Detecting and quantifying marijuana metabolites in serum and urine of 19 dogs affected by marijuana toxicity

Veterinarians diagnose marijuana toxicity based on clinical signs and history, or in conjunction with an over-the-counter (OTC) human urine drug screen. With the legalization of recreational marijuana use becoming more prevalent in the United States, a more accurate test to aid in the diagnosis of canine marijuana toxicity is needed. We collected urine and serum samples from 19 dogs with confirmed or suspected marijuana toxicosis from multiple veterinary hospitals and analyzed them with a novel UPLC-MS/MS method. Calibrations from 0.1 to 100 ng/mL and QC materials were prepared. Samples were extracted, purified, and eluted with solid-phase extraction. Urine samples were tested with an OTC human urine drug screen. The limit of detection (LOD) and lower limit of quantification (LLOQ) ranges for marijuana metabolites in serum were 0.05–0.25 ng/mL and 0.1–0.5 ng/mL, respectively. In urine, the LOD and LLOQ ranges for the metabolites were 0.05–0.1 ng/mL and 0.1–0.5 ng/mL, respectively. In serum, median and range of metabolite concentrations (ng/mL) detected included: THC, 65.0 (0.14–160); 11-OH-Δ⁹-THC, 4.78 (1.15–17.8); 11-nor-9-carboxy-Δ⁹-THC, 2.18 (0.71–7.79); CBD, 0.28 (0.11–82.5); and THC-glucuronide, 2.05 (0.72–18.3). In the 19 urine samples, metabolite: creatinine (ng: mg) values detected included: THC, 0.22 (0.05–0.74); 11-OH-Δ⁹-THC, 0; 11-nor-9-carboxy-Δ⁹-THC, 1.32 (0.16–11.2); CBD, 0.19 (0.12–0.26); THC-COOH-glucuronide, 0.08 (0.04–0.11); and THC-glucuronide, 0.98 (0.25–10.7). Twenty of 21 urine samples tested negative for THC on the urine drug screen. All 19 serum samples contained quantifiable concentrations of THC using our novel UPLC-MS/MS method. Utilizing a UPLC-MS/MS method can be a useful aid in the diagnosis of marijuana toxicosis in dogs, whereas using an OTC human urine drug test is not a useful test for confirming marijuana exposure in dogs because of the low concentration of THC-COOH in urine.     

液液萃取-QuEChERS净化-高效液相色谱-串联质谱法测定饲料添加剂可溶性粉中五氯酚酸钠含量

建立液液萃取-QuEChERS净化-高效液相色谱-串联质谱法测定可溶性粉中五氯酚酸钠含量的新方法。 可溶性粉先用水溶解后加入1moL/L 盐酸1mL调pH至4左右,加入乙醚液液萃取到乙醚层,蒸干乙醚,乙腈复溶,QuEChERS净化管净化后高效液相色谱-串联质谱测定,标准曲线外标法定量。 五氯酚酸钠在0.50~100μg/L质量范围内线性关系良好,相关系数为0.9994,检出限0.5μg/kg,定量限1.0μg/kg,可溶性粉剂中五氯酚酸钠添加量为1.0、5.0、10.0μg/kg时,五氯酚酸钠的平均回收率为80.2%~94.0%,相对标准偏差小于7%。 该方法快速、高效且价格低廉,适用于饲料添加剂可溶性粉中五氯酚酸钠的快速筛查分析测定。     

南海8种低值小杂鱼脂肪含量和脂肪酸组成分析

采用氯仿-甲醇法提取南海盛产的8种低值小杂鱼肌肉、鱼头、内脏中的粗脂肪,利用气相色谱分析其脂肪酸的组成。结果表明,低值小杂鱼头部粗脂肪含量为2.7%～9.7%,内脏粗脂肪含量为2.9%～6.2%,肌肉部分粗脂肪含量为2.0%～8.5%;不同低值小杂鱼的脂肪酸组成基本相同,但其含量有所差异,饱和脂肪酸含量最高,都在40%以上,内脏粗脂肪中的饱和脂肪酸含量较头部和肌肉中的含量高;多不饱和脂肪酸含量差异较大,粗脂肪含量较高的鱼中多不饱和脂肪酸的含量较低;不同鱼种不同部位的粗脂肪中EPA、DHA含量有所差异。蓝圆鲹的头部粗脂肪中DHA和EPA最高,含量达到28.4%,而双带海鲱鲤内脏粗脂肪中的EPA和DHA含量仅为7.26%。     

气相色谱法测定蔬菜中8种有机磷农药残留

研究了蔬菜中的有机磷农药（包括敌敌畏、甲拌磷、特丁硫磷、乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、水胺硫磷、杀扑磷）残留量的气相色谱测定方法。采用丙酮和二氯甲烷提取无需净化,DB-1701柱色谱分离,采用FPD检测器检测,8种农药在15min内获得良好的分离,线性相关系数（r）为0．9990～0．9998,检测限达0．01～0．03mg／kg,当添加水平为0．5mg／kg时,该法回收率范围为81．4％～102．2％。该法快速灵敏,且易操作。     

气相色谱法测定苦参苍术口服液中三氯甲烷残留量

建立了苦参苍术口服液中三氯甲烷残留量的气相色谱检测方法,采用DB—FFAP毛细管柱,柱温为程序升温,氢火焰离子化检测器（FID）,检测器温度为250℃,进样口温度为220oC,载气为氮气。试验结果三氯甲烷在6．0464～120．928μg／mL浓度范围内呈良好的线性关系（r=0．99995）,加样回收实验平均回收率为98．01％（RSD=1．6％）。本方法简便、快速、准确、重现性好,可作为苦参苍术口服液中三氯甲烷残留量的检测方法。     

企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪酸组成

对企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪进行了提取和测定。结果表明,企鹅珍珠贝和马氏珠母贝软体部脂肪含量分别为8.3%和9.6%。企鹅珍珠贝脂肪酸中DHA EPA的总含量为39.71%,比马氏珠母贝脂肪酸中DHA EPA的总含量(30.86%)高。2种珍珠贝软体部脂肪酸均具有重要的开发利用价值。     

苹果等4种水果果实糖酸组成及风味特点研究

采用高效液相色谱法,分析和测定了4种水果果实中可溶性糖和有机酸的组成及含量,以了解水果果实各具独特风味的影响因素。结果表明,国光苹果果实糖组分以果糖为主,葡萄糖和蔗糖次之,主要有机酸是苹果酸;沙糖桔果实糖组分以蔗糖为主,以柠檬酸和苹果酸为主要有机酸;水晶梨果实中糖组分以果糖和葡萄糖为主,蔗糖含量最低,主要有机酸为苹果酸,其次为柠檬酸;巴西蕉果实中以蔗糖为主要糖分,有机酸中苹果酸含量最高,同时还含有较高的柠檬酸。果实的风味和品质是糖、酸等多种物质综合作用的结果;糖酸比是影响水果果实甜酸风味的一个重要因素,总酸含量在影响果实风味方面起着重要作用。     

气相色谱法测定水产品中氯霉素残留

介绍了水产品中氯霉素残留量测定的气相色谱法。样品中的氯霉素用乙酸乙酯提取,正己烷去脂肪,过Sep-C18柱进行净化,用BSTFA-TMCS衍生后进带有微电子俘获器的气相色谱仪检测。该方法的线性范围为0.5～500μg·L-1,相关系数r=0.999,最低检测限为0.1μg·kg-1,相对标准偏差为4.3%～11.0%,向样品中分别添加1μg·kg-1、10μg·kg-1和20μg·kg-13个浓度水平的氯霉素,回收率分别为62.0%、88.2%和96.4%。方法灵敏度高,准确可靠,适合水产品中氯霉素残留量的检测。     

气相色谱法同时测定水产品中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素残留量

以尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)和南美白对虾(Penaeus vannamei)为实验材料,建立了测定水产品中氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素残留量的毛细管电子捕获气相色谱(GC-ECD)法。用乙酸乙酯同时提取水产品中的待测物,提取液浓缩至干后溶于甲醇/氯化钠溶液,正己烷脱脂,过C18柱净化,乙腈洗脱,加BSTFA-TMCS在65℃下衍生反应30min,正己烷定容后进样分析,外标法定量。本方法氯霉素在1.0~500.0μg/L,氟甲砜霉素和甲砜霉素在5.0~500.0μg/L浓度范围内呈线性相关,相关系数r≥0.9983,加标水平在0.2~10.0μg/kg时,回收率为83.30%~101.22%,相对标准偏差为1.36%~12.57%。氯霉素、氟甲砜霉素和甲砜霉素的检测限分别为0.1、0.2、0.2μg/kg。     

欧洲鳗鲡血清免疫球蛋白纯化及其结构分析

应用亲和层析技术提纯欧洲鳗鲡免疫球蛋白（Ig），并对欧鳗Ig的结构和抗原性进行分析。层析结果表明：Ig蛋白呈现一个锐形曲线，蛋白峰与抗原活性峰高度重叠。SDSPAGE分析表明：欧鳗Ig重链分子量为68 kD，轻链有3条，分子量分别为21 kD、23 kD和26 kD。凝胶电泳结果显示：在非变性非还原条件下，欧鳗Ig有790 kD和350 kD 2条蛋白带，在变性非还原条件下有790 kD、593 kD和350 kD 3条蛋白带。Western-blotting试验证实：兔抗欧鳗Ig能识别欧鳗Ig的多种不同聚合体和Ig的重链，但不能识别Ig的轻链。结论：欧鳗Ig在自然条件下可能以四聚体和二聚体的形式存在，这与其它硬骨鱼的Ig形式有差异。欧鳗Ig链间二硫键不健全,在SDS作用下可解聚产生多种不同分子量的聚合体，首次揭示欧鳗Ig的轻链有3种异型。