用RT-PCR技术检测盐渍猪肠衣中猪瘟病毒的研究

参考GenBank中发表的猪瘟病毒（CSFV）序列，设计一对CSFV特异性PCR引物；从CSFV感染猪盐渍小肠中提取总RNA，经逆转录后进行PCR扩增，在盐渍小肠中成功扩增出与预期大小（168bp）一致的特异性条带，而正常猪和感染猪伪狂犬病病毒的猪小肠扩增结果均为阴性。用本方法对20例不同稀释浓度的盐渍猪肠衣样本进行检测，结果显示比经典抗原检测方法（抗原捕获ELISA法）具有更高的敏感性。实验表明，本RT—PCR技术能应用于盐渍猪肠衣的CSFV检测，为快速、准确检测盐渍猪肠衣中CSFV提供了一条新途径。     

规模化猪场猪瘟伪狂犬病圆环病毒2型感染的血清学调查

近年来，笔者对令省范围内193个规模化猪场进行了血清学调查，现将猪瘟（HC）、猪伪狂犬病（PR）和猪圆环病毒2型（PCV2）感染情况报道如下。     

野生鸟类禽流感病毒感染情况的调查

为了解野生鸟类禽流感病毒(AIV)的携带感染情况,2006年～2010年,本研究在湖南省主要候鸟迁徙地收集115只野鸟组织或拭子样品、75份野鸟的新鲜粪便样品和72份血清样品。组织或拭子样品采用RT-PCR方法检测和鸡胚接种病毒分离鉴定,血清样品分别进行H5(含Re-5和Re-4)、H6、H7、H9、H10和H11抗体检测。结果表明,从斑鸠和绿头鸭组织中分别分离到H5N1亚型和H3N2亚型AIV;72份血清中有17份抗体为阳性,其中H5(Re-5)亚型5份、H5(Re-4)亚型1份、H6亚型1份、H7亚型2份和H9亚型8份,阳性率分别为6.94%、1.39%、1.39%、2.78%和11.11%。H10和H11亚型未检测到抗体阳性。     

2016年湖南省规模猪场主要病毒性疫病流行情况分析

对2016年湖南省规模猪场送检的117例临床病例进行实验室诊断和流行病学分析。结果显示：各送检临床病例中,以哺乳仔猪、保育猪、育肥猪发病较多;临床表现以呼吸道症状和腹泻症状多见;病毒性疾病的比例达86.3%,其中圆环病毒2型（PCV2）、蓝耳病病毒（PRRSV）的检出率较高,多重病原感染比例达57.4%。结果表明,2016年湖南省猪病主要以PCV2、PRRSV等引起的病毒性疫病为主,且普遍存在多病原感染现象。     

五种核酸提取法对猪繁殖与呼吸综合征病毒提取效率的比较

目的：研究Trizol RNA提取法、杭州博日吸附柱RNA提取法、Promega核酸提取仪磁珠RNA提取法、西安天隆核酸提取仪磁珠RNA提取法、Thermo核酸提取仪磁珠RNA提取法等五种不同核酸提取方法对不同含量猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）阳性样品的相对提取效率,为动物疫病监测诊断实验室核酸提取方式的选择提供技术参考。方法用五种不同核酸提取方法对4份10倍梯度稀释的PRRSV阳性血清、2份PRRSV阳性组织悬液及其离心后的上清液共8份样品同时进行核酸提取,用荧光RT-PCR方法进行检测,获取各样品PRRSV荧光RT-PCR结果的CP值,分析五种提取方式的相对提取效率。结果对合适的提取样品,磁珠提取法相对提取效率最高,吸附柱法其次,Trizol提取法相对效率较差;在三种磁珠提取法中,提取效率相差在2个CP值内,差异不明显,但以天隆磁珠提取法提取效率更高。结论预装试剂结合仪器自动化操作的磁珠法提取效果稳定,效率最高;国产仪器国产试剂提取效率不亚于进口仪器和试剂。     

规模化猪场猪结核病流行病学调查

结核病是由分枝杆菌(Mycobacterium)引起的人及动物的一种慢性传染病,其病理特点是多种组织器官形成肉芽肿坏死和干酪样或钙化结节病变.该病广泛流行于世界各国,以奶牛业发达的国家最为严重,各国政府采取了积极有效的防治措施,并取得了很大的成就,但此病仍在一些国家和地区呈地方性散发和流行.     

规模化猪场猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染

2008年5月,湖南省湘南地区某年出栏生猪2万头左右的规模化养猪场发生较为严重的母猪死亡及繁殖障碍、仔猪发病率和死亡率均较高的猪传染病,经发病情况调查、临床症状、病理变化、实验室诊断,确定为猪圆环病毒2型、副猪嗜血杆菌混合感染.     

猪瘟免疫程序和不同企业生产的疫苗对猪瘟免疫效果影响的研究

古典猪瘟(CSF)的防制是以强化免疫和淘汰临床病猪及同群猪为主要措施，强化免疫是经济欠发达国家控制CSF的有效方法。我国从五十年代开始，利用猪瘟疫苗免疫猪群，已经控制了CSF的流行。但随着商品化养猪日益增加，疫苗制造工艺改进以及有些地方CSFV变异情况，猪瘟疫苗免疫失败屡有报     

湖南省部分原种猪场主要繁殖障碍性疫病的调查

为了解湖南省原种猪场主要繁殖障碍性病原感染情况及免疫抗体水平。从2011年开始,对我省部分原种猪场进行采样;每年监测5个原种猪场,连续4年,共采血清样品900份、扁桃体样本888份。样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)病原检测。结果显示,CSFV、PRRSV、HPPRRSV、PRV、PCV-2和PPV在我湖南原种猪场存在不同程度的感染,病原阳性率分别为0.12%、2.78%、0.45%、5.33%、9.02%和13.5%。血清样品进行了CSFV、PRRSV、PRV(gB)、PCV-2抗体检测,合格率分别为84.9%、90.6%、93.3%合100%。各猪场根据自身情况,加大监测力度,适时开展动物疫病净化工作,并采取严格的生物安全措施,从源头控制疫病的发生。     

规模猪场垂直传播疫病的净化实践与思考

正猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病是种猪场主要的4种垂直传播性疫病,不仅引起种猪繁殖障碍、仔猪呼吸系统疾病,还会引起猪体免疫抑制,从而加重其他疫病的继发感染,干扰疫病免疫效果,造成巨大的经济损失。更重要的是,这些疫病可通过种猪垂直传播至下一代,造成更大范围的感染,不仅对保种、育种、生猪生产安全与供给等环节造成影响,还会给养猪业造成严重的经济影响。为有效控制扑灭