胶东地区肉鸡大肠杆菌耐药性的研究

随着我国畜牧业的发展,兽医临床上抗菌药物被广泛应用,尤其是不合理使用,导致大肠杆菌耐药现象愈来愈严重,耐药菌不仅使抗菌药疗效减弱、治疗费增高,而且呈现出细菌的耐药性越来越强、耐药谱越来越广、耐药性形成速度越来越快的趋势,形成恶性循环,给我国畜牧业的持续发展和人类的身体健康带来潜在危害。本研究用23种药敏纸片对分离     

猪γ-干扰素基因真核重组表达质粒的构建

用RT—PCR方法从长白猪脾脏淋巴细胞中扩增出猪γ-干扰素(IFN-γ)基因，经克隆测序表明与已发表序列同源性为100％。将目的基因插入表达载体pcDNA3．1( )，构建出真核重组表达载体IFN-γ-pcDNA。将重组质粒转染COS7细胞，检测转染细胞培养上清IFN-γ活性，结果表明转染上清对猪繁殖与呼吸综合征病毒有抑制作用。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒cDNA探针的制备及初步应用

以猪繁殖与呼吸综合征 ( PRRS)病毒 ATCC VR-2 332株基因组为模板 ,通过 RT-PCR扩增出 586bp的 ORF6片段的 c DNA。将该片段克隆进 p GEM-T easy载体 ,转化大肠杆菌 JM1 0 9,成功获得重组质粒转化菌。将重组质粒经 Eco R 及 Sma 双酶切 ,回收到 1个 4 63bp的 c DNA片段 ,并制备出地高辛标记的c DNA探针。特异性检测表明 ,该探针对 PRRS病毒的 PCR产物呈现特异性 ,而对照的 HCV、PPV、PRV的核酸均呈阴性 ;敏感性检测表明 ,该探针对同源 DNA的检出限量为 4 pg。应用该探针对 6株 PRRS病毒北京分离毒及 ATCC VR-2 332株感染细胞进行原位杂交检测 ,结果均呈阳性。以上结果表明 ,该探针可成功用于组织原位杂交检测     

禽源沙门菌Ⅰ型整合子多态性的检测与分析

沙门菌是常见的人畜共患病原菌,不仅能导致鸡白痢、禽伤寒和禽类副伤寒等疾病,而且是人类伤寒、副伤寒、败血症、胃肠炎等疾病的病原菌[1-2].     

青岛地区肉鸡致病性大肠杆菌血清型鉴定及药敏试验

本试验对采自青岛地区多个肉鸡场的疑似大肠杆菌病的病、死鸡内脏器官进行病原的分离鉴定,并对大肠杆菌分离株进行培养特性、血清型及耐药性的检测.共分离到25株大肠杆菌,鉴定出15株血清型,其中以O1、O22 、O157、O24血清型为主,占定型菌株的60%.其中O22血清型占定型菌株的12%,为优势血清型.细菌的耐药性检测结果显示,分离菌株呈现出不同程度的耐药性,25株大肠杆菌对庆大霉素、阿米卡星高敏比例分别为88%和56%,卡那霉素、硫酸安普霉素次之,敏感菌株比例在20%~48%之间,乳酸环丙沙星等抑菌作用低,敏感菌株比例低于10%.而氟哌酸等对所分离的菌株几乎无抑制作用.     

一株优良乳酸菌的分离鉴定与特性研究

利用乳酸菌分离专用培养基-MRS培养基从发酵40 d的酸菜汁中分离得到一株乳酸菌,利用经典分类法对所分离的乳酸菌菌株进行了系统的细菌学鉴定和生物学特性研究。结果该菌株被鉴定为乳杆菌属、植物乳杆菌。对其进行生长曲线、pH及酸度的测定,结果显示分离乳酸菌的对数生长期较长;培养以后pH下降达到稳定;酸度较高的产酸时间为前20 h。抑菌试验表明：该菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有明显抑制作用。由于该菌具有生长快、产酸量高并具有抑菌活性等特点,因而适合作为微生态制剂的优良菌种开发利用。     

酵母铬对热应激肉鸡生长性能和血清生化指标的影响

本试验旨在研究不同添加水平酵母铬对热应激肉鸡生长性能和血清生化指标的影响.选用15日龄AA肉仔鸡216只,随机分为6个处理,在基础日粮中分别添加0(对照)、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mg/kg铬,每个处理3个重复,每个重复12只鸡,试验期4周,测定15～28 d、29～42 d、15～42 d的日增重、饲料消耗和饲料转化效率以及28、42 d血清葡萄糖、总蛋白、总胆固醇含量和肌酸激酶活性.结果表明,日粮补铬3.0、4.0和5.0 mg/kg显著提高了热应激肉鸡日增重、饲料消耗和饲料转化效率(P<0.05),其中,3.0 mg/kg铬添加水平极显著提高了热应激肉鸡29～42 d的饲料转化效率和15～42 d的日增重、饲料转化效率(P<0.01).28 d时,4.0 mg/kg铬添加组显著提高了血清总蛋白含量(P<0.05),3.0、4.0、5.0 mg/kg铬添加组显著降低了血清肌酸激酶活性(P<0.05);42 d时,日粮补铬2.0、3.0 mg/kg使血糖含量显著下降(P<0.05),3.0、4.0 mg/kg铬添加水平对血清总蛋白、总胆固醇含量产生显著影响(P<0.05),5.0 mg/kg铬添加组血清肌酸激酶活性显著下降(P<0.05).因此,酵母铬可以使热应激肉鸡血清中葡萄糖、总胆固醇含量和肌酸激酶活性下降,使血清总蛋白含量上升.酵母铬能改善热应激肉鸡的生长性能,以3.0 mg/kg铬添加水平效果最佳.     

中药制剂"瘟毒杀"对IBDV、NDV和AIV的抑制试验

选10日龄SPF鸡胚,进行了瘟毒杀煎液对鸡胚人工感染NDV、IBDV和AIV抑制试验.结果显示,瘟毒杀药液(1g/ml)2倍、4倍和6倍稀释,对感染NDV强毒的鸡胚保护率达到100%、75%和62.5%,比NDV强毒对照组分别提高87.5、62.5和50个百分点;对感染AIV强毒的鸡胚保护率达到87.5%、62.5%和50%,比AIV强毒对照组分别提高75、50和37.5个百分点;对感染IBDV强毒的鸡胚保护率达到100%、87.5%和62.5%.比IBDV强毒对照组分别提高75、62.5和37.5个百分点.NDV强毒接种组鸡胚尿囊液NDV血凝效价极显著高于NDV强毒+瘟毒杀药液组尿囊液NDV血凝效价;AIV强毒接种组鸡胚尿囊液AIV血凝效价极显著高于AIV强毒+瘟毒杀药液组尿囊液AIV血凝效价.结果表明,瘟毒杀对NDV、AIV和IBDV有较强的抑制作用.     

水貂脑膜炎奈瑟氏菌感染的诊断及药敏试验

为了对山东威海某发病水貂场的病死水貂进行病原学诊断,采用病原分离、生化试验、PCR扩增、基因序列比对等方法对分离细菌进行了鉴定,最终确定其病因为脑膜炎奈瑟氏菌感染。在此基础上进行了药敏试验,发现该脑膜炎奈瑟氏菌对所有检测药物均不敏感。     

PRRSV SD-1株ORF7基因的克隆、测序及原核表达载体的构建

参照PRRSV ATCC VR2332株基因序列设计1对引物P1、P2,经RT-PCR扩增出PRRSV SD-1株ORF7基因,经与PMD18-T Vector连接后筛选出阳性克隆株测序。把PRRSV SD-1株ORF7 cDNA亚克隆到PQE上构建PQE-N原核重组表达载体。结果表明,PRRSV SD-1株ORF7核甘酸序列与PRRSV ATCC VR2332株ORF7核甘酸序列完全一致,与欧洲株LV符合率为58%。成功构建原核表达载体PQE-N,为N蛋白的研究和制备诊断性抗原奠定了基础。