简述ELISA法检测要点

<正>1标本的采取和保存可用作ElISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便     

唐鱼β-肌动蛋白基因启动子的分离及其驱动活性的检测

利用PCR技术克隆唐鱼（Tanichthys albonubes）β-actin基因。所克隆的β-aetin基因片段为1464bp，包含长为1374bp的启动调控区和90bp的部分开放阅读框。启动调控区包括105bp的β-actin基因上游调控序列、第一个外显子和第一个内含子。上游调控序列中含有对转录起重要作用的CAAT Box、TATA Box、CArG Box等元件。将唐鱼β-actin启动调控区克隆到红色荧光表达载体pDsRed2-1上，并显微注射到唐鱼受精卵中，荧光显微镜观察红色荧光蛋白（RFP）的表达。结果表明，RFP在转基因唐鱼中的表达阳性率较高，最高可达51．8％，且RFP的表达水平较高。PCR检测转基因唐鱼的部分器官组织，在被检组织器官中均能检测到外源RFP基因；而RT-PCR以及Southern blot验证显示RFP mRNA的表达有所不同；Southern blot检测肌肉组织基因组DNA，可见比阳性载体大的杂交条带。说明所检测的组织中已发生外源基因RFP的整合，但有些组织存在表达水平较低或者不表达的现象。本实验分离到的β-actin基因启动子序列具有有效的驱动功能，可启动外源基因在唐鱼体内的高效表达，从而为下一步进行功能基因的转化研究奠定基础。     

不饱和脂肪酸对黄鳝部分非特异性免疫和代谢指标的影响

在不含脂肪酸的黄鳝基础饲料中,按正交法[L9（3^4）]分别添加亚油酸（C18：2n-6）、亚麻酸（C18：3n-3）和EPA＋DHA（C20：5n-3＋C22：6n-3）,人工投喂饲养野生黄鳝（Monopterus albus）,31d后测定实验黄鳝血清溶菌酶（Lysozyme,LSZ）、总超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（Catalase,CAT）及丙二醛（Malondiadehyde,MDA）含量和血细胞吞噬活性。评价实验组及对照组的非特异性免疫水平、自由基（Free radical,FR）代谢以及脂质过氧化状态。采用SPSS11.5软件,Duncan多重比较实验组间差异。实验结果显示,实验组血清LSZ活性均有不同程度的提高,最高为94.90U/mL（P〈0.05）;血细胞吞噬率为2.6%-11.47%,吞噬指数介于0.02-0.227之间,实验组比对照组血细胞吞噬率和吞噬指数显著提高（P〈0.01）;血清SOD及CAT活性分别在116.95-333.44U/mL及9.48-17.81U/mL之间,无显著差异（P〉0.05）,但MDA含量比对照组有不同程度的下降,其中第4组MDA为6.48nmol/mL,有极显著差异（P〈0.01）。结果表明：添加不饱和脂肪酸后,黄鳝血清LSZ活性和血细胞吞噬能力增加最明显的组合为C18：3n-3、C18：2n-6和EPA＋DHA,添加量分别为1.30%、1.55%和0.25%,可显著增加黄鳝非特异性免疫功能,而此时血清中FR代谢水平处于相对平衡状态。     

复方核酸制剂干扰素诱导剂疫速克

疫速克是以多聚肌苷酸、多聚胞苷酸配对形成的双链寡聚核苷酸为主要成分，辅以专用稳定剂和特异性免疫增强剂精制而成的核酸制剂，它主要作用于动物机体的非特异性免疫系统，刺激机体产生高水平的内源性干扰素，抑制病毒复制，清除体内病毒，是一种干扰素诱导剂，在兽医临床上对各种病毒性感染都有确切疗效。     

酶联免疫吸附分析法检测克仑特罗时假阳性问题初探

以麻黄碱作为实验药物 ,对ELISA法检测克仑特罗的非特异性反应作了初步探讨。实验结果表明 ,结构中含有苯乙胺醇基团的麻黄碱能导致假阳性结果 ,并提示其它结构中含有苯乙胺醇基团的药物有可能导致假阳性结果     

猪应激对猪生长发育的影响及控制对策

应激是机体对各种非常刺激产生的全身非特异性应答反应的总和,能引起动物应激反应的各种环境因素统称为应激源。夏季高温酷暑、冬季天寒地冻，都会致使空气中的水蒸气含量、温度及湿度等发生巨大的变化,影响猪的生长环境，并决定着动物的生理过程和健康表现,使猪的生长、饲料转化率、营养代谢及繁殖机能等受到一系列的损伤。[第一段]     

虫草培养基残余体在中华绒螯蟹饲斗中的适宜添加量

在基础饲料中分别添加0.25%、0.5%、1.0%、2.0%、4.0%、8.0%、16.0%的虫草培养基残余体(简称虫草基),饲喂规格为(4.0±1.o)g的中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)75 d,通过测定其生长及非特异性免疫指标,以确定虫草基的适宜添加量.结果显示:与基础饲料组比较,0.5%和1....     

利用虫体蛋白特异性区分三种象虫

本文报道了利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和凝胶渗透液相色谱法（GPC）分别对3种象虫虫体蛋白进行分离分析。初步分析结果表明：凝胶电泳法具有较高的分辨能力，电泳图谱能明显地区分3种象虫；凝胶渗透液相色谱法分析结果无差异，但对3种象虫虫体蛋白的胰蛋白酶水解液的分离结果有明显的区别。     

动物免疫防控中存在的问题

一、未普及免疫监测致使免疫时机不科学 导致目前畜禽传染病频发,免疫失败的重要原因之一就是缺乏科学简便、易于推广的免疫监测与诊断技术.生产中仅凭动物日龄或经验而制定的免疫程序必然带有极大的盲目性和投机性,其结果一是可能在动物机体特异性抗体尚处于较高水平时进行免疫接种(超前),导致疫苗抗原被过度中和,不但无法诱生高水平的二次应答抗体,反之使原有抗体水平降低,造成动物机体处于人为的免疫空白敏感期内;     

微生态制剂对凡纳滨对虾血清中非特异性免疫因子的影响

研究了不同配方微生态制剂对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)血清中非特异性免疫因子的影响效果,测定了对虾血清中酚氧化酶、超氧化物歧化酶、溶菌活力.结果表明,试验组各项指标均优于对照组,表明所筛选的微牛态制剂能有效增强对虾的非特异性免疫功能.