小麦根系在不同铁营养水平条件下的蛋白质组差异表达分析

为了探究小麦根际不同铁水平对根系基因表达的调控,采用小麦‘北农9549’为材料,进行缺铁胁迫和胁迫后恢复铁供应等不同处理,用双向电泳的方法分离蛋白,对比分析不同处理间根系蛋白质表达的差异。结果表明,缺铁处理植株与正常供铁的植株相比,缺铁条件下生长的小麦根系有137个蛋白点的表达水平变化具有显著差异（P<0.05）,其中76个蛋白点发生大于2倍的显著上调表达,另有61个蛋白点发生大于2倍的显著下调表达。上述经过铁饥饿的小麦根系恢复正常铁供应2周后,与自始至终正常供铁的根系相比,有150个蛋白点的表达水平变化具有显著差异（P <0.05）,其中78个蛋白点发生大于2倍的显著上调表达,另有72个蛋白点发生大于2倍的显著下调表达,本试验结果表明,缺铁会引起小麦根系表达大量特异性蛋白。     

棉铃虫氨肽酶N基因片段克隆、表达和内源蛋白检测

氨肽酶N（APN）是苏云金芽孢杆菌杀虫毒素Cry在昆虫中肠中的一个重要受体。研究氨肽酶N在昆虫中肠中的分布特征对于阐明Cry毒素的杀虫机理和昆虫对Cry毒素的抗性机理具有重要的意义。通过RT-PCR的方法从棉铃虫中肠上皮细胞中克隆得到氨肽酶N的基因片段APN1551,并诱导表达纯化得到其重组蛋白APN517。以此蛋白为抗原,制备其抗血清。用该抗血清能检测到棉铃虫中肠上皮细胞中的APN蛋白。为研究Cry毒素的作用机理奠定基础。     

GC/MS分析方法在食品农残检测中的应用

GC-MS具备灵敏度高、定性准确、多残留可同时检测等优点,在农残检测中得到了广泛的应用。通常GC/MS分析方法包括样本中残留农药的提取、净化以及检测。常用的样品预处理方法有液—液萃取法、固相萃取法(SPE) 、固相微萃取法(SPME)、凝胶渗透法（GPC）、超临界萃取法、磺化法、冷冻法、凝结沉淀法等。美国已开发了一种较为简便易行的QuEch-ERS样品前处理方法,建立了检测水果和蔬菜样品中251种农药及其代谢物的残留GC/MS检测方法。日本也开发了用GC/MS同时检测101种农药残留的快速检测方法。另外GC/MS也应用到了脂肪性食品]以及葡萄酒等食品中多种农药的检测。在中国,GC/MS技术仅用于结果的确认,尚未建立标准的利用GC/MS检测农药多残留的分析方法。     

绿肥还田对双季稻根际土壤产甲烷古菌群落结构的影响

利用PCR-DGGE技术及克隆文库构建方法研究,尿素、紫云英鲜草翻压还田、黑麦草鲜草翻压还田和不施氮肥4种处理对双季稻不同生育时期(早稻季:分蘖期,拔节期,成熟期;晚稻季:分蘖期,扬花期,成熟期)稻田根际土壤中产甲烷群落结构的影响。结果表明,双季稻不同取样时期和各处理中产甲烷古菌群落结构稳定且相似,早稻季和晚稻季的优势群落均为甲烷微菌目(Methanomicrobiales)、Rice Cluster I(RC-I)、甲烷鬃菌科(Methanosaetaceae)、甲烷杆菌属(Methanobacterium),但早稻季产甲烷古菌群落的Shannon-Weiner指数(H)和丰富度指数(R)整体低于晚稻季。紫云英和黑麦草鲜草翻压还田处理较尿素处理更为明显地提高了双季稻(一年)稻田根际土壤中产甲烷古菌群落的Shannon-Weiner指数和丰富度指数,但均暂未对产甲烷群落结构产生决定性影响。     

南瓜种质资源亲缘关系的RAPD分析

南瓜是国内外广泛栽培的重要蔬菜作物之一,其种质资源十分丰富。开展南瓜的遗传多样性和亲缘关系的研究,有利于了解南瓜遗传多样性的分布和种质间的遗传关系,促进南瓜种质的收集和有效利用。以不同来源地、不同生态型的南瓜种质资源为试材,用CTAB方法从南瓜幼嫩叶片提取基因组DNA,用长度为10个碱基的寡核苷酸作RAPD引物进行PCR扩增反应。从260个随机引物筛选出26个多态性引物,对76份南瓜种质资源进行扩增,共扩增出255条带,其中多态性带为207条,多态性百分率为81.18%。表明南瓜种质资源遗传多样性丰富。聚类分析将供试材料分为3大类:中国南瓜、美洲南瓜和印度南瓜,种间差异明显。     

牦牛IL-4基因的生物信息学分析

本研究旨在探索牦牛IL-4基因的结构及其功能,应用生物学软件对IL-4基因进行生物信息学分析预测.结果发现牦牛IL-4基因长度为571 bp,共编码135个氨基酸,其基因编码的产物呈亲水性,存在信号肽与跨膜结构域,二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主,三级结构以α-螺旋结构单元为主.研究结果对牦牛IL-4基因的结构和功能提供了理论依据.     

适于南瓜遗传多样性分析的RAPD引物筛选

采用CTAB法提取南瓜DNA基因组,优化的RAPD反应体系,对RAPD随机引物进行了筛选,从260条引物中筛选出多态性好、稳定性高的引物26条作为南瓜RAPD分析引物,为进一步进行南瓜遗传多样性分析提供依据.     

连作对西洋参根系生长及酶活性的影响

通过对连作后西洋参根系生长状况以及根系中防御酶活性的研究,旨在揭示连作对西洋参生长、生理的影响机制.在新地及种植过一年、二年、三年参地里播种西洋参,3个月后对西洋参根重、根系活力、根系中抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量等进行测定.结果表明:2年、3年、4年生地连作西洋参的根重依次是对照的0.76、0.83、0.68倍,差异显著(P＜0.05);根系活力分别是对照的1.30、1.35、1.65倍,差异显著(P＜0.05);APX活性分别是对照的3.52,0.25、0.12倍,差异显著(P＜0.05);CAT活性分别是对照的1.86、0.79、0.74倍,2年生地连作与对照差异显著(P＜0.05),3年、4年生地连作中与对照间无显著差异;POD活性分别是对照的2.22、2.50,1.43倍,2年、3年生地连作与对照问差异显著(P＜0.05),4年生地连作与对照无显著差异;GR活性分别是对照的2.57、2.75、2.41倍,差异显著(P＜0.05),GR在连作处理间无显著差异.SOD活性分别是对照的0.72、0.36、0.37倍,差异显著(P＜0.05);MDA含量分别是对照的1.05、1.06、1.18倍,2年、3年生地连作与对照无显著差异,4年生地连作与对照差异显著(P＜0.05).随连作年限的增加,西洋参的根重逐年下降;根系活力逐年升高;APX、CAT、POD、GR活性先升后降.GR处理问无差异.SOD呈现下降趋势.MDA在4年生地连作中有明显的升高.     

Advances of Researches on the Mechanism of Transgene Silencing in Transgenic Plants

转基因沉默是导致外源基因不能在转化植株中正常表达的重要原因。在此,从转录水平和转录后水平两个方面,综述了转基因植物中外源基因沉默的机制。DNA甲基化是引起外源基因沉默的主要原因。人们目前用以下几种模型来解释转录后水平基因沉默的机制,如RNA阈值模型、异常RNA和异位配对模型及双链RNA模型。对外源基因沉默机制的探讨是顺利开展植物基因工程的迫切要求,也将促进植物功能基因组学研究的进一步深入。