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【目的】构建牛ATP5B基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒,并检测其在C2C12细胞系中的表达活性。【方法】从牛外周血中提取基因组DNA,通过PCR方法从牛基因组DNA中克隆获得牛ATP5B基因的5′端转录调控区的1 898bp目的片段,通过设计引物逐段缺失后获得7个亚克隆,将其纯化后经SmaⅠ和KpnⅠ双酶切与pGL3-Basic载体连接,连接产物转化感受态细胞DH5α,得到牛ATP5B基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒,经脂质体基因转染法转染C2C12细胞系后,检测7个重组质粒的荧光素酶活性;运用在线软件Gen-omatix和TFSEARCH对ATP5B启动子区序列进行分析。【结果】成功克隆获得7个系列缺失的牛ATP5B基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒pATP5B-1898、pATP5B-1607、pATP5B-1293、pATP5B-992、pATP5B-678、pATP5B-462和pATP5B-145;通过转染细胞和荧光素酶活性分析,可知构建的重组质粒均有启动子活性,且重组质粒pATP5B-678和pATP5B-462与空载体pGL3-Basic的荧光素酶活性差异极显著。软件分析结果显示,ATP5B基因启动子区域-763~-85bp存在多个重要转录调控元件。【结论】成功构建了7个系列缺失的牛ATP5B基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒,且证实-763~-230bp为牛ATP5B基因的核心启动子区域。 相似文献
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笔者结合当前陕西畜牧业发展重点,针对肉羊产业开展调查研究,提出产业发展思路,规划出不同区域产业发展布局,建议发展多元生产模式,主推八大实用技术,攻关三大技术难题,实施项目示范带动,组建专家团队,为肉羊产业发展提供强有力地技术支撑。 相似文献
63.
陕北白绒山羊是我省自主培育的具有鲜明地理标志的优良品种,经过30多年的培育发展已经成为陕北地区农村主导产业,在陕北农民增收、农业增效、农村发展中发挥着重要作用。2008年以来,我们主动围绕这一产业发展连年开展调查研究、围绕标准化示范县创建积极开展标准体系建设、围绕良繁体系建设大力推广提质增效技术,在取得成绩的同时,使认识得到进一步深化、思路得到进一步清晰。结合近年来的工作实践,就如何做大做强陕北白绒山羊产业形成一些意见。 相似文献
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65.
66.
2004年,我们在河道内成功进行大网箱养殖鳜鱼的基础上,又进行了小网箱养殖鳜鱼的试验,取得了良好的经济效益和社会效益,现将养殖技术总结如下: 相似文献
67.
68.
总结了安龙县中药材产业化发展对策,包括开展摸底调查、提出规划设想、搞好研究服务等,以期促进安龙县中药材产业化健康发展。 相似文献
69.
70.
分别采用卵黄脂蛋白多不饱和脂肪酸过氧化体系、超氧阴离子自由基体系、羟自由基体系、二苯代 苦味酰(DPPH)自由基体系以及总抗氧化能力等检测指标,对银杏中种皮采用不同提取方法(微波提取、超声提取、 乙醇和水浸提)获得的黄酮类物质的抗氧化能力进行了对比研究。结果表明,不同提取方法获得的提取液均具有较 强的抗氧化活性,而不同提取工艺可影响银杏中种皮提取液的抗氧化作用及其机理,其中乙醇浸提液对卵黄脂蛋 白过氧化体系的抑制率为50.69%,微波水提液对超氧阴离子和羟自由基的清除能力分别达213.96和411.26 U/L,乙醇超声提取液对DPPH 自由基的清除率及总抗氧化能力分别为89.8%和44.09 U/mL。 相似文献