ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较

比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体.将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14 d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21 d攻击狂犬病毒BD06株.结果表明,两种方法检测结果差异不显著(p≥0.05,p=0.19),FAVN、ELISA法检测狂犬病抗体与攻毒试验结果的阳性符合率均为100%.     

免疫层析试纸条检测口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体的研究

为建立口蹄疫(FMD)快速检测方法,本研究以纯化的FMD病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC作为捕捉抗原.金标FMDV抗原作为金标试剂,建立了检测FMD NSP 3ABC抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS).应用FMD ICS试验与UBI FMD NSP酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对反刍动物、猪的FMD标准阳性血清的不同滴度进行测定,结果表明ICS在检测反刍动物血清时的检测下限(1:64)与ELISA(1:128)接近,而检测猪血清时的检测下限(1:8)低于UBI NSP-ELISA试剂盒(1:64).同时用ICS和UBINSP-ELISA检测313份牛血清和111份羊血清,结果ICS检测牛血清时的敏感性和特异性分别为81.81%和96.69%,检测羊血清时敏感性和特异性分别为88.88%和95.10%;ICS与UBI NSP-ELISA用于检测牛血清时符合率为95.52%,用于检测羊血清时的符合率为94.59%.结果表明ICS适合在基层单位或养殖场进行自行检测.     

鸡白痢沙门氏茵外膜蛋白C基因（OmpC）的克隆与表达

以鸡白痢沙门氏菌基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增得到1 026 bp的OmpC基因片段.将扩增的OmpC基因克隆至大肠杆茵-乳酸茵穿梭表达载体pW425et中,构建原核表达重组质粒pW425et-OmpC.将pW425et-OmpC转化至 thyA基因缺陷型大肠杆茵感受态E.coli X13中.SDS-PAGE分析可见1条约36 ku的融合蛋白.Western blot分析表明,该重组蛋白具有反应原性,本研究结果为pW425et-OmpC在乳酸茵中的表达提供了实验依据.     

捻转血矛线虫HLJ株15 ES抗原基因的原核表达

为了对羊源捻转血矛线虫(H.contortus)15 ES抗原基因进行原核表达,本研究利用RT-PCR技术从黑龙江省羊源H.contortus成虫总RNA中扩增得到相对分子质量15Ku ES蛋白基因(H15 ES),序列分析表明,其核苷酸序列与国外已发表的15 ku排泄分泌抗原基因的同源性为99.78%.将H15 ES克隆至pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-32a-H15 ES,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达蛋白相对分子质量约为35.2 ku.本研究为H.contortus病诊断抗原和保护性抗原的大量制备及H.contortus核酸疫苗的研究奠定了基础.     

奶牛粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达及其活性检测

为了表达奶牛粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)并对其活性进行检测.根据GenBank中登录的牛GM-CSF基因序列(U22385),设计一对特异性引物;采用RT-PCR方法,以LPS体外诱导的奶牛肺泡巨噬细胞为材料,从总RNA中扩增出奶牛GM-CSF cDNA基因,克隆到pGEM-T载体中,经酶切鉴定与序列测定,结果显示克隆的奶牛GM-CSF基因与GenBank中登录的牛GM-CSF基因序列的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.7%和99.3%.构建pET32a-GM-CSF原核表达重组质粒,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果显示重组蛋白大小约为35 ku.分别运用集落形成试验与MTT比色法测定重组蛋白活性,结果显示重组奶牛GM-CSF蛋白能够诱导粒细胞前体呈集落性生长并具有较强的体外增殖淋巴细胞的活性,为下一步临床试验奠定了基础.     

检测犬抗狂犬病毒抗体的胶体金免疫层析法的建立及应用

为建立一种简便快速的胶体金免疫层析方法(GICA)以用于检测犬抗狂犬病毒抗体,本研究运用间接反应一步法原理,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒用以标记抗犬IgG抗体形成金-抗犬IgG抗体复合物,制成金标结合垫,加上包被有狂犬病毒糖蛋白的硝酸纤维膜,即制成胶体金免疫层析试纸条.样品中狂犬病?　 毒抗体与金标记抗体结合后沿硝酸纤维素膜移动,与膜上的糖蛋白特异结合形成肉眼可见的红色线条.试验结果显示,GICA试纸条与抗狂犬病毒抗体有特异性反应,与犬瘟热病毒、犬细小病毒等的抗体无交叉反应;GICA与标准ELISA法比较的总符合率为99.4%.结果表明,GICA试纸条检测抗狂犬病毒抗体特异性强、成本低,操作简便,不需任何仪器,特别适用于野外以及现场使用.     

禽流感免疫监测中应注意的几个问题

禽流感对养禽业的危害十分严重,疫苗免疫是目前预防和控制禽流感发生的最有效途径,免疫后抗体水平的高低直接关系到实际的免疫效果,现主要借助于抗体监测来了解或考核免疫效果。因而,免疫抗体监测的准确性、有效性、可靠性、代表性等对禽流感防控工作起着非常关键的作用。笔者根据自身的工作经验认为以下几个问题在禽流感免疫监测中值得注意。     

如何搞好动物疫病监测工作

动物疫情监测实质是采用流行病学调查、临床诊断、采样检测等相结合的方法调查了解动物疫情的活动。重大动物疫情预警实质上是对各类重大动物疫情进行流行病学调查和对动物群个体免疫率抽查、免疫抗体监测、病原学检测、动物卫生组织体系运行情况、候鸟迁徙规律和周边国家或地区重大动物疫情的风险进行评估和预报。     

溢多酶在生长肥育猪饲养中的应用

1引言 近年来,酶制剂作为一种绿色促生长添加剂,在动物生产中得到了广泛应用。在日粮中添加一定比例的复合酶制剂,能有效改善动物对饲料中蛋白质、淀粉的消化利用,以及对纤维素、半纤维素、果胶等植物细胞壁材料的消化吸收,从而提高动物增重和饲料利用率,减少粪尿排泄量,具有一定的经济效益和环保效益。     

惠州市鹌鹑新城疫HI抗体的初步监测

采用微量HI的检测方法,对惠州市10个乡镇58个鹌鹑场的311份血清进行了新城疫HI抗体的检测,结果：47个鹌鹑场的HI抗体为阴性,占被检场的80．13％;25份血清检测出新城疫HI抗体,检出率为8．04％;其中HI抗体≥5log2份数为13份,HI抗体≥5log2样品百分率为4．18％。