脊椎动物源细胞因子对合浦珠母贝外套膜细胞培养及其矿化功能的影响

筛选出能促进合浦珠母贝外套膜细胞培养及矿化功能的细胞因子,以作为优化本物种细胞培养基的参考,挑选三龄合浦珠母贝,获取其外套膜进行原代细胞培养。向各实验组细胞培养基中分别添加表皮生长因子(EGF)、内皮细胞生长添加剂(ECGS)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),通过比较细胞活性、贴壁能力、迁移能力和4种基质蛋白基因(pif80、n16、msi7及accbp)表达水平的变化,来评判这些因子对细胞培养及细胞矿化功能的影响。结果显示:(1)EGF能显著提高原代培养细胞的活性、贴壁能力和迁移能力,并促进pif80、n16和accbp基因的表达;(2)ECGS能增强细胞的贴壁能力和迁移能力,并大幅提高pif80、n16和msi7基因的表达水平;(3)IGF-1能显著增强细胞活性、贴壁能力、迁移能力和msi7的基因表达水平,但对pif80、n16和accbp基因的表达有一定抑制作用;(4)碱性成纤维细胞生长因子能增强细胞的活性及贴壁能力,并显著提升pif80、n16和accbp基因的表达水平。研究表明,脊椎动物源细胞因子具有延长细胞培养时间、增强细胞活性及促进矿化相关基因表达的作用,能够用于优化合浦珠母贝外套膜细胞的培养基。     

虾夷扇贝闭壳肌和外套膜肌原纤维蛋白的特性分析

为探索采捕后活品虾夷扇贝品质变化与其肌肉蛋白质生理特性变化间的关联,本研究以虾夷扇贝2个可食部肌肉为研究对象,以肌原纤维蛋白ATPase活性为指标(Ca²⁺-ATPase,Mg²⁺-ATPase),对扇贝肌原纤维蛋白(Mf)的稳定性进行了系统探索。首先,分别提取闭壳肌肌原纤维(A-Mf)和外套膜肌原纤维(M-Mf);然后,考察了不同因素(离子强度I、pH、温度)对Mf的ATPase活性的影响规律;对A-Mf及M-Mf的稳定性进行了探索;进一步比较了闭壳肌和外套膜肌原纤维蛋白ATPase的失活特性。研究结果表明:(1)虾夷扇贝闭壳肌与外套膜的Mf的理化性质相似,A-Mf与M-Mf的pI均在5.0附近,粘度分析发现A-Mf热稳定性高于M-Mf。(2)ATPase活性变化规律的结果发现,与脊椎动物中的鱼类一样,作为无脊椎动物的扇贝,与Mg²⁺-ATPase相比,Ca²⁺-ATPase更能准确地反映Mf的稳定性。(3)闭壳肌和外套膜二者的Mf的Ca²⁺-ATPase呈现出共同特性,在pH为中性时活性最高;A-Mf与M-Mf的差异性则表现为前者的Ca²⁺-ATPase在较低离子强度(I=0.2)下活性最高,后者则在较高离子强度(I=0.5)下活性最高;离子强度对A-Mf的热稳定性影响不明显,而M-Mf的热稳定性明显受到离子强度的影响,其在较低离子强度下表现出更好的稳定性。(4)Ca²⁺-ATPase失活速率的研究发现,无论是闭壳肌还是外套膜,其稳定性与离子强度I和温度均呈现显著正相关(R²=0.8181、0.8436和R²=0.9887、0.9557);二者在pH 7.0左右的稳定性最好,偏离中性会促使Ca²⁺-ATPase失活,与碱性条件相比,酸性对蛋白质稳定性的破坏更加明显。     

三角帆蚌外套膜碱性磷酸酶与钙代谢的关系

利用切片染色确定了碱性磷酸酶在三角帆蚌外套膜中主要分布在黏膜层.在培养的细胞中分别加入碱性磷酸酶激活剂、抑制剂和放线菌酮,并用原子吸收光谱仪检测钙离子的含量和碱性磷酸酶的活力,结果表明:当加入碱性磷酸酶激活剂时,其活力升高,钙离子浓度升高;而加入抑制剂时,其活力降低,钙离子浓度相应下降;加入放线菌酮时,碱性磷酸酶和钙离子浓度开始升高,后来下降,其结果与蛋白质抑制剂的作用相一致,综合上述结果,表明三角帆蚌外套膜的碱性磷酸酶有促进钙代谢的作用.     

盐度、pH对文蛤肌肉、鳃、外套膜HSP70基因表达的影响

为探讨池塘养殖文蛤的适宜盐度和pH范围,以β-actin为内参基因,采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术,检测不同盐度(16、18、20、22、24)和pH(6.7、7.7、8.7、9.7、10.7)梯度下文蛤肌肉、鳃、外套膜中HSP70基因mRNA的表达水平。结果显示,盐度16、18、22、24处理组肌肉中HSP70基因的表达量显著高于盐度20的对照组(P0.05);除盐度18组鳃和盐度24组外套膜HSP70基因的表达量与对照组差异不显著外(P0.05),16、18、22、24盐度组鳃和外套膜中HSP70基因的表达量均显著高于对照组(P0.05)。pH 6.7、7.7、9.7、10.7处理组肌肉、鳃、外套膜中HSP70基因的表达量与pH为8.7的对照组差异显著(P0.05)。试验结果表明,超出一定盐度、pH范围,可显著诱导文蛤肌肉、鳃、外套膜中HSP70基因的过量表达,研究结果可为池塘文蛤的健康养殖提供参考。     

白云石珠核对马氏珠母贝外套膜表皮细胞作用的研究

利用光镜和透射电镜技术对白云石珠核"平板珍珠"生成过程中马氏珠母贝外套膜表皮细胞的显微与超微结构变化进行观察。观察结果表明,在"平板珍珠"生成过程中,白云石珠核与贝壳珠核结果一致。外套膜受到异缘物的刺激,发生一系列的表皮细胞形态和细胞器的变化。(1)细胞形态变化:外表皮细胞高度发生变化,先增高再变矮,其中插片后6、12d变化较明显,而12d最高,且胞质中的空泡化最明显。(2)黏液细胞量变化:插片后Ⅱ型黏液细胞数量增多,而插片后6、12、19d外表皮中则很少黏液细胞分布。(3)细胞器变化:插片后22h,柱状细胞内质网上的核糖体消失,高尔基体减少,线粒体也多转变为分泌泡;39h,原来具成群线粒体和分泌泡的细胞内的线粒体很少,分泌泡则非常多;6d,粗面内质网增多;12、19d,有较多含有成群的线粒体的细胞,分泌泡则很少。     

中国珍珠研究概论

目前,中国是世界上最大的珍珠生产国,珍珠产量占世界珍珠总产量的95%以上。2007年中国珍珠产量达到1600吨,创历史最高水平。2008年受金融危机影响及各地出台禁养限养的有关政策,珍珠产量开始大幅下降,出现拐点。我国淡水珍珠主要分布在长江中下游、五大淡水湖区域,形成了浙江诸暨、苏州渭塘等珍珠加工、批零集散地和湖南、江苏、浙江、安徽、湖北、江西、福建7大淡水珍珠养殖基地。淡水珍珠与海水珍珠均实现了人工养殖。淡水珍珠用的     

缢蛏外套膜的组织学和组织化学研究

解剖壳长(53.24±2.23)mm缢蛏Sinonovacula constricta的外套膜组织,经H·E染色和特殊染色等组织学和组织化学方法研究了外套膜组织结构与细胞化学成分。组织学观察表明:外套膜由边缘膜和中央膜组成,无边缘膜突起;边缘膜由内外侧上皮、结缔组织、肌纤维及分布在其中的粘液细胞组成。组织化学研究显示:上皮细胞和分泌细胞内含物中含有丰富的糖类;外侧上皮和肌纤维蛋白质含量较高;在外侧上皮中检测到较强的碱性磷酸酶(ALP)活性。本研究结果可为解决缢蛏贝壳易破损、运输中大量死亡等问题提供参考。     

番红砗磲外套膜颜色多态性及其与生长性状相关性研究

本研究以南海西沙海域番红砗磲(Tridacna crocea)为实验对象，通过CSE-1成像色度检测分析系统和聚类分析方法研究其外套膜颜色多态性，同时，比较外套膜颜色与形态性状的相关性。结果显示，大部分番红砗磲外套膜颜色分布在蓝原色和红原色区域，少部分个体分布在绿原色区域，且偏亮绿色；番红砗磲外套膜颜色共聚为6个颜色类群，各类群间颜色色差均>15，其中，第4类深蓝色和第6类黄色色差最大，为74.68；第3类浅蓝色和第4类深蓝色色差最小，为18.98；番红砗磲外套膜颜色L、a、b值与壳高呈显著正相关(P<0.05)，相关系数分别为0.2080、0.2210和0.2375。本研究结果可为砗磲资源保护和珊瑚礁生态系统恢复提供参考。     

体外培养菲律宾蛤仔外套膜细胞的增殖

以D-MEM和M199为基础培养基,对菲律宾蛤仔的外套膜进行了细胞培养,并以RNA/DNA比值作为评价细胞增殖的指标.结果表明:外套膜细胞增殖的主要形式是从组织块中迁出,培养前期细胞分泌旺盛,细胞在体外生长可达15 d;外套膜细胞在D-MEM中的生长优于M199;RNA/DNA指标与直观观察的细胞生长状况相吻合,利用这一指标,有助于客观评价体外培养菲律宾蛤仔细胞的增殖特性.