响应面法优化重组枯草芽孢杆菌产脂肪氧合酶条件

采用Plackett-Burman设计法,对影响重组枯草芽孢杆菌发酵产脂肪氧合酶的7个相关因子进行筛选,并建立枯草芽孢杆菌产脂肪氧合酶的最佳工艺。结果表明对重组菌发酵产酶具有显著影响的因子是乳糖、发酵时间和发酵温度。依据Plackett-Burman设计法的筛选结果,进一步采用响应面中心组合设计(Central Composite Design)对显著影响因子的最佳水平和交互作用进行研究,通过模型方程的3-D图和等高线图发现,当乳糖浓度为16.9g/L、发酵时间为88.49 h、发酵温度为29.71℃和装液量为61.31ml时,出现酶活最大预测值164.90 U/ml,验证试验证实了在上述条件下得出的酶活为167.32U/ml,与预测值高度吻合。优化后的培养基和培养条件使得重组脂肪氧合酶产量较优化前提高了2.37倍。     

松材线虫携带的一株致病细菌对非寄主植物的毒性及对黑松LOX酶活性的影响

在实验中发现松材线虫携带的一株致病菌株荧光假单孢菌Pseudomonas fluorescens GcM51A毒素液对玉米、小麦、木耳菜和油麦菜均有毒害作用。以松针为材料，用不同浓度的毒素液处理，测定不同时间内松针细胞脂氧和酶活性的变化。结果表明毒素原液处理的松针LOX活性在处理后的18h达到高峰，随后逐渐下降；稀释5倍处理的松针LOX活性在6～12h呈上升趋势，之后逐渐下降。     

盐胁迫下小麦愈伤组织生理生化特性的变化

以小麦花药胚性愈伤组织为材料,研究了用１ｍｇ·Ｌ－１ＮａＣｌ处理后几种重要酶活性的变化。结果表明：ＮａＣｌ处理能抑制愈伤组织生长,使可溶性蛋白质含量、组织含水量降低,ＳＯＤ,ＰＯＤ活性升高;随着胁迫程度增加,ＭＤＡ含量升高,膜脂过氧化程度加剧,ＰＯＤ,ＬＯＸ活性升高,ＳＯＤ活性下降     

高等植物脂氧合酶活性测定方法的研究进展

本文系统归纳了高等植物脂氧合酶活性检测方法的研究进展。常规检测方法可分为两类：一类基于检测脂氧合酶催化反应产生氢过氧化物的速度,包括胡萝卜素脱色法、Fe（CNS）3显色法、标准分光光度法、2-硫代巴比妥酸显色法、碘化钾-淀粉法、二甲苯酚橙法;另一类基于检测反应中底物摄取氧的速度,包括量压法、氧电极法、亚甲基蓝染色法。此外还有酶联免疫法、超弱发光发射光谱法以及放射性同位素标记法。其中,标准分光度法和氧电极法为脂氧合酶活性检测的标准方法。本文可为特定高等植物脂氧合酶活性的高效、准确测定提供参考。     

不同贮藏温度下油采后生理变化及其与耐贮性的关系

研究了油[木奈]果实在室温、（8±1）℃和（3±1）℃贮藏温度下呼吸强度、乙烯生物合成、脂氧合酶活性、果实硬度和乙醇含量等变化特点．分析了它们与油[木奈]耐贮性的关系．并探求油[木奈]果实最佳冷藏温度,结果表明：在3个贮藏温度下,油[木奈]果实呼吸速率呈双峰型,而内源乙烯释放速率主要表现出单个大高峰,其与第2次呼吸跃变峰和ACC氧化酶活性高峰在发生时间上几乎具有同步性,而LOX活性峰与ACC含量积累峰具有协同性,并发生在乙烯和呼吸跃变前1周左右,可作为果实转向衰老和不耐贮藏前期的预兆;（3±1）℃比（8±1）℃下冷藏显著地抑制了各指标的变化．并推迟了呼吸、乙烯和LOX跃变期的到来,有效地延缓了果实后熟衰老进程,使油棒贮藏期延长到77d以上．并未发现果实褐变。因此,油[木奈]果实最适冷藏温度以（3±1）℃为佳。     

黄瓜果实脂氧合酶活性测定方法的建立

采用紫外分光光度法,以亚油酸钠为反应底物,研究了黄瓜果实脂氧合酶(LOX)的酶活性测定方法。结果表明,黄瓜果实脂氧合酶最适pH为7.0,最适温度为40℃,最适底物浓度为3.3×10-4mol.L-1。该酶有着很好的热稳定性,90℃保温1h后仍具有很高的活性,70℃保温1h可能对该酶的活性有激活作用。     

水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫中的作用

LOX3是主要的水稻种胚脂氧合酶同工酶。为了研究水稻LOX3基因在逆境胁迫中的作用,构建了LOX3基因的反义植物表达载体,用农杆菌介导法转化水稻品种武运粳7号和Kasalath,获得了转基因植株。PCR和Southern鉴定证实基因已经导入水稻基因组中,种胚LOX3缺失鉴定和半定量RT PCR分析证实反义RNA抑制了LOX3基因的表达。对T2代转基因植株进行了水分胁迫处理及稻瘟病和白叶枯病的接种鉴定。结果显示,与非转基因对照相比,反义LOX3转基因植株对水分胁迫、稻瘟病和白叶枯病都表现敏感,说明水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫反应中发挥一定的作用。     

植物脂肪氧化酶的特性与功能

脂质过氧化普遍存在于植物的发育及其与环境互作过程中,而脂肪氧化酶是催化脂质过氧化的关键酶,也是一种多功能酶,催化多种生理反应。综述了植物脂肪氧化酶的生理特性及其生物学功能。     

104个小麦品种（系）脂肪氧化酶活性

[目的]研究小麦籽粒中的脂肪氧化酶(LOX)活性的变异规律及分布特点,为从遗传育种角度改善小麦籽粒的耐储藏品质提供依据.[方法]选用104个小麦品种(系)为试验材料,用分光光度计法测定其LOX活性.[结果]2年测定的供试小麦品种(系)间的LOX活性均达到极显著差异,变异系数均大于30%,年份间LOX活性相关极显著(r=O.605),表明2个年度的品种(系)间差异顺序基本一致,认为LOX活性主要受遗传控制.在上述分析基础上,用最长距离法将供试的104份材料的LOX活性聚为5类.[结论]供试小麦品种(系)间LOX活性差异显著;在供试的104个小麦品种(系)中,筛选到6份低LOX活性的品种资源,且多为中一强筋白皮小麦.     

茶树脂肪氧合酶(LOX)基因家族成员的分子进化及密码子偏好性分析

脂肪氧合酶(lipoxygenase,LOX,EC 1.13.11.12)是一类含有铁离子的血红素双加氧酶,专一催化多元不饱和脂肪酸加氧反应。基于茶树基因组数据,对筛选获得的12个LOX基因家族成员的分子特性、进化规律及密码子偏好性进行分析归纳。理化性质检测结果表明,茶树LOX家族成员中以Cs LOX6的开放阅读框(open reading frame,ORFs)最长(2 778 bp),编码925个氨基酸,蛋白分子量为104.5 k Da。通过氨基酸序列同源比对,构建茶树LOX基因家族成员与26个物种(均系双子叶植物纲)的37个LOX基因的系统发育进化树,结果发现,茶树LOX基因家族成员可被分为9-LOX亚族(5个)、13-LOX TypeⅠ亚类(5个)及13-LOX TypeⅡ亚类(2个),但13-LOX TypeⅡ亚类中的Cs LOX5基因,并不具有转运肽(transit peptide)前导序列。对茶树基因组LOX家族成员基因密码子相对偏好使用度(relative synonymous codon usage,RSCU)及偏好性参数进行分析,结果表明:茶树LOX基因家族成员存在着4个密码子在编码基因上被高频率选用,9个密码子被低频率选用;茶树LOX基因家族成员的密码子选用偏好性普遍较弱,并偏好以A/T作为结尾。此外,以最近邻元素法(Neighbor-Joining,NJ)对密码子RSCU值进行聚类分析,结果发现,RSCU值的聚类与以编码序列(coding sequences,CDS)构建的系统发育进化树之间,在Cs LOX10基因的聚类上存在差异。