不同溶剂及配比对轮虫脂肪提取的影响

研究了提取溶剂、次数以及溶剂的配比对轮虫脂肪提取的影响。分别用氯仿甲醇体积比为2:1、1:1、1:2,苯石油醚体积比2:1、1:1、1:2,丙酮石油醚1:4、3:7、2:3作为提取溶剂,提取冻干轮虫(Brachionus rotundiformis)样品脂肪,测定脂肪含量与皂化值,筛选得出3种提取溶剂的最佳配比;比较提取次数为1～3次间脂肪含量的差异,得出最佳提取次数;将3种最佳配比与索氏提取法(国标)提取样品脂肪进行比较,测定脂肪含量与皂化值。结果显示,在冻干轮虫脂肪提取中,提取次数对样品脂肪含量没产生显著影响(P>0.05);3种溶剂的最佳配比分别为氯仿甲醇2:1、苯石油醚1:2、丙酮石油醚2:3;其中丙酮石油醚2:3处理组的脂肪含量和皂化值分别达到9.71%和198,均显著高于索氏提取法(国标)和其余处理组(P<0.05)。故轮虫脂肪提取1次为宜,最佳溶剂及配比为丙酮石油醚体积比2:3,本方法具有提取高、时间短、安全性高、成本低等优点,具有一定的实际应用价值。     

过硫酸氢钾对贝类育苗水体中溶藻弧菌的杀灭效果

本文以海蚌育苗池海水中的溶藻弧菌作为研究对象,探讨过硫酸氢钾对溶藻弧菌的杀灭效果。通过单因素试验和3因素3水平正交试验探讨不同温度、不同过硫酸氢钾浓度、不同菌液浓度对抑制溶藻弧菌效果的影响。从单因素试验结果可知,当温度处于20～30℃、过硫酸氢钾浓度20～40 mg/L、菌液浓度10⁵～10⁷CFU/mL时,杀菌抑制效果显著;正交试验结果 显示,温度25℃、过硫酸氢钾浓度40 mg/L、菌液浓度10⁵CFU/mL,是过硫酸氢钾溶液对溶藻弧菌杀灭效果最佳的条件;药物浓度11 mg/L时,灭菌率≧99%;药物浓度大于9 mg/L时,药物作用时间1～24 h的杀菌率差异均不显著,过硫酸氢钾药效可以维持24 h。     

低氧胁迫对九孔鲍免疫防御因子的影响

为了解低氧胁迫条件下九孔鲍免疫防御因子的变化及机体抗病力变化, 将九孔鲍置于不同的溶解氧环境中, 观测相关免疫因子变化。结果显示, 在水温为(22.1?1.3) oC, 盐度为30.72?0.54, pH值为8.20?0.14的海水环境中, 溶解氧含量由(7.49?0.14) mg/L下调至(2.53?0.16) mg/L后120 h内, 平均体质量为(14.25±2.21) g的九孔鲍未见死亡, 而每只鲍注射5.0?10⁵ CFU 副溶血弧菌后120 h内实验鲍的累计死亡率高达91.11%?7.70%, 比对照组(11.11%?3.83%)累计死亡率高出80%, 血淋巴抑菌清除率下降至?(3 340.47%?298.57%), 显而易见, 低氧胁迫使得九孔鲍拮抗副溶血弧菌感染的抵抗力显著下降。低氧(2.53?0.16) mg/L胁迫下, 九孔鲍血淋巴细胞数量(THC)下降30.62%?4.87%、血淋巴细胞吞噬率下降62.77%?5.79%、呼吸爆发产生的超氧阴离子数量下降22.21%?5.89%。低氧胁迫下九孔鲍血淋巴细胞内MPO活性上升(9.63%?7.59%)~(22.90%?13.73%)、CAT活性提高(7.68%?6.83%)~(56.28%?13.96%), 反映出低氧胁迫下九孔鲍体内应激反应产生的物质氧化加剧, 血淋巴细胞内产生大量的活性氧自由基。溶解氧含量由(7.49?0.14) mg/L下调至(4.51?0.12) mg/L后九孔鲍已明显处于低氧胁迫和应激反应状态, 120 h内的累计死亡率达到37.78%?3.85%, 血淋巴抑菌率下降至883.56%?123.22%; THC、血淋巴细胞吞噬率、呼吸爆发产生的超氧阴离子O₂^- 数量等最大降幅分别达到12.51%?6.59%、21.90%?15.84%、12.93%?5.74%; MPO活性在原有水平的?(10.61%?4.20%)~(7.13%?6.45%)之间波动, CAT活性在?(5.17%?18.08%)~(16.26%?10.85%)之间变化。     

转座子mini-Tn10介导的运动突变对溶藻弧菌毒力的影响

采用转座子mini-Tn10/Km构建了致病性溶藻弧菌的突变库,采用半固体双层平板初筛到73株运动缺陷突变株,初筛的突变株纯化及重复筛选后获得运动性缺陷表型稳定的突变株ND-01MM,Southern鉴定确定其为单位点插入。野生型菌株ND-01和运动缺陷突变株ND-01MM对致病性溶藻弧菌的天然宿主大黄鱼粘液的趋化、粘附以及在大黄鱼吞噬细胞内存活能力等生理功能的比较研究发现,溶藻弧菌运动缺陷后趋化及粘附能力均极显著下降(P<0.01),但在吞噬细胞内的存活能力则与野生型菌株差异不显著(P>0.05)。采用腹腔注射和浸泡两种方式感染大黄鱼,结果发现运动缺陷对浸泡感染的影响较为明显,但对腹腔注射的感染方式影响不大。     

天津淡水池塘设施化集约高效养殖水生生物特征

2011年5月天津市水产研究所、天津市宁河县畜牧水产局共同承担了天津市水产局"池塘鱼箱集约高效养殖关键技术研究"项目.项目在宁河县冻棘坨镇小东庄村一个0.18 hm2,水深2.8m的池塘,进行单池水循环系统鱼箱集约高效养殖,并排放置11个鱼箱,每个鱼箱8 m3,共11个鱼箱,串联排列.     

从进境的海产品中检出副溶血性弧菌

<正>副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)为革兰氏阴性、多形态细菌,呈杆状或稍弯的弧状。在不同培养基上生长的细菌形态差异很大,一般是两极浓染,多单在,无芽胞,具有单鞭毛,能活泼运动。     

湛江市海水鱼中副溶血性弧菌的分离 鉴定及致病性分析

为了解湛江市海水动物副溶血性弧菌的带菌感染率及其致病性,从湛江市水产品市场随机采集海水鱼样品30份,根据中华人民共和国国家标准和进出口标准规定的副溶血性弧菌的检验方法,结合科玛嘉弧菌显色培养基分离试验,对采集样品进行了副溶血性弧菌的分离与鉴定;并用神耐川试验、溶血试验和脲酶试验检测了分离菌株的致病性。结果显示：30份海水鱼样品分离得到10株副溶血性弧菌,检出率为33.33%。其中,神耐川试验溶血强阳性5株,弱阳性2株,阴性3株;在3.5%NaC l兔血琼脂平板上,本试验分离到的10株副溶血性弧菌均呈现较强溶血作用;10株分离菌株脲酶试验均为阴性。     

溶藻弧菌生物被膜的特性与相关基因的研究

建立溶藻弧菌（gibrioaigino／yticus）的生物被膜（BF）体外形成模型,用银染法观察检测溶藻弧菌HY9901生物被膜的形成;同时研究温度和消毒剂对HY9901的游离（FC）细菌和具有生物被膜（BF）的细菌的影响。实验结果表明,溶藻弧菌HY9901株可以形成BF,而非致病株ZJ017不形成BF。HY9901株的BF细菌经85℃30min、-20℃80d、0．01％新洁尔灭处理后均有存活,而游离（FC）细菌则无存活细菌。根据已发表的哈氏弧菌Lux R基因核酸序列,设计并合成了一对引物,对溶藻弧菌HY9901株的基因组进行PCR扩增和测序分析,扩增出了520bp的核苷酸片段,该片段与已发表的哈氏弧菌Lux L基因的同源性达95％,而非致病性菌株ZJ017株则扩增不出该基因片段。     

水产品副溶血性弧菌不同增菌液增菌效果的比较

[目的]对用不同方法检测水产品副溶血性弧菌的不同增菌条件进行比较,以期寻找一种快速高效的增菌条件,为提高检测效率提供聋考依据。[方法]采用FDA、ISO、GB／T4789．7-2003、GB／T4789．7-2008、SN0173等方法中的培养基配方,时副溶血性弧菌进行杂种培养,并通过生长曲线测定方法比较验证使用培6-基的增菌效果。[结果]结果表明,含3％NaCl的碱性蛋白胨具有最好的增菌茵效果。[结论]该结果对于检测水产品中副溶血性弧菌具有重要的指导意义。     

副溶血弧菌极性鞭毛超微结构的电镜观察

为了观察副溶血弧菌从液体到固体表面的环境过渡中极性鞭毛的形态结构,选用副溶血弧菌的临床分离株SH112为研究对象,以副溶血弧菌ATCC33847为参考菌株,采用磷钨酸负染色法,通过高分辨透射电子显微镜观察细菌极性鞭毛的超微结构。结果显示:在这个过渡时期,副溶血弧菌的极性鞭毛有特殊的结构,包括不完整外鞘,"帽"状结构,以及长短和粗细变化等。推测这些结构的形成与环境的诱导以及鞭毛系统的调控机制有关。