鹿结核病的诊断方法研究进展

鹿结核病是由结核分枝杆菌引起的鹿的一种慢性、消耗性传染病,广泛流行于世界各地,几乎每个国家的鹿场都曾发生过结核病或曾经检出过结核病菌.鹿结核病目前尚无规定性的诊断方法,本文对鹿结核病的诊断方法研究进展作综述,作为进一步研究发展鹿结核病的诊断方法的借鉴.     

家禽mtDNA遗传多样性和分子进化研究进展

20世纪60年代,Mnass和Snass在鸡胚中发现线粒体DNA,随着分子遗传学、分子生物学的迅速发展以及PCR技术和测序技术等研究手段的应用.至今,科学家已测定了人、牛、猪、马、驴、鸡、北京鸭等多种动物的mtDNA全序列.线粒体DNA作为分子标记因其序列容易测定、进化速度快、在群体内变异大、极少发生重组等特点,目前已广泛应用于家禽遗传多样性、分子进化、系统发育等研究领域,并取得了一些骄人的成果.     

饲料中牛羊源PCR法的对比试验与影响因素

应用PCR法监测反刍动物饲料与动物源性饲料中的牛羊成分,是当前一项行之有效的检测方法,是防止疯牛病等烈性传染性疾病的发生与流行,保障市场上牛羊肉食品的质量安全,促进草食动物养殖进一步发展的重要措施。但是,由于各种检品的成分差异性较大,样品的均匀度不高,待检样品的取样量与检测值的相关性不强。为此,2008年和2009年,我们在对牛羊饲料与动物源性饲料中牛、羊成分采用PCR法进行检测的同时,进行了不同称量对检测值的影响和不同检测方法间的对比检测与研究。现将试验与检测的中的有关情况简要介绍如下。     

中国砂梨7个自交不亲和新基因的分离与测序

S-RNase是配子体自交不亲和植物雌蕊的基因产物，它降解具有相同基因型的花粉mRNA或rRNA．导致植物的自交不亲和．借鉴日本梨S—RNase基因的分析方法．对中国砂梨5个品种的基因组DNA进行PCR—RFLP系统检测和DNA序列分析，从中发现了7个新的S—RNase等位基因，分别命名为S11-RNase、S12-RNase、S13-RNase、S14-RNase、S-15RNase、S16-RNase和S25-RNase基因，其部分序列已登录到GenBank．     

菜豆萎蔫病菌的PCR检测技术

根据在GenBank已登录的萎蔫短小杆菌(Curtobacterium flaccumfaciens)的基因间重复序列，用DNAman5．0软件比较同源性，设计了一对引物CffF1和CffR2，并以菜豆萎蔫病菌的基因组DNA为模板进行扩增，得到了一段长280bp的PCR特异产物。参试的其他属如棒形细菌属(Clavibacter)、节杆菌属(Arthrobacter)、拉氏杆菌属(Rathayibacter)、红球菌属(Rhodococcus)细菌和萎蔫短小杆菌的其他致病变种(Cur．f.pv．oortii、Cur.f.pv．poinsettiae、Cur．f.pv．betae)，以及其他植物病原细菌的基因组DNA均无扩增产物。该检测方法特异性强、灵敏度高，在100Pg的基因组DNA浓度下仍能检测到很强的条带。     

应用K88-K99 PCR试剂盒检测大肠杆菌研究

用研制的K88一K99 PCR诊断试剂盒对湖北省和江苏省的5个猪场238个病猪粪便进行了检测。扩增结果是K88检出率92．0％(219／238)；K99检出率89．1％(212／238)；阳性对照检出率100％，阴性对照未扩增到目的DNA片段。结果表明，运用PCR试剂盒检测具有快速、特异的优点，可同时处理大量样品，且可直接对粪便样品进行检测，值得进一步推广。     

应用RT-PCR技术快速检测鉴定猪瘟病毒

根据所有已报道的猪瘟病毒株（HCV）和牛病毒性腹泻病毒株（BVDV）的序列设计了3条引物Pa,Pb,Pc。应用RT-PCR技术，引物对Pa/Pb从猪瘟HCLV株，猪瘟Thiveral株，3株猪瘟野毒株都扩增出了预期185bp的片断，Pa/Pc从BVDVOregonC24V株中也扩增出了240bp的片断，而Pa/Pb与牛睾九原代细胞，PK-15细胞，BVDVOregonC24V株均无反应，Pa/Pc也不与所试验的5株猪瘟毒株反应。采用多重PCR可以从同时含有HCV和BVDV核酸的样品中扩增出各自的特异性条带。针对猪瘟兔化弱毒疫苗株（HCLV）的特异性插入序列。设计了引物Pr,Pra,Prb，可以从HCLV细胞毒或用HCLV人工感染的兔脾组织毒中扩增出预期200bp的片断，而Pr,Pra,Prb与猪瘟Thiveral株和3株猪瘟野毒株均不反应，通过含毒量梯度试验，得出了RT-PCR可检测猪瘟病毒量的下限为200RID或200TCID50。     

用于PCR分析的水稻DNA简易提取法——CS法

以PCR技术为基础的DNA分子标记是迄今在作物转基因检测、标记辅助选择、农作物品种纯度鉴定等方面最具应用前景的分子标记技术，而快速、简易、低成本的DNA提取方法是其中的关键因素之一。本实验以水稻黄化苗为材料，用NaOH溶液抽提DNA，对其用于PCR技术的DNA标记的效果进行了分析。结果发现，用O．5M．NaOH对黄化苗进行直接处理，并用等量1M Tris—HCI进行稀释、中和，离心所得的上清液即可直接用于各种：PCR扩增和随后的DNA标记鉴别，包括转基因PCR片段检测、微卫星标记多态性分析(琼脂糖电泳法或毛细管电泳法)，这样提取的DNA可以在短期内保存，在PCR分析中其效果与用常规CTAB法提取的DNA相当。     

鸭源致病性大肠杆菌工型菌毛pilA基因序列测定及生物信息学分析

据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列，由Oligo 6．0设计一对引物，以提取的鸭源致病性大肠杆菌基因组为模板，进行PCR扩增，获得了5株鸭源致病性大肠杆菌的pilA基因，序列测定和生物信息学分析表明：鸭源致病性大肠杆菌pilA基因核苷酸序列长度为549bp，编码182aa，与人源、鸡源及猪源大肠杆菌pilA基因之间核苷酸同源性为87．3％～100．0％，氨基酸同源性为87．5％～100．0％。对不同宿主来源大肠杆菌pilA基因所编码蛋白的二级结构、亲水性、抗原性、抗原表位进行预测分析比较，结果显示Ⅰ型菌毛间具有一定的结构相似性，并存在一定的共同抗原位点；系统进化分析表明，各菌株之间的pilA基因遗传相关性与其宿主来源及血清型之间没有严格的相关性。     

怎样使用家电才安全（下）

从家用电器产品本身来说．一般在设计和制造上对安全都做了充分的考虑，以确保人身安全。如限制产品对地的泄漏电流，将外壳接地，保证足够的漏电距离和电气间隙，采用双重绝缘或加绝缘的结构。使用安全电压，保证电源连接线的耐弯折能力，以防止被扭折或脱接．防止因电容器放电而发生触电危险等。所以新购买的电器只要正确使用，一般不存在不安全的问题，存在问题的是旧家电。目前。我国农村和城镇低收入家庭有相当一部分电器使用年限过长．超出它的正常使用寿命。一般电器超过使用寿命后，电器元件会老化。电器内部绝缘不良．使用时经常出现故障，一些消费者用拍拍打打的方法来解决，这样．电器随时可能发生外壳带电现象，给使用者人身安全带来伤害。因此，消费者应有“家电使用寿命”的概念，[第一段]