转基因鲤与普通鲤鱼精巢结构和发育的对比观察

通过光学显微镜对转大麻哈鱼生长激素基因鲤(以下简称转基因鲤)和鲤的精巢组织结构和发育进行比较观察。结果表明:转基因鲤和鲤鱼精巢组织结构基本上相同,都属于壶腹型精巢,精巢壁由两层膜构成,外层为腹膜,内层为白膜,二者精小叶的排列都不规则,每个小叶由许多精小囊组成。精子发生增殖、生长、成熟整个发育过程都在精小囊中进行,精子成熟后从精小囊进入小叶腔内。转基因鲤和鲤鱼精子的头部直径分别为2.60±0.026μm;2.58±0.024μm。性腺发育观察,7月份时在转基因鲤的精巢中精原细胞和精母细胞占多数;鲤鱼精巢中以精原细胞为主。8月份时转基因鲤精巢中精原细胞明显减少,而精母细胞开始增加,并有少量精子细胞和精子出现;鲤鱼精巢中也发现精子细胞和精子,9月份时转基因鲤和鲤鱼精巢中大多都为精子细胞和精子。通过对7~9三个月雄性发育程度作T检验,二者鱼的雄性性腺每个月发育程度有所不同但差异并不显著(P>0.05)。结果显示,转基因鲤和鲤鱼精巢组织结构基本上相同,转基因鲤与鲤鱼精巢发育都能达到性成熟,性腺发育程度无显著差异。     

转基因鲤性腺结构及繁殖性能的研究

采用解剖及显微观察对大麻哈鱼生长激素基因鲤(以下简称转基因鲤)的性腺发育和繁殖性能进行了研究.结果表明:转基因鲤精巢组织结构属壶腹型,其壁由2层膜组成,外为腹膜,内为白膜,精小叶不规则排列,小叶由许多精小囊组成,精小囊是精子发生增殖、生长、成熟的地方,精子成熟后由精小囊进入小叶腔内.卵巢1对,位于腹腔两侧,外为腹膜,内为被膜,卵子成熟后由输卵管从泄殖孔排出体外.精卵生殖细胞发育程序相似,可分为6个时期.其中雌性个体成熟年龄为1周年;雄性个体成熟比雌性个体成熟早.成熟卵巢的成熟系数为0.49 ～0.84,成熟精巢的成熟系数为1.47 ～4.87.繁殖期性腺发育观察:7月时精巢中精原细胞和精母细胞所占比例较高,卵巢中初级卵母细胞所占比例较高;8月时精巢中精原细胞数量开始减少,精母细胞开始增加,并有少量精子细胞和精子出现,卵巢中卵母细胞数量有所增加,并出现一些小的液泡和卵黄物质;9月时精巢中大多都为精子细胞和精子,卵巢中大部分卵母细胞进入卵黄充塞期.通过对繁殖期3个月雌、雄个体性腺发育与普通鲤作t检验,雌、雄个体性腺发育程度有所不同但差异不显著(P＞0.05).该研究证明转基因鲤的性腺发育是正常的,雌、雄个体性个体都能达到性成熟.     

稀有鮈鲫（Gobiobypris rarus）作为转基因模型鱼的研究

转基因动物的大部分实验都是用实验室的小鼠来完成的，因为它具有形体小，易饲养生活周期短，后代数日多的优点。转基因鱼研究也需要一种饲养条件要求简单，性成熟早，繁殖周期短，产卵易控制的小型鱼类作为实验模型鱼，以能方便地测定构建的基因表达，转录功能等，日本几个实     

鲤鱼三、四核苷酸重复微卫星座位的筛选及特征分析*

采用磁珠富集法结合放射性同位素杂交法分离出鲤鱼(Cyprinus carpio)三、四核苷酸重复的微卫星阳性克隆1248个。对其中的384个克隆进行测序分析,共得到微卫星序列325个,其中完美型244个（75.08%）,非完美型59个（18.15%）,混合型22个（6.77%）。依据得到的微卫星序列,用Primer 3软件在线设计并合成引物145对,检测结果显示71.43%（80对/112对）的引物在野生个体间表现出多态性,等位基因数在3~12之间,多态信息含量在0.2109~0.8607之间,80%的位点处于高度多态水平。对群体的遗传结构评估结果显示,四核苷酸重复的微卫星标记在黑龙江鲤野生群体表现出的多态性水平（PIC=0.7740）高于三核苷酸重复（PIC=0.5161）和双核苷酸重复（PIC=0.49）,适用于群体间遗传差异分析和遗传连锁图谱的构建。     

ToI2转座子的特性及其在转基因鱼类中的应用

ToI2转座子是从青口（Oryzias latipes）中发现的唯一一个具有自主转座活性的转座子,是hAT转座子家族的一员。研究表明,ToI2在多种模式动植物中都有转座活性,如斑马鱼（Danio rerio）、小鼠、非洲爪蟾等,并已得到了广泛应用。本文综述了ToI2转座子的特性、转座机制以及其在斑马鱼、青锵和罗非鱼等鱼类中的最新研究进展,以期为ToI2转座子在转基因养殖鱼类中的应用研究提供参考。     

同源与异源精子对方正银鲫子代存活、生长及性别的影响

5月中下旬繁殖季节,用方正银鲫（Carassius auratus gibelio）的卵子分别与麦穗鱼（Pseudorasbora parva）（方正银鲫♀×麦穗鱼♂,简称FM）、方正银鲫（方正银鲫♀×方正银鲫♂,FF）和荷包红鲤（Cyprinus carpio）（方正银鲫♀×荷包红鲤♂,FH）的精子进行人工授精,孵出的仔鱼在网箱中饲养,测定和统计各组子代的存活率、绝对增重率和性比等。结果表明：FF子代的成活率（91.15±1.78%）极显著地高于FM（87.50±2.13%）和FH（85.00±1.04%）（P〈0.01）,FM和FH之间差异不显著（P〉0.05）;FM（20.17±4.33 g）、FH（23.13±3.58 g）子代的出池体质量显著高于FF（18.90±3.82 g）（P〈0.05）,无论雌性还是雄性子代,组间差异均极显著（P〈0.01）,而组内、性别间生长差异不显著（P〉0.05）;FM（99%）、FF（73%）和FH（99%）子代的雌性百分比明显偏向雌性（P〈0.01）,且组间差异极显著,异源精子受精后子代中雌鱼比例明显增高（P〈0.01）。本研究结果证明：银鲫生长性状中存在＂异精效应＂,异源精子对子代的存活率和性别比例有显著影响,对生产中积极利用异源精子提供了数据支持。     

扁吻鱼微卫星的筛选及群体多样性分析

本文采用磁珠富集法筛选新疆扁吻鱼(Aspiorhynchus laticeps Day)的微卫星分子标记,获得13个位点,同时随机抽取1000对鲤引物检测扁吻鱼同源位点的多态性,获得具多态性位点18对。应用31对引物对扁吻鱼与塔里木裂腹鱼(Schizthorax biddulphi)进行遗传多样性分析,共检测到110个等位基因,每个位点的等位基因数为2~6个,扁吻鱼群体平均多态信息含量为0.5353,平均观测杂合度为0.5306,平均期望杂合度为0.6057。表明扁吻鱼群体多态性较高,遗传多样性处于中等偏上水平。群体间遗传距离为0.4763,遗传相似系数为0.6211,表明两个群体为同科不同属的群体。     

应用RNAi技术构建的转基因鲤的检测分析

将构建携带H1启动子的肌肉生长抑制基因的真核表达载体,通过显微注射技术导入鲤受精卵核区附近,获得了一批具有RNAi表型的转基因鲤,PCR和分子杂交检测证实外源基因整合到受体鱼的基因组中,阳性率为32.78%;一龄鱼的生长实验表明,转基因鲤比普通鲤平均生长快0.99倍,其体高和体厚分别平均增长0.22和0.26倍,其中有31.82%的群体平均体厚是普通鲤的1.6倍。结果显示,该质粒表达的发夹环型dsRNA可以有效降解其转录产物,对阻抑肌细胞中同源基因的表达、鲤肌肉的再生能力增强起到了重要作用。这种抑制作用表现为鲤背部肌肉增厚、体质量增加,说明该基因经转录产生的双链RNA在鲤体内具有RNAi效应。RNAi技术为获得具有特殊功能的转基因鲤提供了新的手段。     

半饥饿对转基因鲤生长和性腺发育的影响

为研究转大麻哈鱼(Oncorhynchus keta)生长激素基因鲤(转基因鲤)在不同食物含量条件下的生长竞争(主要是生长、生殖),设定正常投饲组和半饥饿试验组,每组饲养池大小相同、混养的转基因鲤和对照鲤初始总体质量相等。连续3个月定期采样后,从形态学和组织学研究转基因鲤和对照鲤(Cyprinus carpio)的生长状况、饲料占有情况和性腺发育状况。结果表明:正常投饲组的转基因鲤和对照鲤体质量相对增长率分别为127.9%和70.6%,而半饥饿试验组的转基因鲤、对照鲤的体质量相对增长率分别是72.3%和52.2%,表明无论在饱食还是在半饥饿情况下,转基因鲤均显示出快速生长的优势;2组试验鱼的性腺发育进程无明显差异(P>0.05),但在部分月份转基因鲤和对照雌、雄鲤的相对性腺质量差异显著(P<0.05),无论在饱食还是在半饥饿情况下,转基因鲤的性腺发育情况略好于对照鲤。     

新疆裸重唇鱼和斑重唇鱼遗传多样性分析

新疆裸重唇鱼和斑重唇鱼为新疆维吾尔族自治区土著鱼类。21世纪初,由于利益驱使和人类活动,资源遭到严重破坏,目前两者分别列为自治区Ⅰ、Ⅱ级水生野生保护动物。自治区渔业部门也针对其资源量开展增殖放流活动,但在物种资源保护研究方面进展缓慢,未见种群遗传多样性相关研究报道。本研究采集新疆裸重唇鱼和斑重唇鱼鳍条样本,利用16对同亚科鱼类微卫星引物对两个物种进行了种内多态性分析和种质鉴定。遗传参数分析发现,两群体平均观测杂合度(Ho)分别为0.454和0.367,平均期望杂合度(He)分别为0.397和0.245,斑重唇鱼的多态信息含量(PIC)范围在0.180～0.616之间,新疆裸重唇鱼的多态信息含量(PIC)范围在0.124～0.740之间,斑重唇鱼种群的遗传多样性要高于新疆裸重唇鱼,但遗传多样性均处于较低水平,需加强保护。