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利用杆状病毒表达系统对AsiaⅠ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)VP1基因在Sf9昆虫细胞中进行表达,为研究AsiaⅠ型FMDV VP1蛋白功能及建立AsiaⅠ型FMDV血清学诊断方法奠定基础。采用PCR方法从pGEM-T-Easy-AsiaⅠ型VP1质粒中扩增VP1基因,将其插入杆状病毒转座载体pFastBacHTA,构建的重组质粒pFastBacHTA-VP1再转入DH10Bac感受态细胞,经三重抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-VP 1,然后转染Sf9昆虫细胞。PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到Bacmid中,成功构建了杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1,SDS-PAGE和Western-blotting检测结果表明,VP1基因在Sf9昆虫细胞中表达出约26.5 ku的VP1蛋白。将可溶性表达的融合蛋白用Ni-NTA亲和层析方法进行纯化,通过ELISA分析,能特异性地检测出AsiaⅠ型口蹄疫病毒阳性血清。AsiaⅠ型FMDV VP1基因在杆状病毒表达系统中的成功表达为AsiaⅠ型FMDV VP1蛋白的抗原性及血清学抗体水平检测研究奠定了基础。 相似文献
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真菌聚酮化合物是一类重要的次生代谢产物,其结构和功能多样,生物学活性广泛.聚酮合酶(Polyketide synthase,PKS)是催化聚酮化合物合成的关键酶.近几年,随着基因组测序技术、分子生物学技术和遗传分析工具、表达宿主、重组酶制剂等的发展,真菌聚酮合酶基因的研究取得了许多新的进展.文章对近年来在真菌聚酮合酶基因获得、基因功能验证及真菌聚酮合酶基因工程方面的研究进展进行了综述,并对该领域的研究热点进行了展望. 相似文献
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生长激素是一种重要的垂体激素,主要参与身体生长和新陈代谢。在哺乳动物,克氏锥虫感染急性期的控制主要依赖于巨噬细胞活化细胞因子,为探索生长激素是否可有效治疗恰加斯病,试验研究了生长激素对克氏锥虫感染鼠的治疗效果,重点分析了其对寄生虫血症,NO、TNF-a、IFN-c浓度,心肌组织病理学变化及寄生虫负荷的影响。克氏锥虫雄性Wistar感染鼠每日腹腔注射生长激素,注射剂量为5ng/10g体重。与未处理组小鼠相比,生长激素处理组小鼠在感染急性期的血液锥虫数量显著减少(P0.05)。在试验感染急性期(感染后7、14、21d),与未处理组小鼠相比,生长激素处理组小鼠的NO、TNF-a、IFN-c浓度显著升高(P0.05)。心肌组织病理学观察结果表明,注射生长激素可减轻无鞭毛体负荷,减少炎性渗透和组织结构破坏。结果表明,生长激素可作为免疫调节剂来控制寄生虫复制,可与现用药物联合使用以减少恰加斯病的危害。 相似文献
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文章总结分析了张家口地区11个国家级贫困县开展的气象服务情况,从组织保障、基础建设、特色服务、典型事例及相关工作建议等几个方面做出了详细介绍。 相似文献
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