茶树鲜叶中β-葡萄糖苷酶提取条件的研究

研究了从茶树镁叶中提取β－葡萄糖苷酶时不溶性聚乙烯吡咯烷酮的加入量、缓冲液的选择、多酚类浓度对酶活性的影响及酶的部分特性。结果表明：加入与鲜重量相等的ＰＶＰＰ可获得较高的酶活性;选用０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸－柠檬酸钠缓冲液作为提取缓冲液可得到活性较高的酶液;浓度仅为４ｍｇ／Ｌ的茶叶子多酚类物质能使酶完全失活;β－巯基乙醇和ＥＤＴＡ对酶活性有抑制作用;而甘油能提高酶活性,２～２．５ｍｏｌ／Ｌ的甘油效果     

茶树α-tubulin基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

根据茶树α-微管蛋白(α-tubulin)的mRNA全长序列(GenBank登录号DQ340766)设计引物,以RT-PCR方法扩增茶树α-tubulin基因,将扩增产物克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,并转化至大肠杆菌BL21trxB(DE3)中,经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后以包涵体形式表达。以纯化后的α-tubulin融合蛋白制备兔多克隆抗体,用Westernblot方法检测抗体特异性。结果显示α-tubulin蛋白以包涵体形式大量表达,以融合蛋白制备的抗体对茶树体内的α-tubulin具有良好的特异性。     

茶树鲜叶中叶黄素循环组分的高效液相色谱法测定研究及其光保护功能鉴定

采取酮提取茶树鲜叶中的叶黄素循环组分,分别在15℃、22℃和30℃下,用Spherisorb C18（5μm,250βmm×4.6βmm）色谱柱,乙腈︰甲醇（85︰15）和甲醇︰乙酸乙酯（68︰32）为流动相,线性洗脱,在445βnm下检测。结果表明,不同温度条件下,高效液相色谱法都能够从茶树鲜叶提取物中检测到紫黄素、环氧玉米黄素和玉米黄素,而且分离效果好,重现性和精密度也很高。强光下,叶黄素循环库和紫黄素脱环氧化程度皆明显增加,表明其在茶树中有重要的光保护作用。     

茶树miR156a靶基因SPL6和SPL9的克隆及表达分析

MicroRNA156a-SQUAMOSA promoter binding-like protein(miR156a-SPLs)参与植物生长阶段转变、叶片形态建成和逆境胁迫等复杂的生理过程。基于茶树转录组数据,从茶树中克隆出2个SPL家族成员——CsSPL6和CsSPL9。CsSPL6 cDNA全长2 318 bp,ORF框长1 668 bp,编码555个氨基酸;CsSPL9 cDNA全长1 954 bp,ORF框长1 116 bp,编码371个氨基酸;CsSPL6和CsSPL9都有典型SBP结构域和Csn-miR156a识别位点。时空表达特性分析表明,Csn-miR156a在芽中表达量最高,第7叶中最低,与CsSPL6和CsSPL9呈负调控关系;不同品种(系)表达特性分析表明,Csn-miR156a的表达模式与新梢生长量、光合指标结果一致,与CsSPL6和CsSPL9表达模式相反,说明Csn-miR156a、CsSPL6和CsSPL9参与茶树生长过程,Csn-miR156a和CsSPLs可作为初步判断品种生长势强弱的分子手段;高温处理4个品种(系)表达特性表明Csn-miR156a与CsSPL9呈负相关,推断茶树在高温胁迫下Csn-miR156a可能通过负调控CsSPL9来增加耐高温性。Csn-miR156a负调控CsSPLs在茶树生长发育、逆境胁迫中发挥作用,为茶树生长和抗逆机制提供理论依据。     

陕西茶树种质资源研究现状及展望

茶树种质资源是茶树育种、遗传研究及生产利用的重要物质基础,是茶产业可持续发展的动力。本文综述了近几年来国内学者对陕西茶树种质资源分类、生化成分、DNA分子鉴定等方面的研究现状,并对陕西茶树种质资源保护利用进行了展望,为科学保护与合理利用陕西茶树种质资源提供参考依据。     

分离芸薹属植物基因组DNA的一种方法

介绍一种比目前较普遍使用的ＣＴＡＢ法能更好地分离植物基因组ＤＮＡ的方法。通过芸薹属不同种植物和不同重量实验材料（０．１—１．２克）的多次试验，证明用该方法分离的基因组ＤＮＡ产率、纯度和分子量都较高，分离的ＤＮＡ可用于限制性酶切．这种方法也完全适用于其它植物基因组ＤＮＡ的分离。     

葛根药用成分异黄酮的HPLC指纹图谱分析

采用高效液相色谱法对葛属植物野葛和粉葛块根的主要药用成分异黄酮化合物的指纹图谱进行了研究.结果表明,以乙腈-0.5%乙酸为流动相,采用梯度洗脱的方法,葛根异黄酮化合物的各种组分可得到良好的分离;通过对10批次野葛药材HPLC图谱的检测,共确定了15个色谱峰作为野葛的共有指纹峰,根据中药指纹图谱技术的基本原则和方法,建立了野葛的HPLC指纹图谱;与不同产地野葛的HPLC图谱的比较,供试样品的指纹图谱基本一致;而与粉葛样品的HPLC图谱存在较大的差异;表明得到的色谱图可以作为野葛药材专属性的指纹图谱,为葛根的药材鉴别和质量控制提供了实验依据.     

茶树对茶尺蠖取食危害的补偿光合生理反应研究

利用叶绿素荧光仪和光合测定系统研究了茶树受到害虫茶尺蠖危害后的补偿光合生理变化.结果表明,茶树在受到茶尺蠖危害后的21 d之内,受害叶片和同株未受害叶片的光系统Ⅱ的光化学效率(Fv/Fm)、光合电子传递速率(ETR)和净光合速率(Pn)的值均高于对照,NPQ明显低于对照,且这种差异在危害后第7 d最大,随后逐渐减小.说明茶树对茶尺蠖危害后,诱导产生了补偿光合作用,且补偿能力随时间的推移而变小.此外,茶树在茶尺蠖取食后,气孔导度和蒸腾速率增加.     

早生抗寒优质茶树新品系“茶农1号”的选育

以经N 离子诱变后的槠叶齐茶种子为原始材料,经系统选种和无性繁殖,育成了早生优质抗寒茶树良种茶农1号。经1998—2003年品种比较实验,结果表明:该品系春季萌发期特早,与对照皖农95相比,同期萌展值大0.39～0.96,与福鼎大白茶相比,同期萌展值大0.35～0.57;鲜叶中生化成分含量丰富,其中多酚含量28.22%、氨基酸含量1.51%,咖啡碱含量4.81%,水浸出物含量44.82%,茶多糖含量1.55%;各成分比例协调,绿茶品质佳,尤以香气和滋味表现突出;抗寒性强,对倒春寒的抗性也强。实验结果提示:N 注入是一种有效的茶树良种选育方法。     

中药葛根标准生产操作规程的初步研究

在总结前人经验的基础上,通过科学研究、技术实验,并经生产实践验证,对中药葛根的生长条件、品种类型、种苗繁育、定植方法、田间管理、病虫害防治、采收加工以及质量标准监测等技术要求方面进行研究,初步确定安徽省中药葛根标准操作规程.