羊生长激素基因及表达产物对受体鲤鱼的促生长效应

两年的池塘生长对照实验证实了外源生长激素基因在受体鱼基因组整合及表达对部分受体鲤鱼有明显的促生长效应。实验组最大个体体重为对照组最大个体体重的1.47倍和1.15倍,从而预示转羊生长激素基因鲤鱼在速生鲤鱼品种培育方面有很好的应用前景,斑点杂交和Southern Blot杂交证实了外源基因确已整合在受体鱼基因组中,实验也表明外源基因在受体鱼基因组的插入对部分受体鱼的生长也有负效应。     

转“大麻哈鱼”生长激素基因鲤对小鼠精子致畸性的影响

通过用转"大麻哈鱼"生长激素基因鲤鱼的肉浆给小鼠进行灌胃,研究转基因鲤对哺乳动物精子致畸的影响.结果显示,灌注非转基因鲤鱼和转"大麻哈鱼"生长激素基因鲤不同剂量实验组,对小鼠精子的畸形率没有显著的差异.证明食用转"大麻哈鱼"生长激素基因鲤对哺乳动物的精子发生是安全的,初步为转基因鲤的食品安全评价提供了理论依据.     

水产生物微卫星标记技术研究进展及其应用

微卫星标记的发展和利用极大地扩展了DNA分子标记应用的深度和广度,使探索生物性状遗传本质的研究发生了革命性变化。本文简要介绍了微卫星标记技术的发展及其在水产遗传与育种研究中的应用。首先回顾了微卫星克隆技术的发展,尤其是水产生物微卫星标记及技术的发展过程,以及水产生物微卫星序列的主要来源,并对微卫星标记与其他DNA分子标记在使用范围、难易程度等方面做了比较;其次探讨了微卫星标记在遗传连锁图谱的制备、性状分析及QTL定位、群体遗传学、进化遗传、种质鉴定与亲权分析、品种培育等6个研究领域的应用;本文还对几种DNA分子标记在操作上的难易程度、多态性程度、重复性与可比性等方面进行了比较,同时还分别阐述了微卫星和其他DNA分子标记应用于水产生物研究中的适用性,并对微卫星标记的应用前景做了展望。本文旨在为微卫星标记技术在水产生物中的有效应用提供理论依据。     

水产动物分子育种研究进展

本文介绍了水产动物分子生物学尤其是分子标记的发展,比较了共显性标记和显性标记用于水产动物育种研究的优缺点.介绍了开展分子标记育种研究的基础研究--连锁图谱和经济性状QTL定位研究进展.同时还对国内外已开展的标记辅助的家系育种和QTL研究为基础的性状选择育种等研究进行了综述.最后,着重探讨了分子育种理论及作者建立的有关鲤的3种分子标记指导的育种技术.通过分子育种技术具有不同发展阶段的理论分析以及分子育种的实例介绍,旨在加快分子选择手段与常规表型选择的结合,从而推进分子育种技术在中国主要水产养殖动物育种研究中的应用.     

外源基因导入鲤受精卵最佳时期的研究

本研究以鲤鱼受精卵为材料，通过显微注射技术，在受精卵的不同发育时期把鲤鱼ＭＴ启动子基因和大麻哈鱼ＧＨ基因导入受精卵中，按孵出的鱼苗数分别计算成活率，再通过斑点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ杂交检测整合情况，计算整合率，孵化率最高的为单细胞中期（９０．８３％），整合率最高的为单细胞后期和囊胚期（４０％）。综合研究结果外源基因导入鲤鱼受精卵的最佳时期应选在单细胞后期。     

抑制消减杂交技术在鲤鱼抗寒研究中的应用

用抑制性消减杂交技术（SSH）研究与鲤鱼（Cyprinus carpio）抗寒性状相关的基因。通过对荷包红鲤抗寒品系（Cyprinus carpio wuyanensis Tchang）和柏氏鲤（Cyprinus pellegnini Tchang）杂交F2代进行降温诱导实验，获得不同温度下的实验材料。利用抑制消减杂交技术构建了一个低温下差异表达基因的消减cDNA文库，共含有2000个克降。对其叶1480个克隆进行斑点杂交筛选，共得到60个阳性克隆，选取其中29个克隆测序。通过序列分析比对，13个克隆与已知基因序列高度同源，同源性为85％-98％；另外的13个克隆为未知新基因序列。在13个同源性较高的克隆序列巾，有brevican基因、AMP—acid连接酶、CFL2基因、催产素基因、主要组织兼容复合体（MHC）Ⅱβ链、锌指蛋白、细胞色素氧化酶、EPD-1基因、透明质酸结合蛋白多糖类、核受体／类视色素信号调节器等，其中9个基因上调表达，另有4个则抑制表达。这些基因的获得可为研究鱼类抗寒性状以及从分子水平上阐明其机制提供重要依据。     

转基因鲤鲫杂交回交子代鱼的形态特征研究

通过解剖转基因鲤鲫杂交回交子代鱼、二倍体鲤和鲫鱼各30尾，观察并测定了其形态特征和内部器官结构。其主要性状为：转基因鲤鲫杂交回交子代的背鳍条Ⅲ，15—19；臀鳍条Ⅲ，5—6；侧线鳞31—38；侧线上鳞5—6；侧线下鳞5—7；鳃耙28—33；下咽齿2行。1．4—4．1；口须2对；肠长44—46；体长为体高的2．06—2．54倍，为头长的2．83—3．46倍，为尾柄长4．86—8．43倍，为背鳍基长2．18—2．80倍；头长为吻长的2．60一3．71倍，为眼径的4．20—5．20倍。为尾柄高的1．85—2．07倍；尾柄长为尾柄高的0．97—1．36倍；体高为头高的1．56—1．84倍。结果表明，转基因鲤鲫杂交回交子代的形态特征偏向于鲤鱼。     

鱼类基因工程育种技术的研究—转基因野鲤虹鳟和鲫鱼的培育

本文报道了用鼠的MT启动子与牛生长激素基因的融合基因(mMT—bGH)为目的基因,通过显微注射等方法,导入鲤鱼、鲫鱼、虹鳟等的受精卵中,Dot杂交和Southern杂交检测,阳性信号率为9％,转基因鱼的个体体重与对照组出现明显的差异,其中一部分高于对照组,另一部分低于对照组。     

荧光原位杂交概述

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术，以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法，探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结合，杂交后再通过免疫细胞化学过程连接上荧光染料。FISH的基本原理是将DNA(或RNA)探针用特殊的核苷酸分子标记，