核酸探针检测人工感染猪及死胎的猪繁殖与呼吸综合症病毒

利用反转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术扩增出猪繁殖与呼吸综合症病毒（ＰＲＲＳＶ）美洲株ＡＴＣＣ ＶＲ－２３３２ＯＲＦ６及部分ＯＲＦ７５８６ｂｐ的ｃＤＮＡ。将ＰＣＲ产物连接进线状克隆载体ｐＧＥＭ－Ｔｅａｓｙ ｖｅｃｔｏｒ后获阳性重组质粒。用ＥｃｏＲＩ及ＳｍａＩ双酶切阳性重组质粒ＤＮＡ,回收４６３ｂｐ的小片段并以此制备出地高辛标记的核酸探针。应用该探针对４头鼻内人工感染ＡＴＣＣＶＲ－２３３２的     

荷斯坦成年奶牛枯草芽孢杆菌的分离与鉴定

从健康荷斯坦成年奶牛新鲜粪便中分离纯化出1株疑似芽孢杆菌属菌株,编号为K.对该菌株进行形态学观察、生化试验、16S rDNA序列测定等.试验结果表明,该菌菌体革兰氏染色阳性,芽孢染色为绿色,呈长杆状,芽孢中生,椭圆;能发酵糖醇,吲哚试验阳性,触媒试验阳性,能产生淀粉酶,并可以液化明胶,16S rDNA测序序列同源性比较结果表明菌K为枯草芽孢杆菌;本试验为获得反刍动物有益菌种及研制反刍动物微生态制剂奠定基础.     

不同序列的CpG-ODN对猪体外免疫细胞免疫刺激作用的研究

为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸（CpG-ODN），人工设计合成了9种未甲基化CpCr-ODN不同序列，分别作用于健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞，进行体外转化试验。用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测外周血淋巴细胞转化效果和脾细胞的增殖能力和代谢能力，通过测得的OD490值，计算出淋巴细胞增殖指数（SI），筛选CpG-ODN的免疫刺激作用。结果显示：9种不同序列的CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞均具有不同程度的刺激作用，其中CpG-ODN7对淋巴细胞增殖能力的增强效果最为明显（sI=3．5），CpG-ODN6对猪脾脏免疫细胞的刺激指数最大（SI=2．7）。为研制猪DNA疫苗有效的CpG-ODN免疫佐剂奠定了基础。     

应用型高校兽医免疫学教学方法探究

为了适应学校应用名校工程建设的需要,提高课堂教学质量,使学生更好地学习、理解和掌握免疫学理论知识,对兽医免疫学的教学方法与教学手段进行探索和改革,包括注重应用能力的培养,提高课堂教学的技巧和艺术,提高抽象理论的教学效果,创新实验教学体系等.     

CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞免疫刺激作用的初步研究

为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN),设计了9种未甲基化CpG-ODN不同序列,通过人工合成,分别作用于猪外周血淋巴细胞和脾细胞,进行健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞体外转化试验。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测外周血淋巴细胞转化效果和脾细胞的增殖能力和代谢能力,通过测得的OD490值,计算出淋巴细胞增殖指数(SI),筛选CpG-ODN的免疫刺激作用。结果显示:9种不同序列的CpG-ODN对猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞均具有不同程度的刺激效果,其中CpG-ODN6、CpG-ODN7刺激强度极显著。为研制DNA疫苗有效的CpG-ODN免疫佐剂奠定基础。     

大肠杆菌噬菌体抗性菌株与其敏感菌株的比较研究

噬菌体抗性菌株的产生是噬菌体治疗领域普遍关注的问题,为研究噬菌体的抗性菌株与其敏感菌株之间的的差别,本研究将大肠杆菌短尾噬菌体Bp4与宿主大肠杆菌共培养,经双层平板法筛选,结果显示获得了对噬菌体具有抗性的大肠杆菌,且该抗性菌株不能被Bp4裂解.将该抗性菌株与其敏感菌株进行了形态及培养特性的比较,发现二者基本一致;基因组...     

纳米氧化锌对肉鸡免疫性能及组织锌含量的影响

本试验研究了纳米氧化锌对肉鸡免疫性能及组织锌含量的影响。选用1日龄AA肉仔鸡192只,随机分为4组,每组设4个重复,每个重复12只鸡。在玉米-豆粕型日粮基础上添加纳米氧化锌0mg/kg(对照)、40mg/kg、80mg/kg、120mg/kg,全期分为0~21日龄、22~42日龄两个饲养阶段。按常规免疫鸡群新城疫(ND),每隔7d翼下静脉采血(8只/组)用HA-HI法测定ND的抗体滴度;并于21日龄和42日龄时各宰杀48只体重接近全群平均体重的试验鸡(3只/重复),取其胸腺、脾脏和法氏囊分别称重,同时采集肝脏、胫骨及血清样品,用于测定血清、肝脏、胫骨锌含量和血清碱性磷酸酶活性,取抗凝血(4只/组),MTT法测定淋巴细胞转化率。结果表明:添加40~80mg/kg水平纳米氧化锌,显著提高了肉鸡的免疫能力(P<0.05),提高了外周血T淋巴细胞转化率;添加40mg/kg纳米氧化锌可显著提高肉鸡肝脏和胫骨中锌含量和血清碱性磷酸酶活性(P<0.05)。因此,纳米氧化锌在40~80mg/kg添加水平时能较显著的增强肉鸡的免疫能力,增加组织中锌含量。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌微量凝集试验方法的建立及初步应用

为建立一种快速检测动物源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法,本研究以MRSA耐药性决定蛋白PBP2a的抗血清为检测抗体,通过对抗原浓度及反应温度等进行优化,确定最佳的反应条件后,建立了快速检测MRSA的微量凝集试验方法,并进行了敏感性、特异性、重复性试验以及药敏纸片法比较试验。其中,微量凝集试验最低检出MRSA的浓度为40亿/mL,该方法对MRSA的凝集反应具有良好的特异性,试验结果具有较好的重复性。采用该检测方法对分离自鸡、猪、家兔及小鼠的75株金黄色葡萄球菌进行检测,检出MRSA株占57.3%,经过与药敏纸片法检测进行比较,符合率为92%。该方法快速、准确、简单易行,适于临床或基层应用。     

猪繁殖与呼吸综合征病理组织学观察

采集患有猪繁殖与呼吸综合征的病死猪肺脏、肝脏、脾脏和淋巴结,经固定、脱水、透明、浸蜡、切片、HE染色,在光学显微镜下观察以上各脏器的病理变化。结果表明,各脏器主要病理变化是出血和淤血;肺脏的细支气管萎缩,肺泡壁上皮巨噬细胞增生;肝脏有颗粒变性,脾脏白髓周围有"红晕";淋巴结淋巴中心细胞坏死。