猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆及原核表达载体的构建

参考GenBank上公布的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）S基因B、C抗原位点序列,应用Primer6．0设计一对含酶切住点的引物,用于RT—PCR扩增B、C抗原位点目的片段,将扩增产物连接于peasy—T克隆载体上,构建克隆载体,用EcoRⅠ和XhoⅠ对表达载体PET-32a（＋）和重组质粒进行酶切,将酶切产物亚克隆至PET-32a（＋）多克隆位点上,连接、转化至BL21（DE3）,构建B、C位点的原核表达载体,并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。所扩增的目的片段的大小为357bp,与原核表达载体连接后,经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,说明成功地构建了TGEVS基因B、C抗原位点的原核表达载体。TGEVS基因B、C抗原位点原核表达载体的成功构建,为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础。     

动物性食品中兽药残留与分析（下）

绝大多数兽药排入环境后仍然具有活性，会对土壤微生物、水生生物及昆虫等造成影响。HamscherG等报道．在对用动物排泄物施肥的土壤0～40cm的表层检测时，发现土壤中有土霉素和金霉素的残留．其浓度分别高达32．3mg／kg和264mg／kg。Strong L等报道几种兽药（阿维霉素、伊维霉素和美倍霉素）能在粪便中保持8周活性．对草原中及堆肥周围的多种昆虫都有强大的抑制或杀灭作用。兽药进入环境后，在多种环境因子的作用下．可产生转移、转化或在动物中蓄积。     

氨苯磺胺多克隆抗体的制备

采用重氮化法将氨苯磺胺与人血清白蛋白偶联形成免疫原，免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。通过紫外扫描分析，免疫原中药物分子与蛋白质分子的偶联比为32：1，改良辛酸-饱和硫酸铵法纯化抗体，多克隆抗体效价达1：10^5，间接ELISA建立的氨苯磺胺检测的线性范围为1ng／mL～100μ/mL，70％抑制率可检测最低浓度为0．09μ/mL，以抗体与氨苯磺胺的反应率为100％，抗体与其他7种磺胺药交叉反应率很低。结果表明，制备的氨苯磺胺多克隆抗体具有很高的特异性，可用于动物性食品中氨苯磺胺残留的检测。     

磺胺甲噁唑抗原合成及其抗体的制备

采用重氮化法将磺胺甲噁唑(SMZ)与人血清白蛋白偶联形成免疫原,免疫大白兔制备多克隆抗体。通过紫外扫描和高效液相色谱分析偶联物,免疫抗原的偶联率为19∶1,改良辛酸-饱和硫酸铵纯化抗体,多克隆抗体效价达1∶105,间接酶联免疫吸附试验建立的SMZ检测的线性范围在0.1ng/mL~10μg/mL之间,50%抑制率检测限为22.53ng/mL,抗体与磺胺甲噁唑交叉反应率为100%,与其他7种磺胺药交叉反应率很低。表明制备的磺胺甲噁唑多克隆抗体具有很高的特异性,可用于SMZ在动物性产品中残留的检测。     

畜产品中雌二醇检测方法及其研究进展

雌激素包括雌二醇、雌三醇、雌酮，雌二醇(E2)是3种雌激素中活性最强的一种，具有很强的生理功能，对畜禽有广泛的药理作用，但是在动物食品中残留会危害人类健康。研究发现人体中雌二醇含量水平与某些肿瘤，如乳腺癌、子宫癌、肝癌等有显著的相关性。就雌二醇的检测方法和抗体的研究进行简述，为建立雌二醇的ELISA检测方法奠定基础。     

血浆中连翘酯苷高效液相色谱检测方法的建立

为建立测定血浆中连翘酯苷含量的高效液相色谱方法,将血浆样品经去蛋白处理,以乙腈-水-醋酸(18∶82∶0.41)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为332 nm,柱温为25 ℃,进样量为10 μL,经Angilent ZORBAX SB-C18(5 μm×4.6 mm×250 mm)色谱柱分离,进行色谱分析。结果表明,本方法连翘酯苷的血浆浓度在0.05~200 μg/mL内线性关系良好,精密度和重复性试验RSD均小于5%。本方法简便、灵敏、重现性高,可用于连翘酯苷的药动学和相对生物利用度的研究。     

猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点的克隆及原核表达载体的构建

【研究目的】对猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点进行克隆和原核表达载体的构建。【方法】参考GenBank上公布的TGEV S基因A抗原位点序列,应用Primer6.0设计一对含酶切位点的引物,用于RT-PCR扩增A抗原位点目的片段,将扩增产物连接于paesy-T克隆载体上构建克隆载体,用EcoR I和Xhol I对表达载体PET-32a（+）和重组质粒进行酶切,将酶切产物亚克隆至PET-32a（+）多克隆位点上,连接、转化至BL21(DE3),构建A位点的原核表达载体,并对阳性重组质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。【结果】所扩增的目的片段的大小为534bp,与原核表达载体连接后,经核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其它猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,说明成功地构建了TGEV S 基因A抗原位点的原核表达载体。【结论】TGEV S 基因A抗原位点原核表达载体的成功构建,填补了中国国内单独针对此位点进行研究的空白,也为TGEV诊断方法的建立提供良好的技术基础。     

高校研究生教育教学改革的思考

研究生教育是高校中的更高层次的教育阶段,突破传统的研究生教育教学模式,探索新的适应现代高校研究生教育的教学模式,对高校研究生教育教学改革具有重大意义。本文就高校研究生教育教学改革的思考进行综述。     

张家口市近年交通噪声现状及对策研究

张家口市的噪声源主要有生活噪声源、工业噪声源和交通噪声源三种,其中交通噪声是噪声污染的主要来源.近年来城市机动车拥有量的迅速增加,是导致部分路段交通噪声呈逐年上升的直接原因,张家口市三面环山,道路多弯曲狭窄,大部分机关、企事业单位、居民集中在老城区,且旧城改造困难也是导致交通噪声呈逐年上升的原因.通过大力发展公共交通、加强对车辆的管理和控制、加快老城区改造力度、加大新区建设力度、建设声屏障等有效措施可大大降低交通噪声,改善城市居住、出行环境.     

基于10kV配电网线路的建设与改造分析

随着时代的发展和经济的进步,人们的工作越来越复杂,生活越来越丰富,所以对于用电的要求也就越来越高,为了促进国家经济发展,提供高电网企业利润,并满足人民群众日常生活生产的用电需求,我们需要对10 kV配电网线路的建设与改造进行分析,以促进配电网线路的建设能够不断发展。