海水养殖技术问答——海水养殖技术（三）

十、如何防止养殖扇贝大量死亡?扇贝海上养殖常发生大量死亡现象。扇贝死亡前的症状，贝壳边缘缺刻不全，贝壳内面呈黄褐色，外套膜边缘向里萎缩，症状越重的个体萎缩越厉害，得病的个体虽已过了繁殖季节，但腹嵴内仍剩有大量的生殖细胞，雌雄易辨等。这些症状说明扇贝处于病态，是发生海上大量死亡的前兆。应立即分析病态的原因，如是养殖密度过大而引起的，     

体外培养菲律宾蛤仔外套膜细胞的增殖

以D-MEM和M199为基础培养基,对菲律宾蛤仔的外套膜进行了细胞培养,并以RNA/DNA比值作为评价细胞增殖的指标.结果表明:外套膜细胞增殖的主要形式是从组织块中迁出,培养前期细胞分泌旺盛,细胞在体外生长可达15 d;外套膜细胞在D-MEM中的生长优于M199;RNA/DNA指标与直观观察的细胞生长状况相吻合,利用这一指标,有助于客观评价体外培养菲律宾蛤仔细胞的增殖特性.     

Cu~(2+)对栉孔扇贝外套膜组织培养的影响

[目的]了解重金属对栉孔扇贝的毒理效应。[方法]在DMEM培养液中分别添加质量浓度为0.05、0.10、0.20、0.40 mg/L的Cu2+,以细胞迁出时间和组织块增殖状况为评价指标,研究Cu2+对栉孔扇贝外套膜组织培养的影响。[结果]栉孔扇贝外套膜在DMEM培养液中贴壁良好。培养至72 h时,Cu2+质量浓度为0.05 mg/L的实验组有游离细胞迁出,且组织块增殖情况良好。培养至89 h时,Cu2+质量浓度为0.10 mg/L的实验组有游离细胞迁出,且组织块增殖情况较差。随着Cu2+质量浓度的增大,细胞迁出所需的时间越长,组织块增殖情况越差。Cu2+质量浓度为0.40 mg/L的实验组,培养96 h时并没有游离细胞迁出。[结论]Cu2+质量浓度大于0.10 mg/L时对栉孔扇贝外套膜的组织培养有一定的抑制作用。     

三角帆蚌瘟病组织病理学动态变化

在人工感染三角帆蚌瘟病病料组织后第3、5、7、9、11天,运用光学显微镜和电子显微镜分别观察了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)外套膜、鳃和斧足的病理变化特征.结果表明,三角帆蚌瘟病病毒对3种器官组织有不同程度的破坏作用,外套膜和鳃的病变比较严重,斧足稍轻.光镜下,前5 d内各组织结构变化不大;从第7天开始,出现上皮组织细胞肿胀、排列紊乱、部分脱落甚至完全坏死等显著的病理变化.电镜下,前5 d细胞结构无明显病理变化,只出现了少量的病毒粒子;从第7天开始,病毒粒子数量增加,线粒体、内质网、核糖体等细胞器解体,细胞空泡化,但斧足的超微结构变化不明显.     

3种珍珠贝的外套膜小片外表皮细胞的超微结构

用透射电子显微镜对合浦珠母贝（Ｐｉｎｃｔａｄａｆｕｃａｔａ）、大珠母贝（Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｘｉｍａ）和企鹅珍珠贝（Ｐｔｅｒｉａｐｅｎｇｕｉｎ）的外套膜小片外表皮超微结构进行比较观察，发现都是单层柱状表皮，由３类细胞构成，即柱状表皮细胞、粘液细胞和嗜酸性粒分泌细胞。柱状表皮细胞是贝壳和珍珠组份的主要合成和转运者，据其结构和功能的差异可细分为Ａ、Ｂ、Ｃ３型。粘液细胞和嗜酸性粒分泌细胞呈杯状或不规则，体积巨大，细胞质稀少，核的形态亦不固定，前者的胞体全由电子透明泡占据，后者含有大量嗜酸性的电子稠密颗粒。这２类细胞的主要功能是参与物质转运，它们在邻近表皮的结缔组织中也有分布，可作变形运动穿越基膜进入上皮层。     

3种珍珠帆的外套膜小片外表皮细胞的超微结构

用透射电子显微镜对合浦珠母贝、大珠母帆和企鹅珍珠帆的外套膜小片表皮超微结构进行比较观察、发现都是单层柱状表皮，由３类细胞构成，即柱状表皮细胞，粘液细胞和嗜酸性粒分泌细胞。     

长牡蛎与海豆芽外套膜细胞超微结构的比较观察

以软体动物中贝壳成分为碳酸钙的长牡蛎（Crassostrea gigas）和腕足动物中贝壳成分为磷酸钙的鸭嘴海豆芽（Lingula anatina）为研究对象，借助组织学和透射电镜方法，分别对两个物种外套膜边缘区域和中央区域的细胞进行超微结构观察，发现长牡蛎和鸭嘴海豆芽外套膜中的细胞类型均包含柱状表皮细胞、电子稠密粒细胞和电子透明粒细胞，但是两个物种的柱状表皮细胞类型以及分泌细胞的内含物各不相同。长牡蛎柱状表皮细胞包括三类，主要分布在外套膜边缘区域的A型、主要分布在外套膜中央区域的B型以及很少存在的C型，细胞大小为7～15μm。海豆芽柱状表皮细胞则分为A’型，B’型和C’型，细胞大小为10～15μm。两个物种的分泌细胞都包含电子稠密粒细胞和电子透明粒细胞，海豆芽还包括一类含有板层小体的特殊分泌细胞。上述结果在一定程度上可以解释两者贝壳组成成分的差异，从而为研究腕足动物和软体动物贝壳的形成机制和矿化作用提供借鉴。