含量为指标,在乳化温度50％、乳化剂用量2％（V／V）、搅拌时间2h等乳化约束条件下,探讨吐温-40与吐温-60的不同组合比例对蜂胶乳剂影响规律,确定二者的最佳比例;采用二次正交旋转组合试验方案,分别建立蜂胶乳化工艺中乳剂透光率Y1、乳化黄酮含量Y2与乳化温度X1、超声时间X2、搅拌时间X3的数学回归模型（Y1=80．08＋0．76X1＋0．58X2＋0．94X3;Y2=36．48＋0．66X2＋1．21X3）,置信度均达95％。