猪流行性腹泻病毒CH/GX/2015/750A株的分离鉴定及全基因组序列分析

本研究旨在获得可在细胞培养中稳定、有效生长增殖的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)分离毒株,并对其全基因组序列进行测定分析。应用Vero细胞从广西腹泻仔猪肠道内容物中进行病毒分离,通过细胞病变和RT-PCR对细胞培养物进行鉴定,应用下一代测序技术对分离毒株全基因组序列进行测定。结果显示,成功分离到1株PEDV,命名为CH/GX/2015/750A。该毒株可稳定有效地在Vero细胞生长增殖,并引起典型的细胞病变;已在Vero细胞连续传代25代,病毒滴度随着传代次数的增加逐渐提高并稳定在107.50TCID50/mL。该毒株全基因组序列长28 038bp;与22个参考毒株的全基因序列比对显示,核苷酸同源性为96.8%~99.8%,其中与YC2014株同源性最高,为99.8%。全基因组和S基因系统进化分析显示,PEDV CH/GX/2015/750A分离毒株属于Ⅱa亚群,与YC2014、PEDV-WS等变异毒株亲缘关系密切。结果表明,本研究分离获得的CH/GX/2015/750A毒株是PEDV地方流行变异毒株。     

光碳核肥对超级杂交水稻新组合Y两优900产量的影响

通过多次叶面喷施光碳核肥,研究了光碳核肥对杂交水稻Y两优900产量及构成因子的影响。结果表明,喷施光碳核肥能有效提高Y两优900的产量和抵抗南方水稻黑条矮缩病、苗瘟及细菌性条斑病的能力。     

2015—2021年广西部分猪场5种疫病的血清学检测

为了解广西猪群中猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、口蹄疫、猪圆环病毒病和伪狂犬病5种疫病的免疫水平及伪狂犬病病毒(PRV)感染状况,对2015—2021年广西地区1012个猪场送检的24263份血清样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)以及PRV-...     

猪丁型冠状病毒CH/GX/1468B/2017的分离鉴定及全基因组序列分析

本研究于广西某猪场采集疑似感染猪丁型冠状病毒（porcine deltacoronavirus，PDCoV）的腹泻仔猪小肠及其内容物进行病毒分离，并通过细胞病变（CPE）、RT-PCR、间接免疫荧光（IFA）和全基因序列测定分析对分离的病毒进行鉴定。结果显示，试验成功分离到1株PDCoV，命名为CH/GX/1468B/2017（简称PDCoV 1468B）。该毒株可稳定有效地在LLC-PK细胞生长增殖，并引起典型CPE；该毒株已在LLC-PK细胞连续传代15代，病毒滴度随着传代次数的增加逐渐提高并稳定在10^8.10TCID₅₀/mL以上。该毒株全基因组序列长25 399 nt；与23个GenBank中登录的参考毒株的全基因组序列比对显示，核苷酸同源性为97.2%~99.4%，其中PDCoV 1468B分离毒株与Vietnam/Binh21/2015株同源性最高，为99.4%。全基因组系统进化分析显示，PDCoV 1468B分离毒株属于Ⅱ群，与东南亚国家PDCoV毒株亲缘关系密切，处于同一进化分支。综上所述，本研究成功分离出PDCoV 1468B株并进行了全基因序列分析，为进一步开展PDCoV致病性等生物学特性研究及疫苗研制奠定了基础，同时可为PDCoV的遗传进化提供数据支持。     

牛源大肠杆菌对秀丽隐杆线虫的致病性研究

为建立牛源大肠杆菌-秀丽隐杆线虫致病模型，本研究从广西南宁、桂林、柳州等地区收集的牛病料中分离出13株大肠杆菌，继而对这些大肠杆菌进行血清学鉴定及小鼠、秀丽隐杆线虫的致病性试验。采用玻片凝集法鉴定大肠杆菌的O血清型，并将13株大肠杆菌培养液以3.0×10⁹ CFU/mL、0.2 mL/10 g体重给小鼠腹腔注射，同时分别喂食N2野生型秀丽隐杆线虫。结果显示，大肠杆菌的O血清型为O127、O126和O44，其中O126为优势血清型（4/13）。致病性结果显示，有11株大肠杆菌能使小鼠致死（致死率为40%~100%），2株大肠杆菌对小鼠没有致死性（致死率为0）。对小鼠有强致病性的大肠杆菌，对线虫的致死率也较高，死亡率在第3~6天最为显著，半数致死时间为3~4.5 d，最长存活时间为9 d；对小鼠不致死的两株大肠杆菌对线虫的致死率也较低，线虫死亡率下降趋势缓慢，半数致死时间为5~6 d，最长存活时间为10~11 d。肠道细菌计数结果显示，大肠杆菌在线虫体内的数量与时间呈线性关系，大肠杆菌不断破坏线虫的免疫系统，从而导致了线虫的死亡。本研究结果表明，大肠杆菌对线虫和小鼠的致病力试验结果一致，说明成功建立了牛源大肠杆菌-秀丽隐杆线虫致病模型，为牛病防治与临床用药提供了依据。     

猪流行性腹泻病毒变异株CH/GX/750A/2015在Vero细胞上转瓶培养条件的优化试验

本研究旨在确定猪流行性腹泻病毒（PEDV）变异株CH/GX/750A/2015株在Vero细胞上转瓶培养的最佳条件，为大规模生产高效PEDV变异株疫苗提供技术支撑。试验以10 L转瓶培养病毒，对接毒时细胞维持液中胰酶浓度（0、2、4、6、8和10 μg/mL）、细胞密度（40%、60%、80%、100%、200%）、接毒剂量（MOI分别为1、0.1、0.01和0.001）、吸附时间（0、30、60、90、120、240 min）、收毒时间（接毒后12、24、36、48、60、72 h）、维持培养温度（35、36、37和38 ℃）和转瓶转速（6、8、10、12、14、16 r/h）7个条件进行优化。结果显示，PEDV CH/GX/750A/2015株在10 L转瓶中的最佳培养条件为：细胞刚铺满单层时接毒，接毒量为MOI=0.01，维持液（无血清DMEM培养液）中胰酶质量浓度为6 μg/mL，不需吸附，维持培养温度为37 ℃，12 r/h 旋转培养48 h后收获病毒液可获得较高效价的病毒液，效价可稳定达到10^6.50 TCID₅₀/0.1 mL。本试验为 PEDV 变异株大量培养提供了参考，为变异株疫苗研发奠定了基础。     

近期多起急性型猪巴氏杆菌病例的诊断及病原检测分析

正猪巴氏杆菌病(Swine Pasteurellosis)又称猪出血性败血症,俗称猪肺疫、猪出败、锁喉风,是由巴氏杆菌(Pasteuurella)引起的一种畜禽共患传染病。猪巴氏杆菌病以中小猪多发,以高热、咽喉红肿、呼吸困难为主要临床症状,以败血症病变及纤维素性肺炎为主要剖检特征。按发病病程,猪巴氏杆菌病可分为最急性型、急性型和慢性型,临床上以急性型为主要发病类型~([1])。猪巴氏杆菌病是危害养猪     

NS复合乳酸菌制剂对断奶仔猪免疫水平的影响

选择二元杂交(杜/长)20日龄断奶仔猪90头,平均断奶体重8.99 kg土1.60 kg,按体重和性别分成3个处理组,每处理3个重复.A组为对照组,饲喂玉米、豆粕基础日粮；B组为基础日粮添加NS复合乳酸菌组2 g/kg;C组为基础日粮添加抗生素组(2 g/kg金霉素、0.25 g/kg阿莫西林和0.125 g/kg的支...     

陆川猪保育猪圆环病毒2型和细环病毒2型混合感染病例的诊断

陆川猪作为我国八大地方良种猪之一，在与外来品种猪的杂交利用中，是不可多得的优秀母本，具有市场需要或潜在需要的许多优秀基因，市场对陆川猪及其产品的需求不断增大。然而，陆川猪养殖的经济效益在一定程度上受到相关疾病的影响，其中猪圆环病毒2型（PCV2）主要危害免疫系统，造成免疫抑制，导致多种疾病继发或并发感染，如断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）。而且在发生PMWS的猪群中，猪细环病毒2型（PTTV2）的感染更加普遍，使疾病的诊断和防控更加困难。鉴于此，本研究对送检疑似病例进行病原学检测，为PCV2和唧2混合感染的诊断提供参考。